摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-29页 |
1 引言 | 第14-15页 |
2 G蛋白的结构和调控循环 | 第15-16页 |
3 G蛋白α亚基的种类和功能 | 第16-23页 |
·Gas家族 | 第17-20页 |
·Gαi/o家族 | 第20-22页 |
·Gαq/11家族 | 第22-23页 |
·Gα12/13家族 | 第23页 |
4 G蛋白在昆虫信号传导中的主要作用及研究现状 | 第23-26页 |
·G蛋白在昆虫中研究现状 | 第23-24页 |
·G蛋白在昆虫信号传导中的作用 | 第24-26页 |
5 选题依据与研究意义 | 第26-28页 |
6 技术路线 | 第28-29页 |
第二章 稻水象甲G蛋白α亚基基因的克隆及序列分析 | 第29-47页 |
1 引言 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-37页 |
·实验材料 | 第30页 |
·主要试剂和仪器 | 第30页 |
·稻水象甲G蛋白α亚基基因的克隆 | 第30-37页 |
·稻水象甲Gα基因序列特征分析 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-45页 |
·稻水象甲头部总RNA的提取 | 第37页 |
·稻水象甲Gα基因片段的扩增及序列测定 | 第37-38页 |
·稻水象甲Gα基因3'RACE扩增及序列测定 | 第38-39页 |
·稻水象甲Gα基因ORF的扩增及序列测定 | 第39页 |
·稻水象甲Gα基因的序列分析 | 第39-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
第三章 稻水象甲Gαo基因的原核表达、多克隆抗体制备及其组织分布的Westernblot检测 | 第47-60页 |
1 引言 | 第47页 |
2 材料与方法 | 第47-54页 |
·实验材料 | 第47页 |
·主要试剂和仪器 | 第47-49页 |
·表达载体的构建和鉴定 | 第49-51页 |
·pET/Goα融合蛋白的诱导表达 | 第51-52页 |
·多克隆抗体的制备及效价测定 | 第52-53页 |
·Western blot定性检测LoGαo在稻水象甲组织的分布 | 第53-54页 |
3 结果与分析 | 第54-58页 |
·pET/Lo Gαo原核表达载体的构建和鉴定 | 第54-56页 |
·pET/Lo Gαo融合表达蛋白的诱导 | 第56-57页 |
·Lo Goα融合蛋白抗血清的效价测定 | 第57页 |
·Western blot定性检测Lo Gαo在稻水象甲组织的分布 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
第四章 Real-time PCR鉴定稻水象甲Gαo基因的转录表达 | 第60-67页 |
1 引言 | 第60-62页 |
2 材料与方法 | 第62-64页 |
·实验材料 | 第62页 |
·主要试剂和仪器 | 第62页 |
·总RNA的提取 | 第62页 |
·引物设计 | 第62-63页 |
·反转录合成cDNA第一链 | 第63页 |
·RealTime-PCR反应体系的建立 | 第63-64页 |
·数据分析 | 第64页 |
3 结果与分析 | 第64-65页 |
·稻水象甲各组织总RNA的提取 | 第64页 |
·Lo Gαo转录水平上的表达谱 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
第五章 稻水象甲触角感器的扫描电镜观察 | 第67-76页 |
1 引言 | 第67页 |
2 材料与方法 | 第67-68页 |
·实验材料 | 第67-68页 |
·主要试剂和仪器 | 第68页 |
·样品处理方法 | 第68页 |
·数据分析方法 | 第68页 |
3 结果与分析 | 第68-72页 |
·稻水象甲触角的基本结构 | 第68-69页 |
·稻水象甲触角感器的类型和分布 | 第69-72页 |
·孤雌生殖和两性生殖稻水象甲触角感器形态上的差别 | 第72页 |
4 讨论 | 第72-76页 |
第六章 稻水象甲Gao亚基在触角感器中的免疫定位 | 第76-83页 |
1 引言 | 第76-77页 |
2 材料与方法 | 第77-79页 |
·实验材料与试剂 | 第77-78页 |
·方法与步骤 | 第78-79页 |
3 实验结果与分析 | 第79-81页 |
4 讨论 | 第81-83页 |
第七章 酵母双杂交筛选与稻水象甲Gαo相互作用的蛋白 | 第83-105页 |
1 引言 | 第83-84页 |
2 材料与方法 | 第84-98页 |
·实验材料与试剂 | 第84-88页 |
·方法与步骤 | 第88-98页 |
3 结果与分析 | 第98-104页 |
·诱饵蛋白pGBKT7/Gao的构建 | 第98-100页 |
·稻水象甲头部cDNA文库的构建 | 第100-101页 |
·用G蛋白αo亚基做诱饵筛选稻水象甲头部cDNA文库的结果 | 第101-104页 |
4 讨论 | 第104-105页 |
第八章 结论和总讨论 | 第105-109页 |
参考文献 | 第109-117页 |
附录A 实验主要仪器和设备 | 第117-118页 |
致谢 | 第118页 |