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J亚群禽白血病病毒gp37基因siRNA表达载体的构建及体外干扰效应的初步研究

英文缩略表第1-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
第一部分 文献综述第12-24页
 第一章 J 亚群禽白血病及其研状第12-24页
  1 J亚群禽白血病第12-13页
  2 ALV-J 的分子病毒学特性第13-15页
  3 ALV-J 的致病性及其免疫抑制作用第15-18页
   ·ALV-J 的致病性第15-16页
   ·ALV-J 的致瘤机制第16-17页
   ·ALV-J的免疫抑制作用第17-18页
  4. ALV-J流行病学第18-20页
   ·ALV-J 的宿主范围第18-19页
   ·ALV-J 的传播方式第19-20页
  5. J亚群禽白血病的病理变化第20-21页
   ·临床症状第20页
   ·组织学变化第20-21页
  6 诊断第21-23页
   ·ALV-J 的分离与鉴定第21-22页
   ·ALV-J 的PCR 检测第22-23页
   ·ALV-J 的ELISA 检测第23页
  7. ALV-J 的防制第23-24页
第二章 RNA 干扰的研究进展第24-35页
 1 RNAi 的发现及发展第24-25页
 2. RNAi 的作用机制第25-27页
 3. RNAi 技术路线及应用第27-31页
   ·siRNA 设计第28-29页
   ·siRNA 的制备第29-31页
   ·siRNA 表达载体体外输送第31页
 4 RNAi 在动物病毒性疾病中的研究第31-34页
   ·RNA 干扰流感病毒的研究第32页
   ·RNA 干扰马立克氏病毒的研究第32-33页
   ·RNA干扰口蹄疫病毒的研究第33-34页
 5 RNAi 技术的展望与未来第34-35页
第二部分 研究内容第35-67页
 第一章 siRNA 表达载体的构建第35-46页
  摘要第35-36页
  1 材料第36-38页
   ·质粒和菌株第36-37页
   ·工具酶和主要试剂第37页
   ·引物合成第37-38页
   ·主要仪器第38页
  2. 方法第38-41页
   ·RNA 靶位点的选择第38页
   ·siRNA 设计第38页
   ·插入片段的准备第38-39页
   ·载体片段的准备第39页
   ·连接和转化第39-40页
   ·阳性克隆的筛选和鉴定第40-41页
  3. 结果第41-43页
   ·siRNA 的设计第41-42页
   ·siRNA 表达载体构建第42页
   ·重组质粒的序列测定第42-43页
  4 讨论第43-45页
  5 小结第45-46页
 第二章 pEGFP-gp37 融合表达载体的构建第46-60页
  摘要第46-47页
  1. 材料第47-49页
   ·质粒和菌株第47页
   ·工具酶和试剂第47页
   ·主要仪器第47页
   ·病毒和细胞第47-49页
  2 方法第49-55页
   ·pEGFP-gp37 重组质粒载体的构建及表达第49-54页
   ·重组质粒载体的鉴定第54-55页
  3 结果第55-58页
   ·间接免疫荧光检测第55-56页
   ·gp37 基因的扩增第56页
   ·pMD-gp37 质粒酶切鉴定结果第56-57页
   ·序列的测定及同源性比较第57页
   ·重组质粒载体pEGFP-gp37 的酶切鉴定第57-58页
   ·重组质粒载体pEGFP-gp37 的测序鉴定第58页
  4 讨论第58-59页
  5 小结第59-60页
 第三章 siRNA 体外干扰gp37 基因的初步研究第60-67页
  摘要第60页
  1 材料第60-61页
   ·试剂第60-61页
   ·主要仪器第61页
   ·细胞第61页
  2 方法第61-63页
   ·重组质粒pEGFP- gp37 在细胞上的表达第61-63页
  3 结果第63-64页
   ·pEGFP- gp37 融合表达载体转染 CEF 细胞第63-64页
   ·pEGFP- gp37 和不同的siRNA 表达载体共转染CEF 细胞第64页
  4 讨论第64-66页
  5. 小结第66-67页
全文总结第67-68页
参考文献第68-79页
附录第79-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间发表的论文第81页

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