个人简历 | 第3-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-14页 |
前言 | 第14-17页 |
材料与方法 | 第17-47页 |
1.材料 | 第17-25页 |
1.1 细胞系与菌株 | 第17页 |
1.2 质粒 | 第17-19页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第19-21页 |
1.4 转染试剂 | 第21页 |
1.5 实验用的抗体 | 第21页 |
1.6 其他自己配制试剂 | 第21-24页 |
1.7 主要仪器设备 | 第24-25页 |
1.8 引物 | 第25页 |
2.实验方法 | 第25-47页 |
2.1 HCC样本的基因组CNA、基因表达和生存分析 | 第25-26页 |
2.2 临床病理资料 | 第26页 |
2.3 组织样本的收集 | 第26-27页 |
2.4 基因组DNA的提取和CNA检测 | 第27-28页 |
2.5 RNA提取、反转录PCR和荧光定量PCR | 第28-31页 |
2.6 细胞培养及转染 | 第31-33页 |
2.7 ZC3H14 稳定敲低/过表达细胞株构建 | 第33-39页 |
2.8 细胞生长的检测 | 第39-40页 |
2.9 CCK-8 法检测细胞增殖抑制率 | 第40页 |
2.10 细胞增殖实验(Brdu法) | 第40-41页 |
2.11 细胞平板克隆实验 | 第41页 |
2.12 细胞迁移的检测 | 第41-42页 |
2.13 细胞迁移的药物敏感性实验 | 第42页 |
2.14 裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型实验 | 第42-43页 |
2.15 ZC3H14 基因敲除后的mRNA表达谱 | 第43页 |
2.16 基因集富集分析 | 第43页 |
2.17 免疫印迹(Western blotting) | 第43-46页 |
2.18 实验结果的统计分析 | 第46-47页 |
结果 | 第47-69页 |
3.实验结果 | 第47-69页 |
3.1 整合基因组学分析发现ZC3H14是14q31.1-32.13 缺失区域一个候选HCC相关基因 | 第47-50页 |
3.2 ZC3H14 低表达与14q31.1-32.13 区域的缺失和HCC患者的不良预后显著相关 | 第50-55页 |
3.3 ZC3H14 抑制HCC细胞的生长和迁移 | 第55-59页 |
3.4 ZC3H14 抑制HCC细胞在裸鼠体内的生长和迁移 | 第59-61页 |
3.5 ZC3H14 敲低表达谱分析其影响的信号通路 | 第61-65页 |
3.6 ZC3H14 通过抑制Integrin信号通路在HCC中发挥抑癌作用 | 第65-69页 |
讨论 | 第69-73页 |
全文结论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-82页 |
附录 | 第82-88页 |
综述 | 第88-100页 |
参考文献 | 第95-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第101页 |