中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第7-9页 |
缩略表 | 第9-10页 |
引言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1 盐分对植物的伤害 | 第11-12页 |
·盐胁迫对细胞膜影响 | 第11页 |
·盐胁迫对呼吸作用影响 | 第11-12页 |
·盐胁迫对光合作用影响 | 第12页 |
2 植物对盐胁迫的适应机制 | 第12-14页 |
·植物结构及器官功能对盐胁迫的适应 | 第12-13页 |
·调节离子稳态 | 第13页 |
·合成渗透调节物质 | 第13-14页 |
3 耐盐相关基因的克隆 | 第14-16页 |
·渗透调节有关的基因 | 第14页 |
·与离子区域化相关的基因 | 第14-15页 |
·参与胁迫信号传导的基因 | 第15页 |
·晚期胚胎发生富集蛋白基因(LEA基因) | 第15页 |
·活性氧清除酶类基因 | 第15-16页 |
4 植物耐盐碱的基因工程 | 第16-17页 |
·清除活性氧的酶基因 | 第16页 |
·编码催化产生的渗透调节物的酶基因 | 第16-17页 |
·耐盐碱植物的基因组DNA | 第17页 |
5 克隆手段在盐生植物中的应用 | 第17-20页 |
·cDNA-AFLP技术的应用 | 第17-18页 |
·RACE技术的应用 | 第18-19页 |
·cDNA文库的应用 | 第19-20页 |
6 基因功能验证在盐生植物中的应用 | 第20-21页 |
·植物遗传转化的应用 | 第20页 |
·mRNA水平的表达分析 | 第20页 |
·蛋白质水平的表达分析 | 第20-21页 |
7 选题背景、目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-35页 |
1 材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株和载体 | 第22页 |
·试剂 | 第22-23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
2 引物 | 第23页 |
3 实验方法 | 第23-35页 |
·cDNA-AFLP操作 | 第23-30页 |
·CA基因的cDNA5'和3'末端快速扩增-RACE | 第30-31页 |
·碳酸酐酶活性的测定 | 第31-32页 |
·半定量RT-PCR检测CA基因的表达 | 第32-33页 |
·CA基因植物表达载体的构建 | 第33页 |
·农杆菌转化拟南芥 | 第33-34页 |
·生物信息学分析 | 第34-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-44页 |
1 提取的RAN质量检测 | 第35页 |
2 cDNA-AFLP技术建立 | 第35-37页 |
·cDNA合成 | 第35页 |
·引物筛选 | 第35-36页 |
·差异片段比对 | 第36-37页 |
3 CA基因全长cDNA的克隆 | 第37-39页 |
·全长cDNA的获得 | 第37-38页 |
·XHM-CA的氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
4 XHM-CA酶活性的测定 | 第39-42页 |
·不同胁迫浓度对XHM-CA酶活性的影响 | 第39-40页 |
·不同胁迫时间对XHM-CA酶活性的影响 | 第40-42页 |
5 XHM-CA在不同时间梯度的表达 | 第42页 |
6 CA-PZP植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
7 农杆菌介导的遗传转化和转基因植株的筛选 | 第43-44页 |
第四章 讨论 | 第44-47页 |
1 总RNA的提取 | 第44页 |
2 CDNA-AFLP技术在小黑麦上的应用 | 第44-45页 |
3 CA基因序列分析以及功能推测 | 第45-47页 |
第五章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54-55页 |
导师评阅表 | 第55页 |