摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
前言 | 第9-19页 |
1 牛瑟氏泰勒虫病原学研究 | 第9-10页 |
2 牛瑟氏泰勒虫病流行病学及危害 | 第10-11页 |
3 牛瑟氏泰勒虫病的防治研究 | 第11-12页 |
·蜱的防治 | 第11-12页 |
·虫体的防治 | 第12页 |
4 牛瑟氏泰勒虫病诊断方法研究 | 第12-15页 |
·组织学诊断方法 | 第12-13页 |
·免疫学诊断方法 | 第13-14页 |
·分子生物学诊断方法 | 第14-15页 |
5 牛瑟氏泰勒虫表面蛋白及疫苗研究 | 第15-17页 |
6 本课题的研究目的和意义 | 第17-19页 |
试验研究 | 第19-41页 |
1 材料 | 第19-22页 |
·血液来源 | 第19页 |
·克隆用菌种和载体 | 第19页 |
·试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·主要试剂的配制 | 第20-21页 |
·主要培养基的配制 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-28页 |
·引物设计与合成 | 第22页 |
·牛瑟氏泰勒虫基因组DNA的提取 | 第22页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第22-23页 |
·p23基因的克隆与鉴定 | 第23-24页 |
·原核表达载体的构建 | 第24-26页 |
·pGEX-4T-p23在大肠杆菌中的表达 | 第26页 |
·重组蛋白pGEX-4T-p23表达条件的优化 | 第26-27页 |
·融合蛋白的大量表达及可溶性分析 | 第27页 |
·免疫印迹(Western blotting)分析 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-37页 |
·目的基因的PCR结果 | 第28页 |
·pMD18-T-p23的鉴定 | 第28-31页 |
·pGEX-4T-p23的鉴定 | 第31-32页 |
·pGEX-4T-p23原核表达与鉴定 | 第32-33页 |
·重组蛋白表达条件的优化 | 第33-35页 |
·融合蛋白的大量表达和可溶性分析 | 第35-36页 |
·Western-blotting鉴定 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
作者简介 | 第47页 |