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番茄长花柱品系T431温敏相关ESTs分析及LeMBF1在花芽分化中的功能初析

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1. 前言第12-26页
   ·引言第12页
   ·差异表达基因克隆方法的研究进展第12-17页
     ·MRNA 差异显示技术第12-14页
     ·CDNA 代表性差异分析第14页
     ·抑制性消减杂交技术第14-15页
     ·CDNA 微阵列杂交技术第15-16页
     ·基因表达系列分析技术第16-17页
     ·RNA 指纹技术第17页
   ·转录因子的研究进展第17-22页
     ·转录因子的种类第17-19页
     ·转录因子的作用特点第19-20页
     ·转录因子的结构与功能研究第20-22页
   ·转录辅激活因子的研究进展第22-23页
     ·转录辅激活因子的作用机制第22-23页
     ·MBF1 转录辅激活因子的研究进展第23页
   ·生物信息学的应用研究进展第23-25页
     ·生物信息学的概念与发展第23-24页
     ·生物信息学在基因克隆中的应用第24-25页
   ·研究的目的和意义第25-26页
2. 材料和方法第26-38页
   ·实验材料第26-27页
     ·供试材料第26页
     ·供试菌株第26页
     ·主要试剂第26页
     ·试剂盒第26页
     ·主要仪器第26-27页
   ·实验方法第27-38页
     ·抑制性差减CDNA 文库的筛选及测序分析第27页
     ·长花柱突变体温敏候选基因的确定第27-29页
     ·温敏候选基因的表达分析第29-31页
     ·番茄LEMBF1 基因MRNA 序列的克隆及序列分析第31-35页
     ·番茄LEMBF1 基因组DNA 序列的克隆及序列分析第35-38页
3. 结果与分析第38-59页
   ·BLASTN、BLASTX 比对及ESTS 序列的分类第38-42页
   ·总RNA 提取结果第42-44页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测结果第43页
     ·总RNA 浓度及纯度检测第43-44页
   ·温敏候选基因的表达分析第44-49页
     ·EIF-5A 的表达分析第44-45页
     ·PME 的表达分析第45-47页
     ·LEMBF1 的表达分析第47-49页
   ·LEMBF1 基因MRNA 序列的克隆第49-55页
     ·反转录CDNA 及PCR 扩增第49-50页
     ·PCR 扩增产物的回收和纯化第50页
     ·转化重组菌的鉴定筛选第50-51页
     ·重组质粒的鉴定第51-52页
     ·LEMBF1 的MRNA 序列分析第52页
     ·LEMBF1 的同源性和亲缘关系分析第52-55页
   ·LEMBF1 基因组DNA 序列的克隆第55-59页
     ·DNA 的提取及完整性检测第55页
     ·LEMBF1 的PCR 扩增第55-56页
     ·重组菌的筛选及重组质粒的鉴定第56-57页
     ·LEMBF1 的基因组DNA 序列分析第57-59页
4. 讨论第59-66页
   ·抑制性消减杂交文库的筛选及其EST 序列分析第59-62页
     ·物质代谢和能量代谢类基因第59-60页
     ·生物胁迫和非生物胁迫类基因第60页
     ·转录调控相关基因第60-61页
     ·信号转导类基因第61页
     ·次生代谢相关基因第61-62页
     ·其它基因第62页
   ·番茄T431 温敏候选基因分析第62-64页
     ·EIF-5A 基因的作用分析第62-63页
     ·PME 基因的作用分析第63-64页
     ·LEMBF1 基因的功能分析第64页
   ·今后研究方向第64-66页
5. 结论第66-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-75页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第75页

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