| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-9页 |
| 本文缩略词 | 第9-14页 |
| 1 引言 | 第14-35页 |
| ·胡枝子开发利用价值与遗传改良意义 | 第14-15页 |
| ·植物木质素的生物合成与遗传调控 | 第15-24页 |
| ·木质素的功能与组成 | 第15-16页 |
| ·木质素生物合成途径 | 第16-19页 |
| ·降低木质素含量与改变木质素单体组成的遗传调控 | 第19-24页 |
| ·甜菜碱对植物抗逆性的影响及饲用价值 | 第24-27页 |
| ·甜菜碱在植物中的代谢途径 | 第25页 |
| ·甜菜碱的植物生理功能及对植物抗逆性的影响 | 第25-26页 |
| ·甜菜碱的饲用价值 | 第26-27页 |
| ·植物转基因中的安全性选择系统 | 第27-33页 |
| ·糖类选择标记系统 | 第27-29页 |
| ·化合物解毒酶基因标记系统 | 第29页 |
| ·谷氨酸-1-半醛转氨酶基因标记系统 | 第29-30页 |
| ·绿色荧光蛋白基因标记系统 | 第30页 |
| ·消除选择标记基因 | 第30-33页 |
| ·研究的主要内容与技术路线 | 第33-35页 |
| 2 植物表达载体反义4CL-BADH的构建及pBI121-xy1A-BADH的构建 | 第35-61页 |
| ·实验材料与方法 | 第36-50页 |
| ·基因、质粒和菌株 | 第36页 |
| ·细菌培养基配方 | 第36页 |
| ·酶和试剂 | 第36页 |
| ·实验操作主要仪器 | 第36-37页 |
| ·植物表达载体构建策略 | 第37-42页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第42页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·目的基因xy1A、BADH的克隆和检测及35S-BADH-nos片段的克隆、检测 | 第43-46页 |
| ·目的片段的纯化、回收 | 第46页 |
| ·目的基因xy1A、35S-BADH-nos片段的末端添A及与pUCm-T、载体的连接 | 第46-47页 |
| ·目的片段与质粒载体的酶切 | 第47-48页 |
| ·目的片段与质粒子载体的连接 | 第48页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第48-49页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第49页 |
| ·植物表达载体反义4CL-BADH、pBI121-xy1A-BADH转化农杆菌 | 第49页 |
| ·PCR鉴定目的基因及测序 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-59页 |
| ·木糖异构酶基因xy1A的克隆及pBI121-xy1A载体的构建 | 第50-52页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶基因BADH的克隆及pBI121-BADH载体的构建 | 第52-54页 |
| ·35S-BADH-nos片段的克隆、pUCM-35s-BADH-nos载体的构建与测序 | 第54-56页 |
| ·以木糖为选择剂的植物表达载体pBI121-xy1A-BADH的构建 | 第56页 |
| ·无选择标记基因的植物表达载体反义4C1-BADH的构建 | 第56-58页 |
| ·植物表达载体质粒pBI121-xy1A-BADH和反义4CL-BADH转化农杆菌 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·关于安全性多基因表达载体构建 | 第59页 |
| ·用无标记基因表达载体进行植物遗传转化 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 3 二色胡枝子高效再生体系的建立与优化 | 第61-71页 |
| ·材料与方法 | 第61-64页 |
| ·材料与试剂 | 第61页 |
| ·处理方法 | 第61-62页 |
| ·培养基配方设计 | 第62-64页 |
| ·数据分析 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-69页 |
| ·大量元素含量对二色胡枝子子叶节分化的影响 | 第64-65页 |
| ·激素对二色胡枝子子叶节分化的影响 | 第65-66页 |
| ·6-BA、NAA、IBA对二色胡枝子茎段增殖的影响 | 第66-67页 |
| ·IBA、NAA、IAA对二色胡枝子不定芽生根的影响 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 4 农杆菌介导的二色胡枝子糖类遗传转化体系与无选择标记转化系统的建立 | 第71-90页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·材料与试剂 | 第71页 |
| ·菌种与质粒 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-77页 |
| ·二色胡枝子转化体系中抑菌剂浓度试验 | 第71-72页 |
| ·二色胡枝子遗传转化体系中选择剂试验 | 第72-73页 |
| ·影响二色胡枝子转化效果的因素筛选 | 第73-75页 |
| ·遗传转化过程中培养基配方 | 第75-76页 |
| ·农杆菌活化与培养 | 第76页 |
| ·农杆菌介导的二色胡枝子遗传转化程序 | 第76-77页 |
| ·主要仪器设备 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-87页 |
| ·二色胡枝子遗传转化中抑菌剂浓度优化 | 第77-79页 |
| ·二色胡枝子遗传转化中选择剂研究 | 第79-84页 |
| ·影响二色胡枝子转化效果的因素 | 第84-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·植物遗传转化中的安全性选择标记基因及相应选择剂 | 第87-88页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 5 转基因植株的检测 | 第90-113页 |
| ·材料与方法 | 第90-97页 |
| ·材料 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90-91页 |
| ·主要仪器设备 | 第91页 |
| ·试验方法 | 第91-97页 |
| ·结果分析 | 第97-108页 |
| ·转基因植株茎段增殖的选择剂抗性鉴定 | 第97-98页 |
| ·转基因植株的PCR榆测 | 第98-100页 |
| ·转基因植株的PCR-Southern检测 | 第100-102页 |
| ·转基因植株的Southern检测 | 第102-103页 |
| ·转基因植株的耐盐性试验 | 第103-104页 |
| ·转反义4CL-BADH基因植株的组织化学染色 | 第104-108页 |
| ·NaCl迫对转反义4CL-BADH基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性的影响 | 第108页 |
| ·讨论 | 第108-111页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第108-109页 |
| ·关于转入反义4CL基因的功能检测 | 第109-110页 |
| ·植物异形细胞与抗逆性 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-113页 |
| 6 讨论 | 第113-116页 |
| ·关于胡枝子转基因的安全性问题 | 第113-114页 |
| ·BADH基因的导入对植物的影响 | 第114页 |
| ·反义4CL基因的导入对植物的影响 | 第114-116页 |
| 7 结论与展望 | 第116-119页 |
| ·主要研究结论 | 第116-117页 |
| ·展望 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-132页 |
| 附图 | 第132-145页 |
| 个人简介 | 第145-146页 |
| 导师简介 | 第146-148页 |
| 致谢 | 第148页 |
