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玉米锌铁转运蛋白ZmZIP4基因的玉米转化及功能验证

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-20页
   ·ZIP 蛋白的命名及功能结构特点第9页
   ·植物中的锌铁转运体基因的研究进展第9-12页
     ·拟南芥(Arabidopsis)基因组中的ZIP 基因家族成员第9-10页
     ·水稻(Oryza sativa L)中的ZIP 基因家族成员第10-11页
     ·大麦(Hordeum vulgare)中的ZIP 基因家族成员第11页
     ·苜蓿(Medicago truncatula)中的ZIP 基因家族成员第11-12页
     ·玉米(Zea mays)中的ZIP 基因家族成员第12页
   ·转基因技术简述第12-13页
   ·植物转基因技术第13-15页
     ·基因枪介导转化法第13页
     ·农杆菌介导的遗传转化第13页
     ·原生质融合法第13-14页
     ·花粉通道法第14-15页
   ·转基因植株的分子检测第15-16页
     ·多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)第15页
     ·实时荧光定量PCR(Real time PCR)第15页
     ·逆转录PCR(RT-PCR)第15-16页
     ·Southern/Northern 印迹杂交第16页
     ·Western 杂交第16页
   ·基因功能鉴定第16-18页
     ·基因的时空表达特性第17页
     ·基因的组织特异性第17页
     ·生物信息学在基因功能预测方面的分析第17-18页
   ·基因功能分析方法第18页
     ·基因超表达研究第18页
   ·本研究的目的和意义第18-20页
2 材料与方法第20-33页
   ·实验材料第20页
     ·植物受体材料第20页
     ·用于转化的菌株,质粒载体,感受态细胞第20页
     ·酶和其他试剂第20页
   ·实验方法第20-33页
     ·玉米受体材料的初步筛选第20-22页
     ·遗传转化载体的构建第22-27页
     ·基因枪转化第27-29页
     ·转基因植株的分子检测第29-33页
3 结果与分析第33-45页
   ·玉米转化受体材料的初步筛选第33-37页
     ·广谱N6 培养基筛选结果第33-34页
     ·农系531 专利培养基筛选结果第34-35页
     ·广谱N6 组培培养基和农系531 专利培养基对农系85 的对比培养第35-37页
   ·玉米遗传转化载体的构建第37-39页
     ·玉米超表达载体pCAMBIA3301-ZmZIP4 的构建与鉴定第37页
     ·玉米胚乳特异性表达载体pr-ZmZIP4 的构建与鉴定第37-39页
   ·基因枪转化第39-40页
     ·转化材料准备第39-40页
     ·基因枪转化结果第40页
   ·抗性愈伤的PCR 检测第40-45页
     ·对pCAMBIA3301-ZmZIP4 和pr-ZmZIP4 的抗性愈伤进行PCR 检测第40-42页
     ·对温室苗的抗除草剂检测第42页
     ·转基因抗性愈伤成苗过程中缺锌胁迫培养第42-44页
     ·对35s 组成型表达的转基因苗的RT-PCR 检测第44-45页
4. 讨论第45-48页
   ·玉米转化受体材料的筛选第45-46页
     ·愈伤组织培养及植株再生第45-46页
     ·组培中存在的问题第46页
   ·基因枪转化玉米愈伤第46-47页
   ·利用35s 超表达启动子转化玉米Zm-ZIP4 基因可能存在的问题第47页
   ·胚乳特异性表载体Pr-ZmZIP4 表达核转化的实验后续工作的讨论第47-48页
5 结论第48-49页
附录第49-51页
参考文献第51-54页
在读期间发表的学术论文第54-55页
作者简介第55-56页
致谢第56-57页

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