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脐血造血干/祖细胞分离、纯化、生物学特性及B细胞分化发育研究

摘要第1-10页
Abstract第10-18页
第一章 绪论第18-38页
   ·胚胎干细胞第18-19页
   ·成体干细胞第19页
   ·造血干细胞第19-21页
     ·自我复制或自我更新第20页
     ·多向分化潜能第20-21页
     ·表面标志第21页
   ·脐血造血干细胞第21-22页
     ·脐血造血干细胞的特点第21-22页
     ·脐血造血干细胞的保存第22页
   ·造血微环境第22-23页
   ·造血干细胞B细胞分化第23-28页
     ·造血干细胞分化为祖B细胞第24-25页
     ·从祖B细胞到前B细胞第25-27页
     ·从前B细胞到未成熟B细胞第27页
     ·从未成熟B细胞到成熟B细胞第27-28页
   ·立题依据及主要研究内容第28-30页
 参考文献第30-38页
第二章 脐血造血干/祖细胞密度分离及生物学活性实验研究第38-56页
   ·实验仪器和材料第38-40页
     ·实验动物第38页
     ·实验试剂第38-39页
     ·实验耗材第39页
     ·实验仪器第39页
     ·试剂配制第39-40页
   ·方法第40-42页
     ·脐血采集第40-41页
     ·不同比密Ficoll-泛影葡胺分离液分离脐血单个核细胞制备第41页
     ·脐血细胞成分测定第41页
     ·流式细胞仪测定第41页
     ·造血祖细胞集落培养第41页
     ·脐血MNC体外扩增第41-42页
     ·BALB/c小鼠照射第42页
     ·供体细胞制备及输注第42页
     ·受体小鼠脾CFU-S检测第42页
     ·实验数据的统计学处理第42页
   ·结果第42-52页
     ·不同比密Ficoll-泛影葡胺分离脐血细胞效果第42-43页
     ·不同比密Ficoll-泛影葡胺分离脐血造血干/祖细胞第43-46页
     ·造血祖细胞培养第46-48页
     ·1.064g/ml和1.077g/ml Ficoll-泛影葡胺分离脐血细胞的造血活性的比较第48-52页
   ·讨论第52-54页
 参考文献第54-56页
第三章 脐血CD34+细胞扩增及nucleostemin基因表达研究第56-80页
   ·实验仪器和材料第57-58页
     ·实验试剂第57页
     ·实验耗材第57-58页
     ·实验仪器第58页
   ·方法第58-62页
     ·脐血采集第58页
     ·胎儿骨髓间质干细胞的纯化第58-59页
     ·CD34+细胞的分离纯化第59页
     ·CD34+细胞的体外培养第59-60页
     ·流式细胞分析第60页
     ·总RNA提取第60页
     ·逆转录合成cDNA第60页
     ·引物设计第60-61页
     ·Nucleostemin长片段PCR扩增第61页
     ·T-A克隆第61页
     ·定量PCR标准曲线绘制第61页
     ·定量PCR反应第61-62页
     ·统计学处理第62页
   ·结果第62-71页
     ·胎儿骨髓间质干细胞分离纯化第62-63页
     ·CD34+细胞分离纯化第63页
     ·CD34+细胞的扩增第63-69页
     ·Nucleostemin基因表达第69-71页
   ·讨论第71-74页
 参考文献第74-80页
第四章 脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞体外B细胞分化发育第80-128页
   ·实验仪器和材料第81-83页
     ·实验试剂第81-83页
     ·实验耗材第83页
     ·实验仪器第83页
     ·试剂配制第83页
   ·方法第83-89页
     ·脐血采集第83页
     ·新鲜脐血单个核细胞分离第83-84页
     ·新鲜脐血单个核细胞冷冻保存第84页
     ·脐血单个核细胞冷冻复苏第84页
     ·台盼蓝拒染实验第84页
     ·免疫磁珠分离脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞第84-85页
     ·免疫磁珠分离脐血CD19+细胞第85页
     ·流式细胞仪分选脐血CD34+CD19-CD38-细胞第85页
     ·S-17基质细胞传代培养第85页
     ·S-17基质细胞支持体系建立第85页
     ·脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞的体外B细胞分化第85-86页
     ·流式细胞分析细胞表面标记第86-87页
     ·基因组DNA提取第87页
     ·总RNA提取和逆转录第87页
     ·引物设计第87-88页
     ·PCR、RT-PCR检测目的基因第88-89页
     ·统计学处理第89页
   ·结果第89-114页
     ·脐血单个核细胞免疫标记分析第89-91页
     ·新鲜脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞分离第91-93页
     ·冷冻脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞分离第93-94页
     ·甲状腺素3(T3)促进脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞B细胞分化第94-95页
     ·细胞因子对脐血CD34+CD19-造血干/祖细胞B细胞分化作用第95-101页
     ·B细胞分化表面标记第101-107页
     ·小鼠S-17基质细胞传代生物学变化第107-109页
     ·甲状腺素3受体(T3R)基因的表达第109-111页
     ·体外B细胞分化发育免疫球蛋白重链基因重排第111-113页
     ·免疫球蛋白重链Iμ和Cμ转录第113页
     ·λ样免疫球蛋白基因表达第113-114页
   ·讨论第114-119页
 参考文献第119-128页
第五章 结论与展望第128-132页
致谢第132-134页
攻读学位期间发表的学术论文、参加课题、获奖第134-137页

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