英汉缩略语名词对照 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
正文:抑制K562 细胞中IER31P1 基因表达对细胞增殖和红系分化影响的探讨 | 第16-51页 |
前言 | 第16-19页 |
第一部分 针对 IER3IP1 基因 shRNA 表达载体的构建和筛选 | 第19-35页 |
1 实验材料与方法 | 第19-30页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·主要试剂与配制方法 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·配制方法 | 第20-21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-30页 |
·重组shRNA 质粒作用靶位点的选择 | 第22-24页 |
·pGenesil-1 质粒的线性化 | 第24页 |
·酶切产物的胶回收 | 第24-25页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第25页 |
·双链寡核苷酸片段和质粒pGenesil-1 的连接 | 第25页 |
·连接产物转化DH5α感受态细胞 | 第25-26页 |
·筛选克隆 | 第26页 |
·小量提取质粒DNA | 第26页 |
·测序分析 | 第26页 |
·细胞培养 | 第26-27页 |
·转染细胞 | 第27页 |
·稳定筛选 | 第27页 |
·RNA 抽提 | 第27-28页 |
·RT-PCR | 第28-29页 |
·基因表达抑制率的计算 | 第29-30页 |
2 实验结果 | 第30-32页 |
·重组载体测序 | 第30页 |
·细胞转染 | 第30-31页 |
·基因抑制情况 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-35页 |
第二部分 靶向干扰 IER3IP1 基因对 K562 细胞生物学行为的影响 | 第35-41页 |
1 实验材料与方法 | 第35-37页 |
·实验材料 | 第35页 |
·主要试剂和配置方法(同第一部分) | 第35页 |
·主要仪器设备(同第一部分) | 第35页 |
·实验方法 | 第35-37页 |
·RNA 抽提(同第一部分) | 第35页 |
·RT-PCR(同第一部分) | 第35-36页 |
·MTT 检测细胞生长的增殖变化 | 第36页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第36页 |
·透射电镜观察 | 第36页 |
·统计学处理 | 第36-37页 |
2 实验结果 | 第37-39页 |
·MTT 试验 | 第37页 |
·基因干扰过后对K562 细胞周期时相分布的影响 | 第37-38页 |
·电镜细胞超微结构的观察 | 第38-39页 |
·基因干扰过后 bcr/abl 基因表达情况 | 第39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
第三部分 靶向干扰 IER3IP1 基因对 K562 细胞红系分化的影响 | 第41-51页 |
1 实验材料与方法 | 第41-43页 |
·实验材料 | 第41页 |
·主要试剂与配制方法 | 第41-42页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·配制方法 | 第41-42页 |
·主要仪器设备(同第二部分2.3) | 第42页 |
·实验方法 | 第42-43页 |
·伊马替尼诱导分化 | 第42页 |
·氯高铁血红素诱导分化 | 第42页 |
·联苯胺染色 | 第42页 |
·提取RNA(步骤同第一部分) | 第42页 |
·半定量RT-PCR(步骤同第一部分) | 第42-43页 |
·流式细胞术检测细胞表面红系标志物GPA 蛋白 | 第43页 |
·统计学分析 | 第43页 |
2 实验结果 | 第43-48页 |
·靶向干扰 IER3IP1 基因对伊马替尼红系诱导分化的影响 | 第43-46页 |
·联苯胺试验 | 第43-44页 |
·红系分化相关基因的表达 | 第44-45页 |
·流式检测GPA 的表达 | 第45-46页 |
·靶向干扰 IER3IP1 基因对氯高铁血红素红系诱导分化的影响 | 第46-48页 |
·统计学计算 | 第48页 |
3 讨论 | 第48-51页 |
全文总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
文献综述 | 第56-62页 |
参考文献 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |