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小麦蓝矮植原体溶血素及溶血素同系物基因的克隆、蛋白结构功能的预测及原核表达

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-20页
   ·小麦蓝矮病研究进展第12-14页
     ·病原的鉴定分类研究第12-13页
     ·病原的寄主范围研究第13页
     ·病害发生规律第13-14页
   ·溶血素基因的概况第14页
   ·基因功能研究方法第14-18页
     ·生物信息学分析第14-15页
     ·基因定位与蛋白的亚细胞定位第15-16页
     ·核酸与蛋白质水平的表达分析第16-18页
   ·本研究的目的意义和技术路线第18-20页
第二章 小麦蓝矮植原体溶血素基因及溶血素III 同系物基因的克隆及序列分析第20-28页
   ·试验材料第20页
     ·供试材料第20页
     ·菌种、质粒和试剂第20页
     ·仪器第20页
   ·试验方法第20-22页
     ·小麦总DNA 的提取第20页
     ·溶血素基因及溶血素III 同系物基因PCR 扩增第20-21页
     ·目的片段的克隆及重组质粒鉴定第21-22页
     ·目的片段的序列测定和同源性分析第22页
   ·结果与分析第22-26页
     ·DNA 的提取第22页
     ·TlyC 基因和HlyC 基因的扩增结果第22-23页
     ·TlyC 基因和HlyC 基因重组质粒的鉴定结果第23页
     ·TlyC 基因和HlyC 基因的序列测定与分析第23-26页
   ·讨论第26-28页
第三章 小麦蓝矮植原体溶血素蛋白及溶血素III同系物蛋白的理化特性及跨膜区的预测第28-33页
   ·溶血素蛋白及溶血素Ⅲ同系物蛋白理化特性的分析第28-30页
     ·溶血素蛋白的理化特性第28-29页
     ·溶血素Ⅲ同系物蛋白的理化特性第29-30页
   ·溶血素蛋白及溶血素Ⅲ同系物蛋白跨膜区的预测第30-32页
     ·溶血素蛋白跨膜区的预测第30-31页
     ·溶血素Ⅲ同系物蛋白跨膜区的预测第31-32页
   ·讨论第32-33页
第四章 小麦蓝矮植原体溶血素蛋白和溶血素Ⅲ同系物二级结构、三级结构预测和功能区的分析第33-39页
   ·小麦蓝矮植原体溶血素蛋白和溶血素Ⅲ同系物二级结构的预测分析第33-34页
     ·溶血素蛋白的二级结构预测第33页
     ·溶血素Ⅲ同系物蛋白的二级结构预测第33-34页
   ·小麦蓝矮植原体溶血素蛋白和溶血素Ⅲ同系物三级结构的预测分析第34-35页
     ·溶血素蛋白三级结构的预测分析第34-35页
     ·溶血素Ⅲ同系物三级结构的预测分析第35页
   ·小麦蓝矮植原体溶血素蛋白和溶血素Ⅲ同系物功能区的分析第35-36页
     ·溶血素蛋白功能区的分析第35-36页
     ·溶血素Ⅲ同系物功能区的分析第36页
   ·讨论第36-39页
第五章 小麦蓝矮植原体溶血素基因和溶血素Ⅲ同系物基因的原核表达第39-49页
   ·菌种与载体试剂及SDS-PAGE 所需溶液配制第39页
     ·菌种与载体试剂第39页
     ·SDS-PAGE 所需溶液配制第39页
   ·重组质粒的构建与鉴定第39-43页
     ·pET30a(+)重组质粒的构建与鉴定第39-42页
     ·pGEX-4T-1- TlyC(HlyC)重组质粒的构建第42-43页
   ·SDS-PAGE第43-44页
     ·电泳样品制备第43页
     ·电泳第43页
     ·蛋白表达形式鉴定第43页
     ·诱导表达条件优化第43-44页
   ·结果与分析第44-47页
     ·重组质粒pET30a-TlyC(HlyC)、pGEX-4T-1-TlyC(HlyC)的鉴定结果第44-45页
     ·pET30a-TlyC(HlyC)、pGEX-4T-1- TlyC(HlyC)重组菌液的诱导表达第45-47页
     ·融合蛋白表达形式鉴定第47页
   ·讨论第47-49页
第六章 结论与研究设想第49-51页
   ·主要结论第49-50页
   ·进一步的研究设想第50-51页
参考文献第51-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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