| 主要缩略语表 | 第10-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| ABSTRACT | 第14-17页 |
| 引言 | 第18-21页 |
| 实验一 小鼠NASH合并肝纤维化模型的建立 | 第21-36页 |
| 1. 材料 | 第21-23页 |
| 1.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第21-23页 |
| 1.2.1 生化检测试剂 | 第21页 |
| 1.2.2 组织匀浆及病理试剂 | 第21-22页 |
| 1.2.3 使用仪器 | 第22-23页 |
| 2. 方法 | 第23-28页 |
| 2.1 动物造模方法 | 第23页 |
| 2.2 分组 | 第23-24页 |
| 2.3 标本留取 | 第24页 |
| 2.4 观察指标检测方法 | 第24-28页 |
| 2.4.1 小鼠进食量、进水量、体重变化、肝湿重 | 第24-25页 |
| 2.4.2 肝组织TG的含量测定 | 第25页 |
| 2.4.3 肝组织HYP含量测定 | 第25-26页 |
| 2.4.4 肝组织HE染色 | 第26页 |
| 2.4.5 肝组织油红O染色 | 第26页 |
| 2.4.6 肝组织天狼猩红染色 | 第26-27页 |
| 2.4.7 NASH活动度评分(NAS) | 第27页 |
| 2.4.8 纤维化分期 | 第27页 |
| 2.4.9 血清ALT、AST和GGT活性的测定 | 第27-28页 |
| 2.4.10 小鼠FBG、FINS水平、HOMA-IR的测定 | 第28页 |
| 2.5 统计分析方法 | 第28页 |
| 3. 结果 | 第28-36页 |
| 3.1 16、20、24周模型小鼠一般情况、体质量和肝湿重变化 | 第28-30页 |
| 3.1.1 各组小鼠一般情况 | 第28页 |
| 3.1.2 平均每日进食量和进水量变化 | 第28-29页 |
| 3.1.3 体质量和肝湿重的变化 | 第29-30页 |
| 3.2 16周模型小鼠生化改变 | 第30-32页 |
| 3.2.1 16周小鼠肝组织TG含量变化 | 第30页 |
| 3.2.2 16周小鼠肝组织HYP含量 | 第30页 |
| 3.2.3 16周小鼠血清ALT、AST和GGT活性变化 | 第30-31页 |
| 3.2.4 16周小鼠FBG、FINS、HOMA-IR变化 | 第31-32页 |
| 3.3 16、20、24周各组小鼠肝组织病理比较 | 第32-36页 |
| 3.3.1 肝组织HE染色 | 第32-33页 |
| 3.3.2 肝组织油红O染色 | 第33-34页 |
| 3.3.3 肝组织天狼猩红染色 | 第34-36页 |
| 实验二 祛湿化瘀方对NASH合并肝纤维化小鼠模型的药效学研究 | 第36-56页 |
| 1. 材料 | 第36-38页 |
| 1.1 实验动物 | 第36页 |
| 1.2 造模饲料 | 第36页 |
| 1.3 实验药物 | 第36-37页 |
| 1.4 主要试剂 | 第37-38页 |
| 1.5 主要仪器 | 第38页 |
| 2. 方法 | 第38-43页 |
| 2.1 动物模型构建 | 第38页 |
| 2.2 动物分组及给药 | 第38-39页 |
| 2.3 标本留存和处理 | 第39页 |
| 2.4 检测项目与方法 | 第39-43页 |
| 2.4.1 动物进食量、进水量、体重变化及肝湿重 | 第39页 |
| 2.4.2 肝组织TG的含量测定 | 第39页 |
| 2.4.3 肝组织HYP含量测定 | 第39页 |
| 2.4.4 肝组织HE染色 | 第39页 |
| 2.4.5 肝组织油红O染色 | 第39页 |
| 2.4.6 肝组织天狼猩红染色 | 第39页 |
| 2.4.7 肝脏NAS评分、纤维化分期 | 第39-40页 |
| 2.4.8 血清ALT、AST活性的测定 | 第40页 |
| 2.4.9 小鼠FBG、FINS和HOMA-IR的测定 | 第40页 |
| 2.4.10 肝组织mRNA表达量检测 | 第40-41页 |
| 2.4.11 肝组织蛋白表达量检测 | 第41-43页 |
| 2.4.12 肝组织免疫组化 | 第43页 |
| 2.5 统计分析方法 | 第43页 |
| 3. 结果 | 第43-56页 |
| 3.1 各组小鼠一般情况 | 第43-45页 |
| 3.1.1 各组小鼠用药后平均每日进食量、进水量、总热量 | 第43-44页 |
| 3.1.2 各组小鼠体质量和肝湿重的变化 | 第44-45页 |
| 3.2 祛湿化瘀方对肝组织TG含量的影响 | 第45页 |
| 3.3 祛湿化瘀方对肝组织HYP含量的影响 | 第45-46页 |
| 3.4 各组小鼠肝组织HE染色 | 第46-47页 |
| 3.5 各组小鼠肝组织油红O染色 | 第47页 |
| 3.6 各组小鼠肝组织天狼猩红染色 | 第47-49页 |
| 3.7 祛湿化瘀方对NASH合并肝纤维化小鼠肝功能的影响 | 第49页 |
| 3.7.1 各组小鼠血清ALT活性变化 | 第49页 |
| 3.7.2 各组小鼠血清AST活性变化 | 第49页 |
| 3.8 祛湿化瘀方对NASH合并肝纤维化小鼠糖代谢的影响 | 第49-51页 |
| 3.8.1 各组小鼠FBG变化 | 第49-50页 |
| 3.8.2 各组小鼠FNS变化 | 第50页 |
| 3.8.3 各组小鼠HOMA-IR变化 | 第50-51页 |
| 3.9 各组小鼠肝组织Col-1蛋白、mRNA表达水平和免疫组化 | 第51-52页 |
| 3.10 各组小鼠肝组织α-SMA蛋白、mRNA表达水平和免疫组化 | 第52-54页 |
| 3.11 各组小鼠肝组织TGF-β1蛋白、mRNA表达水平 | 第54页 |
| 3.12 各组小鼠肝组织Col-4 mRNA表达水平 | 第54-56页 |
| 实验三 基于肝组织转录组学初步探讨祛湿化瘀方治疗NASH合并肝纤维化的作用机制 | 第56-84页 |
| 1. 材料 | 第56页 |
| 1.1 实验动物 | 第56页 |
| 1.2 造模饲料 | 第56页 |
| 1.3 实验药物 | 第56页 |
| 1.4 主要试剂与仪器 | 第56页 |
| 2. 方法 | 第56-58页 |
| 2.1 模型制备 | 第56页 |
| 2.2 动物分组 | 第56页 |
| 2.3 用药 | 第56页 |
| 2.4 标本留取 | 第56-57页 |
| 2.5 基因芯片相关实验方法 | 第57页 |
| 2.5.1 提取total RNA | 第57页 |
| 2.5.2 Oligo dT富集mRNA | 第57页 |
| 2.5.3 片段化mRNA | 第57页 |
| 2.5.4 反转合成cDNA | 第57页 |
| 2.5.5 连接adaptor | 第57页 |
| 2.5.6 Illumina Hiseq上机测序 | 第57页 |
| 2.6 结果统计方法 | 第57-58页 |
| 3. 结果 | 第58-84页 |
| 3.1 总RNA质检结果鉴定 | 第58页 |
| 3.2 正常组、模型组与祛湿化瘀方组主成分分析作图 | 第58-59页 |
| 3.3 正常组、模型组与祛湿化瘀方组聚类分析热图 | 第59-60页 |
| 3.4 模型组与正常组转录组芯片表达谱的比较 | 第60-68页 |
| 3.4.1 模型组与正常组差异基因聚类分析热图 | 第60-61页 |
| 3.4.2 模型组与正常组之间差异基因 | 第61-65页 |
| 3.4.3 模型组与正常组之间差异表达基因参与的信号调控通路 | 第65-68页 |
| 3.5 祛湿化瘀方组与模型组转录组芯片表达谱的比较 | 第68-77页 |
| 3.5.1 祛湿化瘀方组与模型组差异基因聚类分析热图 | 第68页 |
| 3.5.2 祛湿化瘀方组与模型组之间差异基因 | 第68-72页 |
| 3.5.3 祛湿化瘀方组与模型组相比差异基因涉及的信号调控通路 | 第72-77页 |
| 3.6 正常组与模型组、模型组与祛湿化瘀方表达趋势相反的差异基因 | 第77-82页 |
| 3.6.1 模型组较正常组显著上调、祛湿化瘀方组较模型组显著下调的差异基因 | 第77-78页 |
| 3.6.2 模型组较正常组显著上调、祛湿化瘀方组较模型组显著下调的差异基因信号通路 | 第78-80页 |
| 3.6.3 模型组较正常组显著下调、祛湿化瘀方组较模型组显著上调的差异基因 | 第80-81页 |
| 3.6.4 模型组较正常组显著下调、祛湿化瘀方组较模型组显著上调的差异基因信号通路 | 第81-82页 |
| 3.7 部分差异基因RT-PCR验证 | 第82-84页 |
| 讨论 | 第84-100页 |
| 1. NASH合并肝纤维化疾病治疗研究现状 | 第84-85页 |
| 2. NASH合并肝纤维化动物模型研究现状及本实验动物模型特点 | 第85-90页 |
| 3. 祛湿化瘀方对实验性NASH合并肝纤维化小鼠模型具有良好疗效 | 第90-92页 |
| 3.1 减轻肝脏脂肪变性和炎症 | 第91页 |
| 3.2 显著改善肝纤维化 | 第91-92页 |
| 3.3 调节糖代谢、改善胰岛素抵抗 | 第92页 |
| 4. 基于转录组学芯片技术对祛湿化瘀方治疗NASH合并肝纤维化小鼠药理学机制分析与探讨 | 第92-97页 |
| 4.1 祛湿化瘀方组与模型组差异基因相关信号通路分析 | 第92-95页 |
| 4.1.1 细胞外基质受体相互作用通路 | 第92-93页 |
| 4.1.2 PI3K-Akt信号通路 | 第93页 |
| 4.1.3 MAPK信号通路 | 第93页 |
| 4.1.4 视黄醇代谢通路 | 第93-94页 |
| 4.1.5 细胞黏附分子通路 | 第94-95页 |
| 4.1.6 胆汁分泌通路 | 第95页 |
| 4.2 正常组、模型组和祛湿化瘀方组三组间差异基因相关信号通路分析 | 第95-97页 |
| 4.2.1 肝脏免疫相关通路 | 第96页 |
| 4.2.2 代谢相关通路 | 第96-97页 |
| 5. 关于阳性对照药奥贝胆酸及扶正化瘀方 | 第97-98页 |
| 6. 研究不足之处及今后研究设想 | 第98-100页 |
| 结论 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-109页 |
| 附录 | 第109-124页 |
