| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 棉花组织培养及生物技术研究进展 | 第16-46页 |
| ·棉花体细胞组织培养 | 第17-22页 |
| ·棉花体细胞胚胎发生 | 第17-18页 |
| ·棉花器官发生 | 第18-19页 |
| ·影响棉花体胚发生和器官发生的因素 | 第19-21页 |
| ·基因型 | 第19页 |
| ·外植体类型及生理状态 | 第19-20页 |
| ·植物生长调节剂 | 第20页 |
| ·培养条件 | 第20-21页 |
| ·体细胞组织培养与棉花遗传改良 | 第21-22页 |
| ·遗传转化受体 | 第21页 |
| ·体细胞突变体的筛选和鉴定 | 第21-22页 |
| ·原生质体融合 | 第22页 |
| ·棉花原生质体培养和融合研究 | 第22-35页 |
| ·棉花原生质体培养研究进展 | 第22-24页 |
| ·棉花原生质体培养操作 | 第24页 |
| ·影响棉花原生质体培养及植株再生的因素 | 第24-27页 |
| ·外植体的选择 | 第24-25页 |
| ·培养条件 | 第25-27页 |
| ·棉花原生质体培养存在的问题和解决方法 | 第27页 |
| ·棉花原生质体融合 | 第27-30页 |
| ·对称融合 | 第28-29页 |
| ·非对称融合 | 第29-30页 |
| ·供体的处理 | 第29-30页 |
| ·受体的处理 | 第30页 |
| ·体细胞杂种鉴定 | 第30-33页 |
| ·形态学鉴定 | 第31页 |
| ·细胞学鉴定 | 第31-32页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第32-33页 |
| ·棉花原生质体培养和融合的应用 | 第33-35页 |
| ·遗传转化研究的材料 | 第33页 |
| ·无性系变异筛选和突变育种 | 第33页 |
| ·克服生殖障碍，创造新种质 | 第33-34页 |
| ·转移抗逆性状，改良棉花品质 | 第34页 |
| ·转移细胞质基因控制性状 | 第34-35页 |
| ·创造中间材料 | 第35页 |
| ·植物原生质体遗传转化研究 | 第35-41页 |
| ·电击穿孔转化法 | 第35-37页 |
| ·研究概况 | 第36页 |
| ·转化原理 | 第36-37页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第37页 |
| ·PEG介导转化法 | 第37-39页 |
| ·研究概况 | 第37-38页 |
| ·转化原理 | 第38-39页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第39页 |
| ·农杆菌与原生质体共培养转化法 | 第39-40页 |
| ·研究概况 | 第39-40页 |
| ·基本步骤 | 第40页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第40页 |
| ·脂质体介导转化法 | 第40-41页 |
| ·研究概况 | 第40-41页 |
| ·转化原理 | 第41页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第41页 |
| ·其他转化方法 | 第41页 |
| ·GFP报告基因的应用 | 第41-44页 |
| ·发光机制 | 第42页 |
| ·GFP的应用领域 | 第42-44页 |
| ·作为报告基因用于转化研究 | 第42-43页 |
| ·作为荧光标记 | 第43页 |
| ·作为报告蛋白用于基因表达研究 | 第43-44页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第44-46页 |
| ·棉种体细胞胚胎发生和器官发生研究 | 第44页 |
| ·棉花原生质体“供-受体”融合研究 | 第44-45页 |
| ·建立以原生质体为受体的遗传转化体系 | 第45-46页 |
| 第二章 不同基因型棉种体细胞胚胎发生和器官发生 | 第46-65页 |
| ·材料与方法 | 第47-53页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-53页 |
| ·鄂抗棉体细胞胚胎发生 | 第47-50页 |
| ·培养基和培养条件 | 第47-49页 |
| ·无菌苗制备和愈伤组织的诱导 | 第49页 |
| ·愈伤组织的增殖及体胚的诱导 | 第49页 |
| ·体胚成熟、萌发与植株移栽 | 第49-50页 |
| ·比克棉器官发生 | 第50-53页 |
| ·培养基和培养条件 | 第50-51页 |
| ·多芽的诱导 | 第51页 |
| ·芽的伸长和根的诱导 | 第51页 |
| ·组织学鉴定 | 第51-52页 |
| ·倍性测定和染色体数目分析 | 第52-53页 |
| ·RAPD检测再生植株及其子代与亲本植株的同质性 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-63页 |
| ·鄂抗棉体细胞胚胎发生和植株再生 | 第53-56页 |
| ·不同激素组合对鄂抗棉品种愈伤组织早期诱导的影响 | 第53-54页 |
| ·不同激素组合对鄂抗棉胚性愈伤组织和体胚发生的影响 | 第54-56页 |
| ·比克棉器官发生和植株再生 | 第56-63页 |
| ·比克棉器官发生 | 第56-61页 |
| ·再生植株的倍性测定和染色体数目分析 | 第61-62页 |
| ·RAPD分析检测再生植株与亲本的同质性 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第三章 原生质体“供-受体”融合亲本的预处理 | 第65-79页 |
| ·材料与方法 | 第66-70页 |
| ·实验材料 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-70页 |
| ·悬浮系的建立 | 第66-67页 |
| ·原生质体分离与纯化 | 第67-68页 |
| ·原生质体预处理和培养 | 第68-69页 |
| ·原生质体活力，分裂频率和植板率检测 | 第69-70页 |
| ·流式细胞仪分析 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-77页 |
| ·IOA处理对原生质体的影响 | 第70-75页 |
| ·UV处理对原生质体的影响 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| 第四章 棉花原生质体“供-受体”融合 | 第79-97页 |
| ·材料与方法 | 第80-83页 |
| ·实验材料 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-83页 |
| ·原生质体分离、纯化和预处理 | 第80页 |
| ·电融合参数的选择 | 第80-81页 |
| ·原生质体电融合、培养及再生 | 第81-82页 |
| ·再生植株细胞学观察 | 第82页 |
| ·再生植株分子检测 | 第82-83页 |
| ·结果与分析 | 第83-94页 |
| ·电融合参数对原生质体融合的影响 | 第83-87页 |
| ·交流电场强度及其作用时间对原生质体融合的影响 | 第84-85页 |
| ·直流脉冲电场强度和脉冲时间对原生质体融合的影响 | 第85-86页 |
| ·脉冲次数对原生质体融合率的影响 | 第86-87页 |
| ·开展的“供-受体”融合 | 第87页 |
| ·YZ-1和G. davidsonii原生质体“供-受体”融合 | 第87-94页 |
| ·原生质体融合，植株再生和形态观察 | 第87-90页 |
| ·再生植株染色体数目分析 | 第90-91页 |
| ·再生植株分子检测 | 第91-94页 |
| ·讨论 | 第94-97页 |
| 第五章 以原生质体为受体的遗传转化 | 第97-111页 |
| ·材料与方法 | 第98-103页 |
| ·实验材料 | 第98-99页 |
| ·植物材料、菌株及质粒载体 | 第98-99页 |
| ·质粒 DNA抽提液配方 | 第99页 |
| ·方法 | 第99-103页 |
| ·原生质体的制备 | 第99页 |
| ·GFP质粒DNA的抽提与纯化 | 第99-100页 |
| ·碱裂解法大量制备质粒DNA | 第99-100页 |
| ·质粒DNA检测 | 第100页 |
| ·原生质体电击穿孔转化 | 第100-101页 |
| ·转化后原生质体的培养，植株再生 | 第101-102页 |
| ·GFP荧光检测 | 第102页 |
| ·实验结果统计 | 第102页 |
| ·转化再生植株的PCR检测 | 第102-103页 |
| ·结果与分析 | 第103-109页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第103-105页 |
| ·电击参数对转化效率的影响 | 第103-104页 |
| ·质粒DNA浓度对转化效率的影响 | 第104-105页 |
| ·原生质体中GFP基因的表达 | 第105-107页 |
| ·转化植株再生 | 第107-109页 |
| ·转化植株的PCR鉴定 | 第109页 |
| ·讨论 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-132页 |
| 研究生阶段发表的文章 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |