摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一部分: 脂联素及受体介导的肌细胞脂肪积累 | 第13-53页 |
1 前言 | 第13-29页 |
·脂肪细胞与脂肪细胞因子 | 第13-15页 |
·肌肉中糖脂代谢 | 第15-18页 |
·概述 | 第15-16页 |
·糖代谢 | 第16页 |
·脂代谢 | 第16-18页 |
·脂肪与肌肉的对话 | 第18-19页 |
·脂联素基因 | 第19-21页 |
·脂联素基因的发现和功能 | 第19-20页 |
·脂联素基因和蛋白质的结构 | 第20-21页 |
·脂联素受体基因 | 第21-27页 |
·脂联素受体的发现 | 第21-23页 |
·脂联素受体和胰岛素敏感性 | 第23-24页 |
·脂联素受体与能量代谢 | 第24-25页 |
·脂联素受体表达调控 | 第25-27页 |
·脂联素与对葡萄糖和脂代谢的调控作用 | 第27-29页 |
·脂联素对葡萄糖代谢的作用 | 第27-28页 |
·脂联素对脂代谢的作用 | 第28-29页 |
·研究目的和意义 | 第29页 |
2. 材料与方法 | 第29-37页 |
·实验材料 | 第29页 |
·实验细胞 | 第29页 |
·菌株及质粒 | 第29页 |
·主要仪器、试剂及溶液配制 | 第29-31页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·主要溶液配制 | 第31页 |
·分子生物学软件 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-37页 |
·细胞培养 | 第31-32页 |
·C2C12细胞诱导分化培养 | 第32页 |
·质粒的大量提取 | 第32-33页 |
·质粒浓度和纯度检测 | 第33页 |
·细胞转染 | 第33页 |
·油红 O染色 | 第33页 |
·细胞总 RNA提取 | 第33-34页 |
·总 RNA纯化 | 第34页 |
·总 RNA纯度鉴定 | 第34-35页 |
·cDNA合成 | 第35页 |
·实时定量PCR | 第35-36页 |
·半定量分析 | 第36-37页 |
·数据统计分析 | 第37页 |
3. 结果 | 第37-50页 |
·在 C2C12成肌过程中肌细胞内脂质积累显著减少 | 第37-40页 |
·在 C2C12成肌过程中与糖脂代谢相关基因的表达 | 第40-42页 |
·转染脂联素减少 C2C12肌细胞内脂肪含量 | 第42-45页 |
·在 C2C12成肌过程中脂联素受体基因的表达 | 第45-47页 |
·脂联素减少肌细胞内脂质含量作用机理 | 第47-50页 |
·转染脂联素对未分化 C2C12细胞糖脂代谢相关基因的影响 | 第47-49页 |
·转染脂联素对分化3天 C2C12细胞糖脂代谢相关基因的影响 | 第49-50页 |
4. 讨论 | 第50-53页 |
第二部分: 脂联素受体相关蛋白的克隆和性质 | 第53-73页 |
1 前言 | 第53-56页 |
2. 材料与方法 | 第56-60页 |
·实验动物 | 第56页 |
·主要仪器、试剂及溶液配制 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-60页 |
·组织样品总 RNA提取 | 第56-57页 |
·总 RNA纯化,鉴定,cDNA合成 | 第57页 |
·基因克隆 | 第57-58页 |
·APPL1和 APPL2基因的组织分布 | 第58-59页 |
·染色体电子定位 | 第59-60页 |
·促卵泡生成素和胰岛素刺激细胞培养 | 第60页 |
·数据统计分析 | 第60页 |
3. 结果 | 第60-67页 |
·猪 APPL1和 APPL2基因的克隆 | 第60-61页 |
·猪 APPL1和 APPL2基因的组织表达普 | 第61-62页 |
·猪 APPL1和 APPL2基因的染色体定位 | 第62-63页 |
·猪 APPL1基因的染色体定位 | 第62-63页 |
·猪 APPL2基因的染色体定位 | 第63页 |
·促卵泡生成素(FSH)对脂联素受体1的作用 | 第63-67页 |
·促卵泡生成素增加3T3-L1细胞和C2C12细胞 AdipoR1的表达 | 第64-65页 |
·促卵泡生成素减少 NIH3T3细胞 AdipoR1的表达 | 第65-67页 |
4. 讨论 | 第67-71页 |
·APPL1和 APPL2基因的克隆 | 第67-68页 |
·促卵泡生成素对 AdipoR1的作用 | 第68-71页 |
5. 结论与创新点 | 第71-73页 |
·结论 | 第71页 |
·创新点 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-85页 |
研究生期间发表的文献 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
附录 | 第87-90页 |