Abbreviation | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
前言 | 第8-12页 |
第一章 重组人leptin单克隆抗体的制备及特性鉴定 | 第12-26页 |
1 材料与试剂 | 第12-13页 |
2 方法 | 第13-17页 |
2.1 单克隆抗体的制备 | 第13-15页 |
2.2 McAb特性分析 | 第15-17页 |
3 试验结果 | 第17-26页 |
3.1 细胞融合 | 第17-18页 |
3.2 特异性鉴定 | 第18页 |
3.3 杂交瘤克隆化结果 | 第18页 |
3.4 McAb分类及特异性效价测定 | 第18-19页 |
3.5 稳定性实验 | 第19页 |
3.6 McAb配对试验 | 第19-20页 |
3.7 抗体亲合力测定 | 第20页 |
3.8 McAb纯化结果 | 第20-23页 |
3 讨论 | 第23-26页 |
第二章 多克隆抗血清及酶标抗体的制备 | 第26-35页 |
1 材料和试剂 | 第26页 |
2 方法 | 第26-30页 |
2.1 动物免疫 | 第26-27页 |
2.2 抗血清的采集 | 第27页 |
2.3 抗血清的效价测定 | 第27页 |
2.4 特异性测定 | 第27页 |
2.5 抗血清的纯化 | 第27-28页 |
2.6 酶标抗体的制备与鉴定 | 第28-30页 |
3 结果和讨论 | 第30-35页 |
3.1 动物免疫 | 第30-31页 |
3.2 抗血清的特异性鉴定 | 第31页 |
3.3 抗血清的纯化结果 | 第31-33页 |
3.4 酶标抗体的质量鉴定 | 第33页 |
3.5 酶标抗体的纯化 | 第33-34页 |
3.6 酶结合物的免疫学活性 | 第34-35页 |
第三章 ELISA方法的初步建立 | 第35-45页 |
1 材料与仪器 | 第35页 |
2 实验方法 | 第35-37页 |
2.1 抗体直接包被与牛血清白蛋白-戊二醛间接包被比较试验 | 第35页 |
2.2 单抗与多抗配对比较实验 | 第35-36页 |
2.3 包被抗体稀释度与酶标抗体使用浓度的确定 | 第36页 |
2.4 标准曲线的建立 | 第36页 |
2.5 双抗体夹心ELISA法步骤 | 第36-37页 |
2.6 自制标准品校正试验 | 第37页 |
2.7 模拟标本的测定 | 第37页 |
2.8 方法精密度、回收率及灵敏度测定 | 第37页 |
3 结果 | 第37-42页 |
3.1 牛血清白蛋白-戊二醛处理包被板 | 第37-38页 |
3.2 单抗与多抗配对比较结果 | 第38-39页 |
3.3 双抗体夹心ELISA法最佳条件的选择 | 第39-40页 |
3.4 标准曲线的制作 | 第40页 |
3.5 自制标准品校正试验 | 第40页 |
3.6 检测模拟标本 | 第40-41页 |
3.7 方法的灵敏度,和批间、批内变异系数 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
总结 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |
致谢 | 第48页 |