| 英汉缩略语名词对照 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 正文:抑制K562 细胞中IER31P1 基因表达对细胞增殖和红系分化影响的探讨 | 第16-51页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 第一部分 针对 IER3IP1 基因 shRNA 表达载体的构建和筛选 | 第19-35页 |
| 1 实验材料与方法 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·主要试剂与配制方法 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·配制方法 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·重组shRNA 质粒作用靶位点的选择 | 第22-24页 |
| ·pGenesil-1 质粒的线性化 | 第24页 |
| ·酶切产物的胶回收 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·双链寡核苷酸片段和质粒pGenesil-1 的连接 | 第25页 |
| ·连接产物转化DH5α感受态细胞 | 第25-26页 |
| ·筛选克隆 | 第26页 |
| ·小量提取质粒DNA | 第26页 |
| ·测序分析 | 第26页 |
| ·细胞培养 | 第26-27页 |
| ·转染细胞 | 第27页 |
| ·稳定筛选 | 第27页 |
| ·RNA 抽提 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR | 第28-29页 |
| ·基因表达抑制率的计算 | 第29-30页 |
| 2 实验结果 | 第30-32页 |
| ·重组载体测序 | 第30页 |
| ·细胞转染 | 第30-31页 |
| ·基因抑制情况 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-35页 |
| 第二部分 靶向干扰 IER3IP1 基因对 K562 细胞生物学行为的影响 | 第35-41页 |
| 1 实验材料与方法 | 第35-37页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·主要试剂和配置方法(同第一部分) | 第35页 |
| ·主要仪器设备(同第一部分) | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·RNA 抽提(同第一部分) | 第35页 |
| ·RT-PCR(同第一部分) | 第35-36页 |
| ·MTT 检测细胞生长的增殖变化 | 第36页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第36页 |
| ·透射电镜观察 | 第36页 |
| ·统计学处理 | 第36-37页 |
| 2 实验结果 | 第37-39页 |
| ·MTT 试验 | 第37页 |
| ·基因干扰过后对K562 细胞周期时相分布的影响 | 第37-38页 |
| ·电镜细胞超微结构的观察 | 第38-39页 |
| ·基因干扰过后 bcr/abl 基因表达情况 | 第39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第三部分 靶向干扰 IER3IP1 基因对 K562 细胞红系分化的影响 | 第41-51页 |
| 1 实验材料与方法 | 第41-43页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·主要试剂与配制方法 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·配制方法 | 第41-42页 |
| ·主要仪器设备(同第二部分2.3) | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·伊马替尼诱导分化 | 第42页 |
| ·氯高铁血红素诱导分化 | 第42页 |
| ·联苯胺染色 | 第42页 |
| ·提取RNA(步骤同第一部分) | 第42页 |
| ·半定量RT-PCR(步骤同第一部分) | 第42-43页 |
| ·流式细胞术检测细胞表面红系标志物GPA 蛋白 | 第43页 |
| ·统计学分析 | 第43页 |
| 2 实验结果 | 第43-48页 |
| ·靶向干扰 IER3IP1 基因对伊马替尼红系诱导分化的影响 | 第43-46页 |
| ·联苯胺试验 | 第43-44页 |
| ·红系分化相关基因的表达 | 第44-45页 |
| ·流式检测GPA 的表达 | 第45-46页 |
| ·靶向干扰 IER3IP1 基因对氯高铁血红素红系诱导分化的影响 | 第46-48页 |
| ·统计学计算 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 全文总结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 文献综述 | 第56-62页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |