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小麦叶绿体信号识别颗粒54和G蛋白的全长cDNA克隆及生物信息学分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-33页
   ·小麦条锈病第11-12页
     ·小麦条锈病的历史、分布及危害第11页
     ·小麦条锈病分子生物学研究第11-12页
   ·植物抗病的生物化学及分子生物学研究第12-14页
     ·小麦抗条锈病生化机理研究现状第12-13页
     ·植物抗病基因的克隆与分离方法第13-14页
   ·小麦与条锈菌互作的研究趋势第14页
   ·TAFFC 基因研究进展第14-16页
     ·cpSRP 介导的蛋白识别转运途径第15页
     ·拟南芥突变体中cpSRP 缺失的功能研究第15-16页
   ·TATYPA 相关基因研究进展第16-19页
     ·植物G 蛋白与植物防卫反应第16-19页
     ·G 蛋白TypA/BipA 的研究进展第19页
   ·cDNA 末端快速扩增技术(RACE)第19-20页
   ·生物信息学第20-22页
     ·生物信息学的产生和发展第20-21页
     ·生物信息学在基因克隆及序列分析中的应用第21-22页
   ·实时荧光定量PCR 技术第22-30页
     ·PCR 技术从定性到定量的飞跃第22-23页
     ·实时荧光定量PCR 技术原理第23页
     ·荧光化学第23-27页
     ·定量方法第27-28页
     ·荧光定量PCR 技术在植物上的应用第28-30页
   ·实验设计第30-33页
     ·立题依据、研究目的及意义第30页
     ·技术路线第30-33页
第二章 小麦cpSRP54 蛋白基因TAFFC 的全长cDNA 克隆及生物信息学分析第33-53页
   ·材料﹑试剂及仪器第33-34页
     ·材料第33页
     ·试剂第33-34页
     ·仪器第34页
   ·实验方法第34-40页
     ·RACE 引物设计第34页
     ·总RNA 提取第34页
     ·总RNA 纯化第34-35页
     ·总RNA 浓度、纯度及完整性检测第35页
     ·一链cDNA 合成第35-36页
     ·PCR 扩增第36-37页
     ·PCR 扩增产物凝胶回收第37页
     ·PCR 产物与载体连接第37页
     ·感受态细胞的制备及连接产物的转化第37页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第37-38页
     ·测序第38页
     ·序列分析整理第38-39页
     ·序列拼接及全长引物设计第39页
     ·RT-PCR 克隆验证第39页
     ·生物信息学分析第39页
     ·实时荧光定量RT-PCR第39-40页
   ·结果与分析第40-52页
     ·3′-RACE 和5′-RACE第40-41页
     ·TAFFC 全长cDNA 序列第41-42页
     ·ORF 查找及推测的氨基酸序列第42-43页
     ·相似性和同源性搜索第43-46页
     ·氨基酸一级结构的预测第46-47页
     ·氨基酸二级结构的预测第47页
     ·多肽跨膜区域第47-48页
     ·蛋白功能位点分析预测第48-50页
     ·进化树分析第50-51页
     ·实时荧光定量PCR第51-52页
   ·讨论与结论第52-53页
     ·讨论第52页
     ·结论第52-53页
第三章 小麦G 蛋白基因TATYPA 的全长cDNA 克隆及生物信息学分析第53-64页
   ·材料﹑试剂及仪器第53页
     ·材料第53页
     ·试剂第53页
     ·仪器第53页
   ·实验方法第53-54页
     ·克隆基因第53页
     ·生物信息学分析第53-54页
     ·实时荧光定量PCR第54页
   ·结果与分析第54-63页
     ·3′-RACE 和5′-RACE 序列拼接第54-55页
     ·ORF 查找及推测的氨基酸序列第55页
     ·相似性和同源性搜索第55-58页
     ·氨基酸一级结构的预测第58-59页
     ·氨基酸二级结构的预测第59页
     ·多肽跨膜区域第59-60页
     ·蛋白功能位点分析预测第60-61页
     ·进化树分析第61-62页
     ·实时荧光定量PCR第62-63页
   ·讨论与结论第63-64页
     ·讨论第63页
     ·结论第63-64页
小结第64-65页
参考文献第65-74页
缩略词第74-75页
致谢第75-76页
作者简介第76页

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