| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| ·扁穗冰草研究概况 | 第11页 |
| ·植物干旱胁迫的研究进展 | 第11-15页 |
| ·干旱对植物造成的伤害 | 第11-13页 |
| ·植物在干旱胁迫下的形态变化和生理响应 | 第13-15页 |
| ·植物的磷脂酶D | 第15-19页 |
| ·PLD 基因的结构特点与生化特性 | 第15-17页 |
| ·PLD 的调控和在信号转导中的作用 | 第17-18页 |
| ·PLD 对环境胁迫和植物激素的响应 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第19-21页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的基本原理 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的分类 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的定量方法 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| ·试剂及菌种 | 第22页 |
| ·器具的无RNA 酶处理 | 第22页 |
| ·PCR 引物设计及合成 | 第22-24页 |
| ·RT-PCR 引物设计及合成 | 第22-23页 |
| ·RACE 引物的设计及合成 | 第23页 |
| ·荧光定量PCR 的引物设计及合成 | 第23-24页 |
| ·RACE 技术克隆 PLD 的全长 cDNA | 第24-30页 |
| ·扁穗冰草的培养 | 第24页 |
| ·扁穗冰草叶片总RNA 的提取 | 第24页 |
| ·总RNA 浓度及纯度检测 | 第24-25页 |
| ·中间片断Ⅰ的克隆 | 第25-27页 |
| ·中间片断Ⅱ的克隆 | 第27页 |
| ·3′RACE 法扩增扁穗冰草PLD cDNA3′末端序列 | 第27-28页 |
| ·5′RACE 法扩增扁穗冰草PLD cDNA 5′末端序列 | 第28-30页 |
| ·扁穗冰草PLD cDNA 及其推导的氨基酸序列的生物信息学分析 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR 检测干旱胁迫下扁穗冰草PLD 的表达 | 第30-32页 |
| ·扁穗冰草幼苗的干旱胁迫处理 | 第30-31页 |
| ·扁穗冰草总RNA 提取 | 第31页 |
| ·RNA 纯化 | 第31页 |
| ·反转录反应 | 第31页 |
| ·RT-PCR 检测反转录 | 第31-32页 |
| ·Real Time PCR 反应 | 第32页 |
| ·干旱胁迫下扁穗冰草6 项生理指标的变化 | 第32-35页 |
| ·扁穗冰草幼苗干旱胁迫处理 | 第32页 |
| ·过氧化物酶（POD）活性的测定 | 第32-33页 |
| ·过氧化氢酶（CAT）活性的测定 | 第33页 |
| ·丙二醛（MDA）含量的测定 | 第33页 |
| ·脯氨酸的测定含量的测定 | 第33-34页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第34页 |
| ·Ca~(2+)含量的测定 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-52页 |
| ·PLD 基因的 cDNA 克隆 | 第35-38页 |
| ·总RNA 的检测结果 | 第35页 |
| ·扁穗冰草PLD cDNA 中间片断的克隆 | 第35-36页 |
| ·扁穗冰草PLD cDNA RACE 产物的克隆、测序 | 第36-38页 |
| ·扁穗冰草 PLD cDNA 和推导的氨基酸序列的生物信息学分析 | 第38-45页 |
| ·扁穗冰草PLD cDNA 的核苷酸和推导的氨基酸序列分析 | 第38-40页 |
| ·扁穗冰草PLD cDNA 推导的氨基酸序列的理化性质分析 | 第40页 |
| ·PLD 的跨膜区域分析 | 第40-42页 |
| ·PLD 的信号肽 | 第42页 |
| ·扁穗冰草PLD 推导的氨基酸序列疏水性/亲水性分析 | 第42-43页 |
| ·扁穗冰草PLD 与多种植物PLD 的氨基酸序列比对和进化树分析 | 第43-44页 |
| ·扁穗冰草PLD 的二级和三级结构预测分析 | 第44-45页 |
| ·扁穗冰草PLD 的蛋白质固有无序化特性分析 | 第45页 |
| ·荧光定量PCR 检测干旱胁迫下扁穗冰草PLD 的表达 | 第45-48页 |
| ·RNA 提取的结果 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR | 第46页 |
| ·荧光定量PCR | 第46-48页 |
| ·干旱胁迫下扁穗冰草的生理指标的变化 | 第48-50页 |
| ·脯氨酸 | 第48页 |
| ·钙离子 | 第48-49页 |
| ·POD | 第49-50页 |
| ·CAT | 第50页 |
| ·MDA | 第50页 |
| ·可溶性糖 | 第50页 |
| ·扁穗冰草6 项生理指标与PLD 基因表达的相关性分析 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| ·PLD cDNA 克隆和生物信息学分析 | 第52-53页 |
| ·干旱胁迫下PLD 基因的表达和作用 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
