| 提要 | 第1-10页 |
| 英文缩写词表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 DCs 来源与功能 | 第11页 |
| 2 DCs 免疫活性的调控 | 第11-14页 |
| 3 DCs 的体外培养 | 第14-16页 |
| 4 DCs 负载抗原的种类及方法 | 第16-17页 |
| 5 抗原的量、抗原递呈持续时间及负载的时机 | 第17-18页 |
| 6 基因修饰DCs 疫苗 | 第18-21页 |
| 7 DCs 疫苗的临床实验 | 第21-23页 |
| 8 小结 | 第23-24页 |
| 前言 | 第24-27页 |
| 第1章 IL-12 基因慢病毒载体构建及其表达 | 第27-52页 |
| ·主要材料与仪器 | 第27-28页 |
| ·细胞系、菌株、质粒 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-39页 |
| ·人IL-12 基因克隆 | 第28-32页 |
| ·pWPXLd-IL-12 载体的构建 | 第32-33页 |
| ·慢病毒载体包装 | 第33-35页 |
| ·包装病毒感染293FT 细胞 | 第35页 |
| ·重组IL-12 在细胞基因组DNA 的PCR 鉴定 | 第35-36页 |
| ·eGFP 在293FT 细胞的表达 | 第36-37页 |
| ·重组IL-12 在293FT 细胞的表达 | 第37-39页 |
| ·统计学处理 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-49页 |
| ·构建的IL-12 慢病毒载体质粒图谱 | 第39-42页 |
| ·人IL-12 基因克隆PCR 结果 | 第42页 |
| ·pMD18-IL-12-MS 质粒酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·pWPXLd-IL-12 质粒载体酶切鉴定结果 | 第43页 |
| ·IL-12 整合到慢病毒感染293FT 细胞基因组检测结果 | 第43-44页 |
| ·eGFP 在293FT 细胞表达检测结果 | 第44-47页 |
| ·RT-PCR 检测LV-12 感染293FT 细胞hIL-12 的表达结果 | 第47页 |
| ·ELISA 检测 IL-12 的结果 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·慢病毒载体的构建 | 第49-50页 |
| ·慢病毒颗粒产生以及滴度测定 | 第50-52页 |
| 第2章 IL-12 基因慢病毒载体感染DCS研究 | 第52-64页 |
| ·主要材料与仪器 | 第52页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·实验仪器 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-55页 |
| ·DCs 的培养与病毒颗粒感染 | 第52-54页 |
| ·DCs 培养上清IL-12 含量测定 | 第54页 |
| ·DCs 表面分子CD83 的流式检测 | 第54页 |
| ·DCs 刺激淋巴细胞增殖实验 | 第54-55页 |
| ·流式细胞术测定 GFP 在 DCs 内表达 | 第55页 |
| ·PCR 方法检测IL-12 基因的DCs 基因组的整合 | 第55页 |
| ·统计学处理 | 第55页 |
| ·实验结果 | 第55-60页 |
| ·DCs 诱导的结果 | 第55-56页 |
| ·流式细胞术检测GFP 基因在DCs 表达 | 第56-57页 |
| ·LV-12 感染DCs 后基因组内IL-12 基因检测结果 | 第57页 |
| ·ELISA 测定DCs 分泌IL-12 实验结果 | 第57-58页 |
| ·DCs 表面分子CD83 的流式检测结果 | 第58-59页 |
| ·DCs 刺激淋巴细胞增殖结果 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-64页 |
| 第3章 化疗药物作用的肺癌A549 细胞冲击IL-12 基因慢病毒载体转染DCS体外杀伤肺癌细胞作用的研究 | 第64-72页 |
| ·实验材料与仪器 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-66页 |
| ·化疗药物作用的肺癌A549 细胞制备 | 第64-65页 |
| ·化疗药物作用的肺癌A549 细胞全抗原负载DCs | 第65-66页 |
| ·DCs 表型的测定 | 第66页 |
| ·致敏DCs 诱导的淋巴细胞增殖反应 | 第66页 |
| ·致敏DCs 诱导的CTL 活性的检测 | 第66页 |
| ·实验结果 | 第66-70页 |
| ·化疗药物作用的A549 死亡细胞形态学变化 | 第66-67页 |
| ·化疗药物作用的A549 死亡细胞DNA 变化 | 第67-68页 |
| ·化疗药物作用的A549 细胞负载DCs 后CD83 检测结果 | 第68-69页 |
| ·致敏DCs 诱导的淋巴细胞增殖 | 第69页 |
| ·致敏DCs 诱导的CTL 活性 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-93页 |
| 攻读博士期间发表论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 中文摘要 | 第95-98页 |
| ABSTRACT | 第98-101页 |
