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h-CR1及m-CR1基因在E.coli和Pichia pastoris中的克隆表达及其抗体制备

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
前言第12-27页
缩略语一览表第27-29页
第一部分 h-CR1基因在毕赤酵母中的克隆及表达第29-41页
   ·材料和方法第29-37页
     ·菌种第29页
     ·质粒第29页
     ·培养基第29-30页
     ·试剂第30-33页
     ·主要仪器第33页
     ·主要方法第33-37页
   ·实验结果第37-40页
     ·构建h-CR1基因表达载体pPIC9-hCR1第37页
     ·表达载体电转化毕赤酵母GS115及转化子筛选和表达结果第37-39页
     ·目的基因h-CR1整合到毕赤酵母GS115染色体中的证明第39-40页
   ·讨论第40-41页
第二部分 h-CR1基因在大肠杆菌中的克隆及表达第41-49页
   ·材料和方法第41-43页
     ·菌种第41-42页
     ·质粒第42页
     ·E.coli表达培养基第42页
     ·试剂第42页
     ·主要方法第42-43页
   ·实验结果第43-48页
     ·构建表达载体第43-45页
     ·h-CR1基因在大肠杆菌中表达第45-46页
     ·表达蛋白包涵体鉴定第46-47页
     ·表达载体pET24-hCR1-T在宿主BL21(DE3)中的表达第47-48页
   ·讨论第48-49页
第三部分 m-CR1基因的克隆与在大肠杆菌中的表达第49-58页
   ·材料和方法第49-52页
     ·菌种和实验动物第49-50页
     ·质粒第50页
     ·E.coli表达培养基第50页
     ·其它特殊试剂、工具酶及试剂盒第50页
     ·主要方法第50-52页
   ·实验结果第52-57页
     ·m-CR1 cDNA的获得第52-54页
     ·m-CR1原核表达载体的构建及其与h-CR1的同源性比较第54-55页
     ·m-CR1在大肠杆菌中的表达第55-57页
   ·讨论第57-58页
第四部分 兔抗大肠杆菌表达蛋白抗体的制备及检测第58-74页
   ·材料和方法第58-62页
     ·实验动物和细胞第58页
     ·其它特殊试剂第58-59页
     ·主要仪器及耗材第59-60页
     ·主要方法第60-62页
   ·实验结果第62-71页
     ·h-CR1和m-CR1表达蛋白的纯化第62-63页
     ·抗体的产生及效价测定第63-69页
     ·抗体与抗原反应的剂量关系与特异性测定第69-71页
   ·讨论第71-74页
结论第74-75页
参考文献第75-77页
致谢第77-78页
附录第78-83页
攻读学位期间发表的学术论文目录第83页

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