摘要 | 第1-8页 |
符号及缩略语 | 第8-9页 |
引言 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-30页 |
第一节 植物热胁迫反应与热激蛋白的研究 | 第11-20页 |
1 高温胁迫对植物的影响 | 第11-12页 |
2 植物抵抗热胁迫的方法 | 第12-13页 |
3 植物热激蛋白在植物热胁迫反应中的作用研究 | 第13-16页 |
3.1 热激蛋白的发现、研究历史及其产生 | 第13-14页 |
3.2 热激蛋白的种类及作用 | 第14-16页 |
4 热激蛋白基因表达调控及转录因子的研究 | 第16-20页 |
4.1 转录因子的种类及功能 | 第16-17页 |
4.2 热激蛋白的转录调控 | 第17-20页 |
第二节 植物遗传转化技术的研究 | 第20-27页 |
1 有载体介导的生物学转化 | 第20-21页 |
1.1 农杆菌介导的基因转化 | 第20-21页 |
1.2 病毒介导的基因转化 | 第21页 |
2 外源DNA直接导入法 | 第21-23页 |
2.1 化学法 | 第21-22页 |
2.2 物理法 | 第22-23页 |
3 植物种质系统介导的基因转化 | 第23-27页 |
3.1 花粉管通道法基本原理 | 第23页 |
3.2 花粉管通道法历史发展及研究现状 | 第23-26页 |
3.3 花粉管通道法主要方法及应用 | 第26-27页 |
第三节 不结球白菜耐热性研究及外源基因转化的研究 | 第27-30页 |
1 不结球白菜耐热性研究意义及其进展 | 第27-28页 |
2 不结球白菜外源基因转化的研究 | 第28-30页 |
第二章 农杆菌介导的热激转录因子基因转化 | 第30-53页 |
第一节 不结球白菜离体再生体系的研究 | 第30-37页 |
1 材料 | 第30-31页 |
1.1 供试材料 | 第30页 |
1.2 不结球白菜培养基 | 第30-31页 |
2 方法 | 第31-32页 |
2.1 无菌苗的获得 | 第31页 |
2.2 诱导不定芽再生的分化培养基成分的确定 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-35页 |
3.1 不结球白菜不同基因型分化能力的确定 | 第32页 |
3.2 “苏州青”子叶再生分化的最佳培养基及激素组合 | 第32-35页 |
3.2.1 含有ABA的激素组合对“苏州青”子叶不定芽分化的影响 | 第33-34页 |
3.2.2 含有GA的激素组合对“苏州青”子叶不定芽分化的影响 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
4.1 ABA及GA对不结球白菜不定芽再生的影响 | 第35-36页 |
4.2 “苏州青”离体再生体系的建立与外源基因的转化 | 第36-37页 |
第二节 不结球白菜热激转录因子基因的转化 | 第37-53页 |
1 材料 | 第37-41页 |
1.1 供试材料 | 第37页 |
1.2 供试菌株与质粒 | 第37-41页 |
1.3 主要生化试剂 | 第41页 |
1.4 培养基及试剂 | 第41页 |
2 方法 | 第41-47页 |
2.1 质粒DNA的转化扩增与抽提 | 第41-43页 |
2.2 电击法转化根癌农杆菌及其质粒抽提 | 第43-44页 |
2.3 不结球白菜耐热性状的遗传转化 | 第44页 |
2.4 卡那霉素对不结球白菜再生苗的选择压确定 | 第44-45页 |
2.5 不结球白菜转化植株的鉴定 | 第45-47页 |
3 结果与分析 | 第47-50页 |
3.1 卡那霉素对不结球白菜再生苗的选择压确定 | 第47-48页 |
3.2 不结球白菜转基因植株的获得 | 第48-50页 |
3.2.1 抗性植株的GUS染色 | 第48页 |
3.2.2 GUS阳性苗的PCR检测 | 第48页 |
3.2.3 GUS阳性苗的RT-PCR检测 | 第48页 |
3.2.4 PCR及RT-PCR产物的Southern杂交 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 卡那霉素对于不结球白菜再生苗的影响 | 第50-51页 |
4.2 农杆菌介导的外源基因转化不结球白菜的实用性探讨 | 第51-53页 |
第三章 热激转录因子基因经过花粉管通道的转化 | 第53-62页 |
1 材料 | 第53-54页 |
1.1 供试材料 | 第53页 |
1.2 外源热激转录因子基因的制备 | 第53-54页 |
2 方法 | 第54页 |
2.1 外源基因的转化 | 第54页 |
2.2 不结球白菜转化植株的鉴定 | 第54页 |
3 结果与分析 | 第54-57页 |
3.1 不结球白菜转基因种子的获得 | 第54页 |
3.2 不结球白菜GUS阳性苗的获得 | 第54-55页 |
3.3 GUS阳性苗的PCR检测 | 第55-56页 |
3.4 PCR结果的Southern杂交 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-62页 |
4.1 花粉管通道法导入的基因的稳定性探讨 | 第57-59页 |
4.2 利用花粉管通道法转化不结球白菜的实用性探讨 | 第59-60页 |
4.3 雄性不育系在外源基因转化中的应用 | 第60页 |
4.4 转化热激转录因子基因HSF与耐热性获得的探讨 | 第60-61页 |
4.5 关于不结球白菜转化HSF基因安全性的探讨 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录 | 第69-74页 |
致谢 | 第74页 |