噬菌体展示青霉素G酰化酶大肠杆菌—枯草杆菌通用表达载体的构建
| 第一章 噬菌体展示青霉素G酰化酶 | 第1页 |
| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 引言 | 第6-4页 |
| 1 材料与方法 | 第11-13页 |
| ·材料 | 第11页 |
| ·方法 | 第11-13页 |
| ·质粒构建 | 第11页 |
| ·噬菌体制备 | 第11-12页 |
| ·滴度测定 | 第12-13页 |
| ·PCR扩增检验噬菌粒是否扩增 | 第13页 |
| ·PGA酶活测定 | 第13页 |
| ·NIPAB滤纸法测定菌落PGA酶活性 | 第13页 |
| 2 结果 | 第13-16页 |
| ·PGA基因和g3序列通过linker的连接 | 第13-14页 |
| ·噬菌粒psurfpga的构建和鉴定 | 第14-15页 |
| ·PGA的噬菌体展示 | 第15-16页 |
| ·酶活测定 | 第16页 |
| 3 讨论 | 第16-17页 |
| 4 参考文献 | 第17-4页 |
| 第二章 大肠杆菌-枯草杆菌通用表达载体的构建 | 第4-42页 |
| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5-22页 |
| 引言 | 第22-42页 |
| 1 材料与方法 | 第27-35页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-35页 |
| ·表达质粒pzfpganoti的构建 | 第28-32页 |
| ·信号肽酶切位点的设计 | 第28-29页 |
| ·质粒构建 | 第29-32页 |
| ·枯草转化 | 第32页 |
| ·PGA酶活测定 | 第32页 |
| ·NIPAB滤纸法测定菌落PGA酶活性 | 第32页 |
| ·表达质粒pzcp980的构建 | 第32-35页 |
| ·质粒puc980的构建 | 第32页 |
| ·puc980多克隆位点改造 | 第32-34页 |
| ·SignalP演绎法推算酶切位点 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-38页 |
| ·质粒pzfpganoti的构建和鉴定 | 第35-37页 |
| ·质粒pzcp980的构建和鉴定 | 第37页 |
| ·质粒pzcp9801的构建和鉴定 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 4 参考文献 | 第39-42页 |
| 发表论文 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43页 |
