玉米耐旱突变体18-599M谷胱甘肽硫转移酶的突变鉴定
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 一 文献综述 | 第10-20页 |
| ·玉米抗旱性研究 | 第10-12页 |
| ·干旱是玉米生产主要的非生物胁迫因素之一 | 第11页 |
| ·玉米耐旱胁迫中的保护酶类 | 第11-12页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶概述 | 第12-19页 |
| ·GST的结构特征 | 第12-14页 |
| ·GST酶的催化机制 | 第14页 |
| ·GST在细胞中的功能 | 第14-16页 |
| ·GST的研究现状 | 第16-19页 |
| ·实验目的和意义 | 第19-20页 |
| 二 材料与方法 | 第20-31页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·酶及试剂 | 第20页 |
| ·载体、菌株与抗生素 | 第20页 |
| ·引物 | 第20-21页 |
| ·所用溶液及培养基的配制 | 第21-22页 |
| ·GST cDNA克隆 | 第22-27页 |
| ·RNA提取 | 第22-23页 |
| ·反转录 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增 | 第24页 |
| ·RT-PCR扩增产物的克隆 | 第24-27页 |
| ·序列比对及蛋白质结构分析 | 第27页 |
| ·GST基因原核表达载体的构建和原核表达 | 第27-30页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第29页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第29-30页 |
| ·GST酶活的测定 | 第30-31页 |
| ·蛋白质标准曲线的制作 | 第30-31页 |
| ·样品的制备 | 第31页 |
| ·GST酶活的测定 | 第31页 |
| 三 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·总RNA浓度和质量检测 | 第31-32页 |
| ·玉米GST基因的克隆与鉴定 | 第32-33页 |
| ·GST-B与GST-Y序列的比对分析 | 第33-36页 |
| ·重组质粒pET-B、pET-Y的构建 | 第36页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第36-37页 |
| ·GST酶活性的测定 | 第37-38页 |
| 四 讨论 | 第38-42页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶与耐旱的关系 | 第38-39页 |
| ·突变对谷胱甘肽硫转移酶的影响 | 第39-40页 |
| ·后续研究建议 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
