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LXRs激动对PPARγ转录调节脂肪因子表达的作用及机制研究

致谢第1-6页
中文摘要第6-12页
Abstract第12-17页
插图清单第17-19页
缩写、符号清单、术语表第19-24页
第一部分第24-69页
 1 引言第24-28页
 2 材料和方法第28-47页
   ·细胞系第28页
   ·逆转录病毒介导的RNA干扰载体第28-29页
   ·材料及试剂第29-32页
   ·主要仪器及设备第32-33页
   ·溶液配置第33-37页
     ·3T3-L1前脂肪细胞诱导所需试剂配置第33-34页
     ·Western blot所需试剂配置第34-35页
     ·ELISA所需试剂配置第35-36页
     ·质粒抽提和转染所需试剂配置第36-37页
     ·干预药物的配置第37页
   ·实验方法第37-47页
     ·3T3-L1前脂肪细胞的培养和诱导分化第37页
     ·油红O染色第37-38页
     ·荧光嵌合法Real-time RT-PCR第38-40页
     ·蛋白免疫印迹法(Western blot)第40-41页
     ·双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)第41-42页
     ·质粒的扩增、抽提与定量第42-43页
     ·逆转录病毒的制备和感染成熟脂肪细胞第43-44页
     ·实验分组第44-46页
     ·统计分析第46-47页
 3 结果第47-64页
   ·3T3-L1诱导分化成熟过程中LXRs和PPARγ的表达第47-51页
   ·LXRs激动对脂肪因子Adiponectin和Visfatin表达的作用第51-53页
   ·LXRs激动对脂肪炎症因子TNF-α和IL-6表达的作用第53-56页
   ·逆转录病毒介导的shRNA-LXRα质粒转染敲低脂肪细胞LXRα蛋白表达第56-58页
   ·特异性LXRα表达敲低对脂肪因子Adiponectin和Visfatin表达的作用第58-60页
   ·特异性LXRα表达敲低对脂肪炎症因子TNF-α和IL-6表达的作用第60-62页
   ·LXRs激动或特异性LXRα表达敲低对PPARγ表达的作用第62-64页
 4 讨论第64-69页
第二部分第69-100页
 1 引言第69-73页
 2 材料和方法第73-83页
   ·细胞系第73页
   ·质粒和逆转录病毒RNA干扰载体第73页
   ·材料和试剂第73-75页
   ·主要仪器及设备第75页
   ·溶液配置第75-76页
     ·EMSA所需试剂配置第75-76页
     ·质粒抽提所需试剂配置第76页
     ·Western blot及干预药物配置均同第一部分第76页
   ·实验方法第76-83页
     ·质粒扩增及分离纯化第76-77页
     ·质粒的共转染和转染第77页
     ·启动子活性的检测第77-78页
     ·凝胶迁移滞后试验(EMSA)第78-80页
     ·荧光嵌合法Real-time RT-PCR和Western blot方法同第一部分第80页
     ·实验分组第80-82页
     ·统计分析第82-83页
 3 结果第83-95页
   ·LXRs激动拮抗PPARγ转录激活活性第83-86页
   ·LXRs激动通过竞争RXRα受体拮抗PPARγ转录激活作用第86-87页
   ·RXRα补充逆转了LXRs激动对Adiponetcin和Visfatin表达的抑制第87-89页
   ·LXRs激动协同PPARγ抑制NF-κB的转录活性第89-92页
   ·LXRs与PPARγ激动协同抑制脂肪细胞NF-κB信号通路活性第92-95页
 4 讨论第95-99页
 5 结论第99-100页
参考文献第100-110页
综述第110-126页
 References第118-126页
作者简历及在学期间所取得的科研成果第126-127页

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