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抗牛精子膜蛋白单链抗体基因的克隆与表达

第一章 文献综述Ⅰ精子膜蛋白研究进展第1-27页
   ·精卵识别、结合相关的蛋白第10-18页
     ·乳酸脱氢酶-C4(LDH-C4)第11-12页
     ·P34H/P26h蛋白第12-13页
     ·受精抗原1(FA-1)第13-15页
     ·唾液酸(Sialic acid,SA)第15页
     ·卵裂信号蛋白(C1eavage Singal 1,CS-1)第15-16页
     ·附睾DE蛋白(DE/CRISP1)第16页
     ·磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)第16-17页
     ·纤溶酶原激活因子(PA)第17-18页
   ·受体类蛋白第18-19页
     ·孕激素受体(progesterone receptor,PR)第18页
     ·Y-氨基丁酸受体(gamma-aminobutyric acid receptor,GABA-R)第18页
     ·肿瘤坏死因子受体(tummor necrosis factors receptor,TNF-R)第18页
     ·血小板活化因子受体(PAF-R)第18-19页
     ·血管紧张素Ⅱ受体(AT1)第19页
   ·精子自身抗原系列第19-25页
     ·兔精子自身抗原(RSA s)系列第19-20页
     ·PH-20抗原第20页
     ·SP-10抗原(Sperm Protein 10)第20-21页
     ·受精素(fertilin)第21-23页
     ·HSA-63抗原第23页
     ·FA-2抗原第23-24页
     ·人精子抗原基因表达克隆(HSG3)第24页
     ·精子膜蛋白相关基因(SAMP32)第24页
     ·睾丸专一性抗原1(7SA-1)第24页
     ·人类精子膜蛋白(hSMP-1)第24-25页
   ·精子质膜蛋白的变化第25-26页
     ·顶体反应中精子质膜蛋白的变化第25-26页
     ·与卵膜的结合和融合过程中精子质膜蛋白SLIP的变化第26页
   ·小结第26-27页
第二章 文献综述Ⅱ噬菌体展示技术及其应用第27-44页
   ·基本原理第27-34页
     ·噬菌体载体第27-31页
     ·噬菌体展示文库的构建第31-32页
     ·噬菌体抗体的筛选和富集第32-34页
     ·噬菌体抗体亲和力的提高第34页
   ·噬菌体展示技术的应用第34-44页
     ·基因工程抗体研究第34-35页
     ·医学微生物学研究第35-39页
     ·自身免疫性疾病的研究第39-40页
     ·肿瘤研究第40-42页
     ·其它研究第42-44页
第三章 抗牛精子膜蛋白单链抗体基因的克隆及其表达第44-67页
   ·实验材料与方法:第45-56页
     ·材料第45-50页
     ·方法第50-56页
   ·结果与分析:第56-64页
     ·杂交瘤细胞总RNA的提取第56页
     ·可变区基因VH、VL的克隆第56-57页
     ·可变区基因VH、VL片段与连接肽引物的组装第57-58页
     ·单链抗体文库的构建及亲和富集、筛选第58-59页
     ·噬菌体抗体克隆pCSA1基因克隆到T载体上及其鉴定第59页
     ·pCSA1克隆的测序结果及其分析第59-62页
     ·表达载体的鉴定第62-64页
     ·重组蛋白的SDS-PAGE第64页
   ·讨论:第64-67页
     ·抗牛精子sp18蛋白的噬菌体抗体库的建立与筛选第64-65页
     ·pCSA1克隆ScFv基因与pET-30a的融合表达第65-67页
第四章 抗牛精子单链抗体文库的构建与筛选第67-79页
   ·材料与方法:第67-72页
     ·材料第67-68页
     ·方法第68-72页
   ·结果与分析:第72-77页
     ·BALB/c小鼠抗血清效价第72页
     ·脾脏组织总RNA的提取第72页
     ·可变区基因VH、VL的克隆及其组装产物第72-73页
     ·单链抗体文库的构建及筛选第73-75页
     ·噬菌体抗体克隆的测序第75-77页
   ·讨论:第77-79页
结论第79-80页
未来的工作方向第80-81页
参考文献第81-94页
致谢第94-95页
附录第95-101页
作者简介第101页

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