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拟黑多刺蚁CREB基因的克隆与原核表达

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 绪论第10-23页
   ·拟黑多刺蚁概述第10-12页
     ·拟黑多刺蚁的品级与分工第10页
     ·拟黑多刺蚁的生境与发育第10-11页
     ·拟黑多刺蚁的研究意义及现状第11-12页
   ·CREB概述第12-21页
     ·CREB的发现第12页
     ·CREB的分子结构第12-14页
     ·CREB家族第14页
     ·CREB参与转录调控的作用机制及其功能的特异性第14-18页
     ·CREB的生理功能第18-20页
     ·CREB的研究现状第20-21页
   ·本研究的目的与意义第21页
   ·研究的内容第21-22页
     ·拟黑多刺蚁CREB基因全长cDNA克隆与序列分析第21页
     ·CREB基因在大肠杆菌中的表达第21-22页
   ·研究的技术路线第22-23页
第2章 拟黑多刺蚁CREB基因全长cDNA的克隆与序列分析第23-53页
   ·材料第23-25页
     ·实验材料第23页
     ·菌株与质粒第23-24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器第24-25页
     ·常用的生物信息分析的相关软件及网站第25页
   ·方法第25-37页
     ·引物的设计与合成第25页
     ·拟黑多刺蚁总RNA的提取及检测第25-27页
     ·目的基因保守区域的获得第27-32页
     ·CREB基因3'端的扩增(3'RACE)第32-33页
     ·CREB基因5'端的扩增(5'RACE)第33-37页
   ·结果与分析第37-50页
     ·RNA抽提第37页
     ·拟黑多刺蚁CREB基因全长cDNA的克隆第37-41页
     ·拟黑多刺蚁CREB的生物信息学分析第41-50页
   ·讨论第50-53页
     ·拟黑多刺蚁CREB基因的克隆第50-52页
     ·拟黑多刺蚁CREB的生物信息学分析第52-53页
第3章 拟黑多刺蚁CREB基因的原核表达第53-68页
   ·试验材料第53-55页
     ·菌株与载体第53页
     ·主要工具酶和试剂第53-54页
     ·主要试剂配制第54页
     ·主要仪器第54-55页
   ·方法第55-59页
     ·原核表达载体PGEX-5X-1/CREB的构建第55-56页
     ·目的基因ORF的制备第56-57页
     ·目的基因与PGEX-5X-1载体大片段的连接第57-58页
     ·重组质粒PGEX-5X-1/CREB的双酶切鉴定第58页
     ·重组质粒插入片段的全序列测定第58页
     ·重组质粒转化BL21感受态细胞第58页
     ·诱导表达第58-59页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第59-60页
   ·结果与分析第60-64页
     ·表达质粒PGEX-5X-1的提取与双酶切鉴定第60-61页
     ·CREB基因ORF的扩增与双酶切鉴定第61页
     ·重组质粒的PCR鉴定和双酶切鉴定第61-62页
     ·拟黑多刺蚁CREB基因在大肠杆菌中的表达第62-63页
     ·目的蛋白的可溶性分析第63-64页
   ·讨论第64-68页
     ·表达系统及表达载体的选择第64-66页
     ·影响融合蛋白表达的因素第66-67页
     ·拟黑多刺蚁CREB的原核表达第67-68页
第4章 总结第68-69页
参考文献第69-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间的研究成果第81页

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