| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-29页 |
| ·性别决定研究历史 | 第11-12页 |
| ·SRY | 第12-18页 |
| ·SRY 的研究历史 | 第12-14页 |
| ·SRY 结构及功能 | 第14-18页 |
| ·SOX9 | 第18-22页 |
| ·SOX9 基因表达 | 第21-22页 |
| ·DAX1 | 第22-23页 |
| ·FOXL2 | 第23-24页 |
| ·前景 | 第24-25页 |
| ·胎龄预测与评估 | 第25-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 牛 SOX9 基因编码区 cDNA 的克隆 | 第29-46页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验动物 | 第29页 |
| ·实验仪器和设备 | 第29-30页 |
| ·实验试剂、菌种和质粒 | 第30页 |
| ·实验方法与步骤 | 第30-41页 |
| ·Total RNA 提取 | 第30页 |
| ·验证起始序列 | 第30-31页 |
| ·5′RACE | 第31-33页 |
| ·3′RACE | 第33-35页 |
| ·3′端同源序列扩增 | 第35-38页 |
| ·第二次3′RACE | 第38-39页 |
| ·5′RACE 序列验证 | 第39页 |
| ·3′RACE 序列验证 | 第39-40页 |
| ·ORF 的获取 | 第40-41页 |
| ·表达载体的构建 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·Total RNA 提取 | 第41页 |
| ·存在起始序列 | 第41-42页 |
| ·得到的5′端序列 | 第42页 |
| ·第一次得到的3′端序列 | 第42页 |
| ·得到的3′端同源序列 | 第42-43页 |
| ·第二次得到的3′RACE 序列 | 第43页 |
| ·验证5′RACE 结果可信 | 第43-44页 |
| ·验证3′RACE 结果可信 | 第44页 |
| ·ORF 获取及表达载体构建 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第三章 牛SOX9 基因和蛋白的生物信息学分析 | 第46-57页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·生物信息学软件 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-56页 |
| ·牛SOX9 序列拼接与ORF 和氨基酸序列预测 | 第47-49页 |
| ·牛SOX9 基因染色体定位与同源性比较 | 第49-50页 |
| ·牛SOX9 蛋白质序列各统计信息 | 第50-51页 |
| ·疏水性分析、跨膜区及信号肽预测 | 第51-53页 |
| ·保守结构域预测 | 第53-54页 |
| ·亚细胞定位 | 第54页 |
| ·翻译后修饰预测 | 第54-55页 |
| ·二级结构预测 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 性别相关基因表达检测 | 第57-74页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·实验动物 | 第57页 |
| ·实验仪器和设备 | 第57页 |
| ·实验试剂、菌种和质粒 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| ·牛胎儿的性别鉴定 | 第58-59页 |
| ·标准质粒和标准曲线构建 | 第59-61页 |
| ·荧光定量检测 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-70页 |
| ·性别鉴定 | 第61-63页 |
| ·生殖嵴总RNA 提取 | 第63页 |
| ·基因标准曲线建立 | 第63-67页 |
| ·性别相关基因的表达结果 | 第67-70页 |
| ·分析与讨论 | 第70-73页 |
| ·结论 | 第73-74页 |
| 第五章 全文结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 作者简历 | 第83页 |