致谢 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-12页 |
Abstract | 第12-17页 |
插图清单 | 第17-19页 |
缩写、符号清单、术语表 | 第19-24页 |
第一部分 | 第24-69页 |
1 引言 | 第24-28页 |
2 材料和方法 | 第28-47页 |
·细胞系 | 第28页 |
·逆转录病毒介导的RNA干扰载体 | 第28-29页 |
·材料及试剂 | 第29-32页 |
·主要仪器及设备 | 第32-33页 |
·溶液配置 | 第33-37页 |
·3T3-L1前脂肪细胞诱导所需试剂配置 | 第33-34页 |
·Western blot所需试剂配置 | 第34-35页 |
·ELISA所需试剂配置 | 第35-36页 |
·质粒抽提和转染所需试剂配置 | 第36-37页 |
·干预药物的配置 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-47页 |
·3T3-L1前脂肪细胞的培养和诱导分化 | 第37页 |
·油红O染色 | 第37-38页 |
·荧光嵌合法Real-time RT-PCR | 第38-40页 |
·蛋白免疫印迹法(Western blot) | 第40-41页 |
·双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) | 第41-42页 |
·质粒的扩增、抽提与定量 | 第42-43页 |
·逆转录病毒的制备和感染成熟脂肪细胞 | 第43-44页 |
·实验分组 | 第44-46页 |
·统计分析 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-64页 |
·3T3-L1诱导分化成熟过程中LXRs和PPARγ的表达 | 第47-51页 |
·LXRs激动对脂肪因子Adiponectin和Visfatin表达的作用 | 第51-53页 |
·LXRs激动对脂肪炎症因子TNF-α和IL-6表达的作用 | 第53-56页 |
·逆转录病毒介导的shRNA-LXRα质粒转染敲低脂肪细胞LXRα蛋白表达 | 第56-58页 |
·特异性LXRα表达敲低对脂肪因子Adiponectin和Visfatin表达的作用 | 第58-60页 |
·特异性LXRα表达敲低对脂肪炎症因子TNF-α和IL-6表达的作用 | 第60-62页 |
·LXRs激动或特异性LXRα表达敲低对PPARγ表达的作用 | 第62-64页 |
4 讨论 | 第64-69页 |
第二部分 | 第69-100页 |
1 引言 | 第69-73页 |
2 材料和方法 | 第73-83页 |
·细胞系 | 第73页 |
·质粒和逆转录病毒RNA干扰载体 | 第73页 |
·材料和试剂 | 第73-75页 |
·主要仪器及设备 | 第75页 |
·溶液配置 | 第75-76页 |
·EMSA所需试剂配置 | 第75-76页 |
·质粒抽提所需试剂配置 | 第76页 |
·Western blot及干预药物配置均同第一部分 | 第76页 |
·实验方法 | 第76-83页 |
·质粒扩增及分离纯化 | 第76-77页 |
·质粒的共转染和转染 | 第77页 |
·启动子活性的检测 | 第77-78页 |
·凝胶迁移滞后试验(EMSA) | 第78-80页 |
·荧光嵌合法Real-time RT-PCR和Western blot方法同第一部分 | 第80页 |
·实验分组 | 第80-82页 |
·统计分析 | 第82-83页 |
3 结果 | 第83-95页 |
·LXRs激动拮抗PPARγ转录激活活性 | 第83-86页 |
·LXRs激动通过竞争RXRα受体拮抗PPARγ转录激活作用 | 第86-87页 |
·RXRα补充逆转了LXRs激动对Adiponetcin和Visfatin表达的抑制 | 第87-89页 |
·LXRs激动协同PPARγ抑制NF-κB的转录活性 | 第89-92页 |
·LXRs与PPARγ激动协同抑制脂肪细胞NF-κB信号通路活性 | 第92-95页 |
4 讨论 | 第95-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-110页 |
综述 | 第110-126页 |
References | 第118-126页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第126-127页 |