摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-18页 |
第一章 绪论 | 第18-38页 |
·胚胎干细胞 | 第18-19页 |
·成体干细胞 | 第19页 |
·造血干细胞 | 第19-21页 |
·自我复制或自我更新 | 第20页 |
·多向分化潜能 | 第20-21页 |
·表面标志 | 第21页 |
·脐血造血干细胞 | 第21-22页 |
·脐血造血干细胞的特点 | 第21-22页 |
·脐血造血干细胞的保存 | 第22页 |
·造血微环境 | 第22-23页 |
·造血干细胞B细胞分化 | 第23-28页 |
·造血干细胞分化为祖B细胞 | 第24-25页 |
·从祖B细胞到前B细胞 | 第25-27页 |
·从前B细胞到未成熟B细胞 | 第27页 |
·从未成熟B细胞到成熟B细胞 | 第27-28页 |
·立题依据及主要研究内容 | 第28-30页 |
参考文献 | 第30-38页 |
第二章 脐血造血干/祖细胞密度分离及生物学活性实验研究 | 第38-56页 |
·实验仪器和材料 | 第38-40页 |
·实验动物 | 第38页 |
·实验试剂 | 第38-39页 |
·实验耗材 | 第39页 |
·实验仪器 | 第39页 |
·试剂配制 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·脐血采集 | 第40-41页 |
·不同比密Ficoll-泛影葡胺分离液分离脐血单个核细胞制备 | 第41页 |
·脐血细胞成分测定 | 第41页 |
·流式细胞仪测定 | 第41页 |
·造血祖细胞集落培养 | 第41页 |
·脐血MNC体外扩增 | 第41-42页 |
·BALB/c小鼠照射 | 第42页 |
·供体细胞制备及输注 | 第42页 |
·受体小鼠脾CFU-S检测 | 第42页 |
·实验数据的统计学处理 | 第42页 |
·结果 | 第42-52页 |
·不同比密Ficoll-泛影葡胺分离脐血细胞效果 | 第42-43页 |
·不同比密Ficoll-泛影葡胺分离脐血造血干/祖细胞 | 第43-46页 |
·造血祖细胞培养 | 第46-48页 |
·1.064g/ml和1.077g/ml Ficoll-泛影葡胺分离脐血细胞的造血活性的比较 | 第48-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
第三章 脐血CD34+细胞扩增及nucleostemin基因表达研究 | 第56-80页 |
·实验仪器和材料 | 第57-58页 |
·实验试剂 | 第57页 |
·实验耗材 | 第57-58页 |
·实验仪器 | 第58页 |
·方法 | 第58-62页 |
·脐血采集 | 第58页 |
·胎儿骨髓间质干细胞的纯化 | 第58-59页 |
·CD34+细胞的分离纯化 | 第59页 |
·CD34+细胞的体外培养 | 第59-60页 |
·流式细胞分析 | 第60页 |
·总RNA提取 | 第60页 |
·逆转录合成cDNA | 第60页 |
·引物设计 | 第60-61页 |
·Nucleostemin长片段PCR扩增 | 第61页 |
·T-A克隆 | 第61页 |
·定量PCR标准曲线绘制 | 第61页 |
·定量PCR反应 | 第61-62页 |
·统计学处理 | 第62页 |
·结果 | 第62-71页 |
·胎儿骨髓间质干细胞分离纯化 | 第62-63页 |
·CD34+细胞分离纯化 | 第63页 |
·CD34+细胞的扩增 | 第63-69页 |
·Nucleostemin基因表达 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
第四章 脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞体外B细胞分化发育 | 第80-128页 |
·实验仪器和材料 | 第81-83页 |
·实验试剂 | 第81-83页 |
·实验耗材 | 第83页 |
·实验仪器 | 第83页 |
·试剂配制 | 第83页 |
·方法 | 第83-89页 |
·脐血采集 | 第83页 |
·新鲜脐血单个核细胞分离 | 第83-84页 |
·新鲜脐血单个核细胞冷冻保存 | 第84页 |
·脐血单个核细胞冷冻复苏 | 第84页 |
·台盼蓝拒染实验 | 第84页 |
·免疫磁珠分离脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞 | 第84-85页 |
·免疫磁珠分离脐血CD19+细胞 | 第85页 |
·流式细胞仪分选脐血CD34+CD19-CD38-细胞 | 第85页 |
·S-17基质细胞传代培养 | 第85页 |
·S-17基质细胞支持体系建立 | 第85页 |
·脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞的体外B细胞分化 | 第85-86页 |
·流式细胞分析细胞表面标记 | 第86-87页 |
·基因组DNA提取 | 第87页 |
·总RNA提取和逆转录 | 第87页 |
·引物设计 | 第87-88页 |
·PCR、RT-PCR检测目的基因 | 第88-89页 |
·统计学处理 | 第89页 |
·结果 | 第89-114页 |
·脐血单个核细胞免疫标记分析 | 第89-91页 |
·新鲜脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞分离 | 第91-93页 |
·冷冻脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞分离 | 第93-94页 |
·甲状腺素3(T3)促进脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞B细胞分化 | 第94-95页 |
·细胞因子对脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞B细胞分化作用 | 第95-101页 |
·B细胞分化表面标记 | 第101-107页 |
·小鼠S-17基质细胞传代生物学变化 | 第107-109页 |
·甲状腺素3受体(T3R)基因的表达 | 第109-111页 |
·体外B细胞分化发育免疫球蛋白重链基因重排 | 第111-113页 |
·免疫球蛋白重链Iμ和Cμ转录 | 第113页 |
·λ样免疫球蛋白基因表达 | 第113-114页 |
·讨论 | 第114-119页 |
参考文献 | 第119-128页 |
第五章 结论与展望 | 第128-132页 |
致谢 | 第132-134页 |
攻读学位期间发表的学术论文、参加课题、获奖 | 第134-137页 |