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检测NDV诱导特异性IFN-γ、IL-4的ELISPOT试验方法建立及应用

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
引言第10-25页
 1 ELISPOT 技术的发展历史第10页
 2 ELISPOT 的基本原理第10页
 3 ELISPOT 与其他免疫检测技术的比较第10-13页
 4 ELISPOT 技术标准化与验证第13-15页
 5 ELISPOT 在动物免疫研究中的应用第15-16页
 6 NDV 的生物学特性第16-18页
 7 NDV 致病性的分子基础第18-20页
 8 新城疫免疫机制第20-23页
 9 存在的主要问题第23-24页
 10 本研究的目的和意义第24-25页
试验一 检测NDV 诱导特异性IFN-γ的ELISPOT 试验方法建立第25-36页
 1 材料和方法第25-28页
   ·材料第25-26页
   ·方法第26-28页
     ·NDV 浓缩抗原的制备第26页
     ·NDV 浓缩抗原蛋白含量测定第26-27页
     ·小鼠的免疫第27页
     ·ELISPOT 基本操作步第27-28页
     ·细胞培养时间的选择第28页
     ·细胞浓度的选择第28页
     ·抗原刺激量的选择第28页
 2 结果第28-33页
   ·ELISPOT 试验结果比照第28-29页
   ·标准曲线的建立和蛋白含量的确定第29-30页
   ·培养时间的确定第30-31页
   ·细胞浓度的确定第31-32页
   ·抗原刺激量的确定第32-33页
 3 讨论第33-36页
   ·细胞状态第34页
   ·内毒素第34-35页
   ·刺激物第35页
   ·ELISPOT 记数第35-36页
试验二 NDV 诱导特异性IFN-γ、Il-4血清抗体的检测第36-44页
 1 试剂和方法第36-38页
   ·试剂第36-38页
     ·ELISA 主要试剂第36-37页
     ·ELISPOT 主要试剂第37页
     ·主要试剂的准备和配制第37-38页
 2 方法第38-40页
   ·免疫方法第38页
   ·ELISA 检测血清抗体第38-39页
   ·间接ELISA 法检测NDV 抗体最佳工作浓度的确定第39页
   ·间接ELISA 法检测抗NDV 抗体第39页
   ·ELISPOT 基本操作步骤第39-40页
 3 结果第40-41页
   ·间接ELISA 法检测NDV 抗体最佳工作浓度的确定结果第40页
   ·NDV 在小鼠体内诱导抗体的检测第40页
   ·NDV 在小鼠体内诱导IFN-γ、Il-4 的检测第40-41页
 4 讨论第41-44页
结论第44-45页
参考文献第45-54页
附图第54-59页
致谢第59-60页
就读硕士期间发表的主要论文第60页
个人简介第60页

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