| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 鸡球虫病的免疫及疫苗研究进展 | 第10-26页 |
| ·鸡球虫概述 | 第10-11页 |
| ·鸡球虫病免疫防治的现状 | 第11-19页 |
| ·抗球虫药物对鸡球虫病的免疫防治现状 | 第11页 |
| ·虫体疫苗对鸡球虫病的免疫防治现状 | 第11-14页 |
| ·鸡球虫基因疫苗对鸡球虫病的免疫防治现状 | 第14-19页 |
| ·基因疫苗的外源表达系统研究进展 | 第19-21页 |
| ·鸡球虫病免疫机制 | 第21-24页 |
| ·细胞免疫 | 第21-22页 |
| ·体液免疫 | 第22-23页 |
| ·黏膜免疫 | 第23页 |
| ·细胞因子 | 第23-24页 |
| ·展望 | 第24-26页 |
| 第二章 柔嫩艾美耳球虫YL 株抗原SO7、TA4 基因的克隆及序列分析 | 第26-43页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·试验动物 | 第26页 |
| ·实验所用虫株 | 第26页 |
| ·菌株、载体 | 第26页 |
| ·分子生物学试剂和试剂盒 | 第26-27页 |
| ·培养基及配制 | 第27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·CaCl_2 法转化用材料 | 第27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所需材料 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-32页 |
| ·球虫卵囊的复苏与纯化 | 第28页 |
| ·E. tenella YL 株子孢子总RNA 的提取 | 第28页 |
| ·SO7、TA4 基因的RT-PCR | 第28-29页 |
| ·RT-PCR 产物的回收纯化 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR 产物与pMD18-T easy 的连接 | 第30页 |
| ·连接产物转化 E.coli DH5α(CaCl_2 法) | 第30-31页 |
| ·转化克隆的PCR 鉴定 | 第31页 |
| ·阳性克隆的序列测定及分析 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-42页 |
| ·SO7、TA4 的RT-PCR 结果 | 第32页 |
| ·转化菌落的PCR 鉴定 | 第32-33页 |
| ·SO7、TA4 基因的序列分析 | 第33-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·E. tenellaYL 株抗原基因TA4/SO7 的克隆 | 第42页 |
| ·TA4/SO7 基因抗原亲水性、抗原指数等分析 | 第42-43页 |
| 第三章 柔嫩艾美耳球虫YL 株抗原基因SO7 和TA4 在大肠埃希菌中的表达 | 第43-56页 |
| ·材料 | 第43-45页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·菌株、载体 | 第43页 |
| ·引物 | 第43页 |
| ·常用分子生物学试剂和试剂盒 | 第43-44页 |
| ·常规化学试剂 | 第44页 |
| ·CaCl_2 法转化所需材料 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE 所需材料 | 第44-45页 |
| ·免疫印迹所需材料 | 第45页 |
| ·纯化包涵体所用溶液 | 第45页 |
| ·融合蛋白纯化所用溶液 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| ·SO7、TA4 基因片段的扩增 | 第45-46页 |
| ·载体的制备 | 第46-47页 |
| ·pET-32a(+)与SO7/TA4 的连接 | 第47页 |
| ·用CaCl2 法将连接产物转化入宿主细菌E. coli BL21 | 第47页 |
| ·转化克隆的PCR 鉴定 | 第47-48页 |
| ·PCR 阳性克隆的酶切鉴定 | 第48页 |
| ·SO7/TA4 在E.coli BL21 的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白的大量表达和纯化 | 第49-50页 |
| ·蛋白质浓度与纯度的检测 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-54页 |
| ·SO7、TA4 基因片段的扩增结果 | 第50-51页 |
| ·转化菌落的PCR 鉴定和质粒的酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·SO7/TA4 重组大肠埃希菌的诱导表达纯化和Western bloting 鉴定 | 第52-54页 |
| ·SO7/TA4 融合蛋白浓度的测定 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 SO7/TA4 融合蛋白的动物保护性试验 | 第56-61页 |
| ·材料与方法 | 第56-58页 |
| ·所需仪器及材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| ·结果 | 第58-60页 |
| ·临床症状观察结果 | 第58页 |
| ·盲肠病变计分 | 第58页 |
| ·OPG 值测定结果 | 第58-59页 |
| ·鸡只增重变化 | 第59-60页 |
| ·重组蛋白免疫对球虫感染的综合保护效果 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 缩略语英汉对照表 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
