英文缩略表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-24页 |
第一章 J 亚群禽白血病及其研状 | 第12-24页 |
1 J亚群禽白血病 | 第12-13页 |
2 ALV-J 的分子病毒学特性 | 第13-15页 |
3 ALV-J 的致病性及其免疫抑制作用 | 第15-18页 |
·ALV-J 的致病性 | 第15-16页 |
·ALV-J 的致瘤机制 | 第16-17页 |
·ALV-J的免疫抑制作用 | 第17-18页 |
4. ALV-J流行病学 | 第18-20页 |
·ALV-J 的宿主范围 | 第18-19页 |
·ALV-J 的传播方式 | 第19-20页 |
5. J亚群禽白血病的病理变化 | 第20-21页 |
·临床症状 | 第20页 |
·组织学变化 | 第20-21页 |
6 诊断 | 第21-23页 |
·ALV-J 的分离与鉴定 | 第21-22页 |
·ALV-J 的PCR 检测 | 第22-23页 |
·ALV-J 的ELISA 检测 | 第23页 |
7. ALV-J 的防制 | 第23-24页 |
第二章 RNA 干扰的研究进展 | 第24-35页 |
1 RNAi 的发现及发展 | 第24-25页 |
2. RNAi 的作用机制 | 第25-27页 |
3. RNAi 技术路线及应用 | 第27-31页 |
·siRNA 设计 | 第28-29页 |
·siRNA 的制备 | 第29-31页 |
·siRNA 表达载体体外输送 | 第31页 |
4 RNAi 在动物病毒性疾病中的研究 | 第31-34页 |
·RNA 干扰流感病毒的研究 | 第32页 |
·RNA 干扰马立克氏病毒的研究 | 第32-33页 |
·RNA干扰口蹄疫病毒的研究 | 第33-34页 |
5 RNAi 技术的展望与未来 | 第34-35页 |
第二部分 研究内容 | 第35-67页 |
第一章 siRNA 表达载体的构建 | 第35-46页 |
摘要 | 第35-36页 |
1 材料 | 第36-38页 |
·质粒和菌株 | 第36-37页 |
·工具酶和主要试剂 | 第37页 |
·引物合成 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
2. 方法 | 第38-41页 |
·RNA 靶位点的选择 | 第38页 |
·siRNA 设计 | 第38页 |
·插入片段的准备 | 第38-39页 |
·载体片段的准备 | 第39页 |
·连接和转化 | 第39-40页 |
·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第40-41页 |
3. 结果 | 第41-43页 |
·siRNA 的设计 | 第41-42页 |
·siRNA 表达载体构建 | 第42页 |
·重组质粒的序列测定 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
5 小结 | 第45-46页 |
第二章 pEGFP-gp37 融合表达载体的构建 | 第46-60页 |
摘要 | 第46-47页 |
1. 材料 | 第47-49页 |
·质粒和菌株 | 第47页 |
·工具酶和试剂 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
·病毒和细胞 | 第47-49页 |
2 方法 | 第49-55页 |
·pEGFP-gp37 重组质粒载体的构建及表达 | 第49-54页 |
·重组质粒载体的鉴定 | 第54-55页 |
3 结果 | 第55-58页 |
·间接免疫荧光检测 | 第55-56页 |
·gp37 基因的扩增 | 第56页 |
·pMD-gp37 质粒酶切鉴定结果 | 第56-57页 |
·序列的测定及同源性比较 | 第57页 |
·重组质粒载体pEGFP-gp37 的酶切鉴定 | 第57-58页 |
·重组质粒载体pEGFP-gp37 的测序鉴定 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-59页 |
5 小结 | 第59-60页 |
第三章 siRNA 体外干扰gp37 基因的初步研究 | 第60-67页 |
摘要 | 第60页 |
1 材料 | 第60-61页 |
·试剂 | 第60-61页 |
·主要仪器 | 第61页 |
·细胞 | 第61页 |
2 方法 | 第61-63页 |
·重组质粒pEGFP- gp37 在细胞上的表达 | 第61-63页 |
3 结果 | 第63-64页 |
·pEGFP- gp37 融合表达载体转染 CEF 细胞 | 第63-64页 |
·pEGFP- gp37 和不同的siRNA 表达载体共转染CEF 细胞 | 第64页 |
4 讨论 | 第64-66页 |
5. 小结 | 第66-67页 |
全文总结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-79页 |
附录 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第81页 |