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恶性脑胶质瘤TRAIL敏感性相关微小RNA的功能性筛选及靶向协同治疗策略的建立

缩略语表第5-7页
中文摘要第7-11页
ABSTRACT第11-15页
前言第16-17页
文献回顾第17-32页
第一部分 恶性胶质瘤细胞TRAIL敏感性相关的MICRORNA的筛选、功能鉴定及机制研究第32-76页
    1 实验材料第33-37页
        1.1 细胞株第33页
        1.2 主要试剂第33-34页
        1.3 主要仪器第34页
        1.4 主要引物及序列合成第34-36页
        1.5 肿瘤组织样品第36页
        1.6 实验动物第36-37页
    2 实验方法第37-46页
        2.1 细胞培养第37页
        2.2 细胞转染第37页
        2.3 双荧光素酶报告基因实验第37-38页
        2.4 蛋白质印迹(Western Blot)第38-39页
        2.5 总RNA的提取第39页
        2.6 胶质瘤临床样品中总RNA的提取第39页
        2.7 反转录和实时定量PCR第39页
        2.8 细胞凋亡检测第39-40页
        2.9 Transwell细胞迁移实验第40页
        2.10 成骨诱导分化实验第40-41页
        2.11 成脂诱导分化实验第41页
        2.12 活细胞工作站监测第41-42页
        2.13 细胞共培养实验第42页
        2.14 外泌体分离提取实验第42-43页
        2.15 小鼠皮下荷瘤及尾静脉治疗第43页
        2.16 小鼠瘤体及组织的取材与H&E染色第43页
        2.17 免疫组织化学检测第43-44页
        2.18 TUNEL凋亡检测第44页
        2.19 统计学分析第44-46页
    3 实验结果第46-73页
        3.1 恶性脑胶质瘤细胞TRAIL敏感性相关miRNA的全基因组筛选与分析第46-49页
        3.2 miR-7增强肿瘤细胞的TRAIL促凋亡敏感性第49-52页
        3.3 TRAIL敏感性相关miR-7下游靶基因的筛选与鉴定第52-56页
        3.4 XIAP是miR-7增强TRAIL促凋亡调控轴中的关键分子第56-60页
        3.5 基因修饰间充质干细胞稳转细胞系的建立第60-64页
        3.6 间充质干细胞稳转细胞系通过外泌体影响胶质瘤细胞对TRAIL的凋亡敏感性第64-67页
        3.7 基因修饰间充质干细胞细胞系肿瘤趋向性的分析第67-69页
        3.8 TRAIL-miR-7联合表达的间充质干细胞体内抑瘤的效果评价第69-73页
    4 讨论第73-76页
第二部分 microRNA-7在肝癌细胞中的抑癌新机制研究第76-96页
    1 实验材料第77-80页
        1.1 细胞株第77页
        1.2 主要试剂第77页
        1.3 主要仪器第77-78页
        1.4 主要引物及序列合成第78-79页
        1.5 肿瘤组织样品第79-80页
    2 实验方法第80-84页
        2.1 细胞培养第80页
        2.2 细胞转染第80页
        2.3 双荧光素酶报告基因实验第80-81页
        2.4 蛋白质印迹(Western Blot)第81-82页
        2.5 总RNA的提取第82页
        2.6 反转录和实时定量PCR第82页
        2.7 细胞周期检测第82-83页
        2.8 统计学分析第83-84页
    3 实验结果第84-94页
        3.1 过表达miR-7可导致肝癌细胞周期G1期阻滞第84-86页
        3.2 细胞周期蛋白CCNE1是miR-7的一个新的下游靶基因第86-89页
        3.3 干涉CCNE1通过G1期阻滞抑制肝癌细胞的增殖第89-91页
        3.4 CCNE1是miR-7诱导细胞周期G1期阻滞的关键下游分子第91-93页
        3.5 miR-7与CCNE1在多种肿瘤细胞系和临床肿瘤组织样品中的相关性分析第93-94页
    4 讨论第94-96页
小结第96-98页
参考文献第98-116页
个人简历和研究成果第116-117页
致谢第117-118页

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