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抑制K562细胞中IER3IP1基因表达对细胞增殖和红系分化影响的探讨

英汉缩略语名词对照第1-10页
摘要第10-13页
ABSTRACT第13-16页
正文:抑制K562 细胞中IER31P1 基因表达对细胞增殖和红系分化影响的探讨第16-51页
 前言第16-19页
 第一部分 针对 IER3IP1 基因 shRNA 表达载体的构建和筛选第19-35页
  1 实验材料与方法第19-30页
   ·实验材料第19-20页
   ·主要试剂与配制方法第20-21页
     ·主要试剂第20页
     ·配制方法第20-21页
   ·主要仪器设备第21-22页
   ·实验方法第22-30页
     ·重组shRNA 质粒作用靶位点的选择第22-24页
     ·pGenesil-1 质粒的线性化第24页
     ·酶切产物的胶回收第24-25页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第25页
     ·双链寡核苷酸片段和质粒pGenesil-1 的连接第25页
     ·连接产物转化DH5α感受态细胞第25-26页
     ·筛选克隆第26页
     ·小量提取质粒DNA第26页
     ·测序分析第26页
     ·细胞培养第26-27页
     ·转染细胞第27页
     ·稳定筛选第27页
     ·RNA 抽提第27-28页
     ·RT-PCR第28-29页
     ·基因表达抑制率的计算第29-30页
  2 实验结果第30-32页
   ·重组载体测序第30页
   ·细胞转染第30-31页
   ·基因抑制情况第31-32页
  3 讨论第32-35页
 第二部分 靶向干扰 IER3IP1 基因对 K562 细胞生物学行为的影响第35-41页
  1 实验材料与方法第35-37页
   ·实验材料第35页
   ·主要试剂和配置方法(同第一部分)第35页
   ·主要仪器设备(同第一部分)第35页
   ·实验方法第35-37页
     ·RNA 抽提(同第一部分)第35页
     ·RT-PCR(同第一部分)第35-36页
     ·MTT 检测细胞生长的增殖变化第36页
     ·流式细胞仪检测细胞周期第36页
     ·透射电镜观察第36页
     ·统计学处理第36-37页
  2 实验结果第37-39页
   ·MTT 试验第37页
   ·基因干扰过后对K562 细胞周期时相分布的影响第37-38页
   ·电镜细胞超微结构的观察第38-39页
   ·基因干扰过后 bcr/abl 基因表达情况第39页
  3 讨论第39-41页
 第三部分 靶向干扰 IER3IP1 基因对 K562 细胞红系分化的影响第41-51页
  1 实验材料与方法第41-43页
   ·实验材料第41页
   ·主要试剂与配制方法第41-42页
     ·主要试剂第41页
     ·配制方法第41-42页
   ·主要仪器设备(同第二部分2.3)第42页
   ·实验方法第42-43页
     ·伊马替尼诱导分化第42页
     ·氯高铁血红素诱导分化第42页
     ·联苯胺染色第42页
     ·提取RNA(步骤同第一部分)第42页
     ·半定量RT-PCR(步骤同第一部分)第42-43页
     ·流式细胞术检测细胞表面红系标志物GPA 蛋白第43页
     ·统计学分析第43页
  2 实验结果第43-48页
   ·靶向干扰 IER3IP1 基因对伊马替尼红系诱导分化的影响第43-46页
     ·联苯胺试验第43-44页
     ·红系分化相关基因的表达第44-45页
     ·流式检测GPA 的表达第45-46页
   ·靶向干扰 IER3IP1 基因对氯高铁血红素红系诱导分化的影响第46-48页
   ·统计学计算第48页
  3 讨论第48-51页
全文总结第51-52页
参考文献第52-56页
文献综述第56-62页
 参考文献第60-62页
致谢第62-63页
攻读硕士学位期间发表的论文第63页

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