| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 绪论 | 第10-26页 |
| 1.纤维素及纤维素酶方面的研究 | 第10-19页 |
| ·纤维素资源及其分子结构 | 第10页 |
| ·分解纤维素的微生物 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶的组分及水解机制 | 第11-13页 |
| ·纤维素酶分子的功能域 | 第13-14页 |
| ·木霉纤维素酶的研究进展 | 第14-16页 |
| ·纤维素酶在各领域的应用 | 第16-19页 |
| 2.真菌鉴定方面的研究 | 第19-21页 |
| ·内转录间隔序列的结构与特征 | 第19-20页 |
| ·ITS序列在真菌分子系统学研究中的应用 | 第20-21页 |
| 3.毕赤酵母表达系统 | 第21-24页 |
| ·毕赤酵母表达系统与大肠杆菌表达系统的比较 | 第21-22页 |
| ·毕赤酵母表达宿主菌株及表达载体 | 第22-23页 |
| ·外源蛋白在毕赤酵母中的表达步骤 | 第23页 |
| ·影响外源蛋白表达的因素 | 第23-24页 |
| 4.本文的主要研究内容与意义 | 第24-26页 |
| 第一章 丝状真菌菌株SSL的鉴定 | 第26-36页 |
| 第一节 材料与方法 | 第26-30页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·各种试剂与溶液 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·产纤维素酶真菌菌株的形态鉴定 | 第27页 |
| ·产纤维素酶真菌菌株的分子鉴定 | 第27-30页 |
| ·分子系统进化树的构建 | 第30页 |
| 第二节 结果与分析 | 第30-34页 |
| ·菌株SSL的形态鉴定 | 第30-31页 |
| ·菌株SSL的分子鉴定 | 第31-34页 |
| 第三节 讨论 | 第34-35页 |
| 第四节 本章小结 | 第35-36页 |
| 第二章 长梗木霉内切葡聚糖酶基因的克隆及分析 | 第36-54页 |
| 第一节 材料与方法 | 第36-41页 |
| ·供试菌株与质粒 | 第36页 |
| ·各种试剂与溶液 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·内切葡聚糖酶基因的克隆 | 第37-39页 |
| ·目的基因片段的T/A克隆 | 第39页 |
| ·阳性转化子的验证 | 第39-41页 |
| ·DNA的测序与序列分析 | 第41页 |
| 第二节 结果与分析 | 第41-51页 |
| ·长梗木霉基因组DNA和总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·长梗木霉内切葡聚糖酶基因的克隆 | 第42页 |
| ·目的基因片段的T/A克隆 | 第42-45页 |
| ·内切葡聚糖酶基因的序列及分析 | 第45-51页 |
| 第三节 讨论 | 第51页 |
| 第四节 本章小结 | 第51-54页 |
| 第三章 长梗木霉内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的异源表达 | 第54-70页 |
| 第一节 材料与方法 | 第54-60页 |
| ·菌株和质粒 | 第54页 |
| ·试剂与溶液 | 第54页 |
| ·培养基 | 第54-55页 |
| ·引物设计 | 第55页 |
| ·egⅠ基因和egⅢ基因的成熟肽编码序列的克隆 | 第55页 |
| ·大量制备质粒pPIC9K | 第55-57页 |
| ·重组表达载体的构建与线性化 | 第57页 |
| ·重组表达载体转化毕赤酵母菌株GS115 | 第57-58页 |
| ·转化子的诱导表达 | 第58页 |
| ·重组表达EG的定性与定量检测 | 第58-59页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第59-60页 |
| 第二节 结果与分析 | 第60-67页 |
| ·egⅠ基因和egⅢ基因的成熟肽编码序列的克隆 | 第60页 |
| ·重组表达载体的构建和验证 | 第60-62页 |
| ·重组表达质粒的线性化 | 第62页 |
| ·重组表达载体的转化与转化子的筛选 | 第62-63页 |
| ·重组EG的诱导表达及分析 | 第63-65页 |
| ·重组子产酶条件的优化 | 第65-67页 |
| 第三节 讨论 | 第67-68页 |
| 第四节 本章小结 | 第68-70页 |
| 第四章 结论 | 第70-72页 |
| 附录1 各种试剂与溶液 | 第72-74页 |
| 附录2 各种仪器与设备 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 个人简历 | 第88页 |