| 摘要 | 第1-16页 |
| Abstract | 第16-22页 |
| 中英文缩写对照表 | 第22-23页 |
| 第一章 文献综述 | 第23-47页 |
| 1 研究问题的由来 | 第23页 |
| 2 应激的概述 | 第23-26页 |
| ·应激 | 第23-25页 |
| ·宰前应激的危害 | 第25页 |
| ·监测应激的措施 | 第25-26页 |
| 3 影响宰前应激的因素 | 第26-30页 |
| ·影响应激和肉质的主效基因 | 第26-28页 |
| ·环境因素 | 第28-30页 |
| 4 降低宰前应激的方法 | 第30-33页 |
| ·筛选最佳的宰前环境 | 第30-31页 |
| ·降低宰前应激的营养调控措施 | 第31-32页 |
| ·培育抗应激品种 | 第32-33页 |
| ·实施福利屠宰策略 | 第33页 |
| 5 宰前应激对肉质影响的可能机制 | 第33-35页 |
| 6 糖皮质激素受体的调控作用 | 第35-38页 |
| 7 钙离子通道与细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 8 研究目的与意义 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 第二章 宰前应激对猪血液生理生化指标以及肉质的影响 | 第47-84页 |
| 试验一 宰前禁食对猪血液生理生化指标以及肉质的影响 | 第47-53页 |
| 前言 | 第47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| ·试验材料 | 第47-48页 |
| ·测定项目与方法 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-51页 |
| ·禁食时间对生理生化指标的影响 | 第49页 |
| ·禁食时间对肉质指标的影响 | 第49-50页 |
| ·禁食时间对血细胞指标的影响 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 小结 | 第52-53页 |
| 试验二 运输压力对猪血液生理生化指标以及肉质的影响 | 第53-64页 |
| 前言 | 第53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-54页 |
| ·试验动物以及试验设计 | 第53-54页 |
| ·样品采集与测定 | 第54页 |
| ·统计与分析 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-59页 |
| ·运输压力对猪生理生化指标的影响 | 第54页 |
| ·运输压力对猪肉质的影响 | 第54-55页 |
| ·运输压力对猪血细胞指标的影响 | 第55-59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| ·运输压力对生理生化指标的影响 | 第59-60页 |
| ·运输压力对肉质的影响 | 第60-62页 |
| ·运输压力对血液指标的影响 | 第62页 |
| 4 小结 | 第62-64页 |
| 试验三 宰前休息方式对猪福利、血液生理生化指标及肉质的影响 | 第64-73页 |
| 前言 | 第64页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| ·试验材料 | 第64-65页 |
| ·测定项目与方法 | 第65页 |
| ·数据统计分析 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-70页 |
| ·精神状态评分 | 第66-67页 |
| ·血液生理指标 | 第67-68页 |
| ·肉质性状 | 第68-69页 |
| ·血细胞参数 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| ·宰前休息方式对猪精神状态的影响 | 第70页 |
| ·宰前休息方式对猪生理生化指标的影响 | 第70-71页 |
| ·宰前休息方式对猪肉质的影响 | 第71页 |
| ·宰前休息方式对猪血细胞参数的影响 | 第71-72页 |
| 4 小结 | 第72-73页 |
| 试验四 宰杀方式对猪血液生理生化指标以及肉质的影响 | 第73-84页 |
| 前言 | 第73页 |
| 1 材料与方法 | 第73-74页 |
| ·试验材料 | 第73-74页 |
| ·测定项目与方法 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-76页 |
| ·宰杀方式对生理生化指标的影响 | 第74页 |
| ·宰杀方式对肉质的影响 | 第74-75页 |
| ·宰杀方式对血细胞指标的影响 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| ·宰杀方式对血液中激素与血清酶的影响 | 第76-77页 |
| ·宰杀方式对肉质的影响 | 第77页 |
| ·宰杀方式对血细胞指标的影响 | 第77页 |
| 4 小结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 第三章 应激激素对肌细胞的影响 | 第84-112页 |
| 前言 | 第84页 |
| 1 材料与方法 | 第84-90页 |
| ·试验动物 | 第84-85页 |
| ·细胞系与试剂 | 第85页 |
| ·原代猪骨骼肌细胞的分离 | 第85页 |
| ·MTT试验 | 第85-86页 |
| ·LDH的测定 | 第86页 |
| ·DNA ladder试验 | 第86-87页 |
| ·AO/EB试验 | 第87页 |
| ·ROS的测定 | 第87页 |
| ·流式细胞术测定细胞凋亡 | 第87页 |
| ·RNA抽提,cDNA第一链合成以及半定量RT-PCR | 第87-88页 |
| ·Western Blotting | 第88-89页 |
| ·Caspase-3活性的测定 | 第89页 |
| ·资料统计分析 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-105页 |
| ·宰前应激导致应激激素的变化 | 第90页 |
| ·宰前应激导致猪肉质的变化 | 第90-91页 |
| ·应激激素与肉质之间的关系 | 第91-92页 |
| ·不同浓度的DEX对肌细胞存活率的影响 | 第92-94页 |
| ·DEX对肌细胞中LDH释放量的影响 | 第94-95页 |
| ·DNA ladder法检测DEX对肌细胞中细胞核损伤的影响 | 第95-96页 |
| ·A0/EB双染法检测DEX对肌细胞中细胞核的影响 | 第96-98页 |
| ·流式细胞仪检测DEX对肌细胞中细胞核的影响 | 第98-100页 |
| ·DEX对猪原代肌细胞氧化应激的影响 | 第100-101页 |
| ·不同的DEX浓度对C2C12细胞中凋亡相关基因的影响 | 第101-104页 |
| ·不同的DEX浓度对猪原代肌细胞中凋亡相关基因的影响 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-108页 |
| ·应激与应激激素 | 第105页 |
| ·应激激素与肉质 | 第105-106页 |
| ·应激激素对肌细胞的毒性 | 第106-108页 |
| ·应激激素导致肌细胞凋亡 | 第108页 |
| 4 小结 | 第108页 |
| 参考文献 | 第108-112页 |
| 第四章 应激激素对钙离子通道的调控作用 | 第112-152页 |
| 前言 | 第112-113页 |
| 1 材料与方法 | 第113-121页 |
| ·化学药品与抗体 | 第113-114页 |
| ·动物与组织样品 | 第114页 |
| ·RNA抽提以及RT-PCR分析 | 第114页 |
| ·Western blotting分析 | 第114页 |
| ·组织表达谱分析 | 第114页 |
| ·胞质中钙离子的测定 | 第114-115页 |
| ·基因组步移库的构建 | 第115-116页 |
| ·启动子的分离与克隆 | 第116页 |
| ·生物信息学软件分析启动子区域结合元件 | 第116页 |
| ·目的质粒载体的构建 | 第116-118页 |
| ·脂质体Lipofectamine~(TM) 2000转染条件的确定 | 第118页 |
| ·启动子活性的测定 | 第118-119页 |
| ·EMSA法验证GRE元件的存在 | 第119-121页 |
| 2 结果与分析 | 第121-142页 |
| ·RNA完整性检测 | 第121-122页 |
| ·肌细胞中胞质钙离子的测定 | 第122-123页 |
| ·组织表达谱分析 | 第123-124页 |
| ·DEX浓度对肌细胞中钙离子通道相关基因的影响 | 第124-126页 |
| ·DEX对肌细胞中GRα的影响 | 第126-127页 |
| ·DEX对依赖钙离子激活基因的影响 | 第127-129页 |
| ·基因组步移库的构建 | 第129-130页 |
| ·猪IP3R1基因启动子区域的步移结果 | 第130-131页 |
| ·猪SERCA1基因启动子区域的步移结果 | 第131-133页 |
| ·猪中IP3R1与SERCA1启动子区域部分序列的生物信息学分析 | 第133-135页 |
| ·猪中IP3R1与SERCA1启动子区域删减片断的扩增以及对应的重组质粒构建 | 第135-138页 |
| ·猪中IP3R1与SERCA1启动子活性的分析 | 第138-141页 |
| ·EMSA试验证实GRE元件的存在 | 第141-142页 |
| 3 讨论 | 第142-146页 |
| ·钙离子的重要作用 | 第142-143页 |
| ·钙离子与钙离子通道 | 第143-144页 |
| ·糖皮质激素受体的作用方式 | 第144-145页 |
| ·验证转录因子GRα与核调控元件GRE序列 | 第145-146页 |
| 4 小结 | 第146-147页 |
| 参考文献 | 第147-152页 |
| 主要创新点 | 第152页 |
| 下一步工作计划 | 第152-153页 |
| 附录 | 第153-155页 |
| 在读期间发表论文题录 | 第155-157页 |
| 肉猪福利型运输屠宰技术规程 | 第157-160页 |
| 致谢 | 第160-162页 |
