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农杆菌介导单、双价抗虫基因Bt、Bt-pinⅡ基因对观赏羽衣甘蓝的遗传转化研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
第1章 文献综述第9-25页
 1 农杆菌介导甘蓝类蔬菜遗传转化研究进展第10-15页
   ·外植体高频再生体系的建立第10-13页
     ·基因型第11页
     ·外植体第11-12页
     ·培养基组成第12-13页
     ·玻璃化第13页
   ·农杆菌介导的遗传转化第13-15页
     ·菌株的影响第13-14页
     ·农杆菌浓度及侵染时间第14页
     ·共培养时间第14页
     ·抗生素的选择第14页
     ·农杆菌的活化第14-15页
 2 植物抗虫基因的研究进展第15-25页
   ·Bt 基因第15-18页
     ·苏云金芽孢杆菌概况第15-16页
     ·Bt 杀虫晶体蛋白的基因工程第16-18页
     ·Bt 基因在甘蓝类蔬菜中的应用第18页
   ·蛋白酶抑制剂基因(Proteinase inhabitor,PI)第18-20页
     ·马铃薯蛋白酶抑制剂(1)马铃薯蛋白酶抑制剂概况第20页
   ·双价及多价抗虫基因第20-21页
   ·抗虫转基因植物可能存在的问题及对策第21-25页
     ·昆虫的抗药性第22页
     ·转基因抗虫植物与生态风险第22-23页
     ·抗虫基因在植物体内的"沉默第23页
     ·转基因技术对农产品本身品质的影响第23-25页
第2章 引言第25-27页
第3章 材料与方法第27-41页
   ·材料第27-31页
     ·植物材料第27页
     ·质粒载体与菌株第27页
     ·主要仪器设备第27-28页
     ·主要分子生物学试剂和试剂盒第28页
     ·各种试剂及培养基的配制第28-31页
   ·方法第31-41页
     ·载体构建第31-35页
     ·观赏羽衣甘蓝再生体系的建立第35-36页
     ·羽衣甘蓝的遗传转化第36-37页
     ·转基因羽衣甘蓝植株的分子生物学检测第37-41页
第4章 研究结果与分析第41-71页
   ·载体构建第41-55页
     ·Bt(CrylAb)基因片段的克隆与序列分析第41-43页
     ·Bt-Pin Ⅱ融合基因的克隆第43-50页
     ·表达载体 pBAC171构建第50-52页
     ·表达载体 pBAC172构建第52-54页
     ·表达载体 pBAC173构建第54-55页
   ·观赏羽衣甘蓝高频再生体系的建立第55-62页
     ·培养基的影响第57-58页
     ·基因型的影响第58-59页
     ·外植体的影响第59-60页
     ·苗龄对不定芽诱导(皱白1)的影响第60-61页
     ·下胚轴接种方式对不定芽诱导(皱白1)的影响第61-62页
     ·AgNO_3对不定芽诱导率(皱白1)的影响第62页
     ·生根及移栽第62页
   ·观赏羽衣甘蓝的遗传转化第62-67页
     ·Basta 选择压和 Carb、Cef 脱菌浓度的确定第62-63页
     ·影响转化频率的因素分析第63-66页
     ·乙酰丁香酮第66页
     ·抗性植株的获得第66-67页
   ·转基因羽衣甘蓝植株的分子生物学检测第67-69页
     ·转基因植株的 PCR 检测第67-68页
     ·southern 杂交第68-69页
   ·转基因羽衣甘蓝植株的移栽第69-71页
5 讨论第71-75页
   ·单、双价抗虫载体的构建第71页
   ·再生体系的建立第71-72页
   ·影响羽衣甘蓝遗传转化的因素第72-73页
     ·预培养时间、侵染时间、共培养时间的影响第72-73页
     ·外植体的影响第73页
   ·诱虫作物第73-75页
6 结论第75-77页
   ·主要结论第75页
   ·后续研究工作的展望第75-77页
参考文献第77-85页
致谢第85-87页
附录第87页

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