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稻水象甲G蛋白α亚基基因的克隆、表达分析和相互作用蛋白的筛选

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
第一章 文献综述第14-29页
 1 引言第14-15页
 2 G蛋白的结构和调控循环第15-16页
 3 G蛋白α亚基的种类和功能第16-23页
   ·Gas家族第17-20页
   ·Gαi/o家族第20-22页
   ·Gαq/11家族第22-23页
   ·Gα12/13家族第23页
 4 G蛋白在昆虫信号传导中的主要作用及研究现状第23-26页
   ·G蛋白在昆虫中研究现状第23-24页
   ·G蛋白在昆虫信号传导中的作用第24-26页
 5 选题依据与研究意义第26-28页
 6 技术路线第28-29页
第二章 稻水象甲G蛋白α亚基基因的克隆及序列分析第29-47页
 1 引言第29-30页
 2 材料与方法第30-37页
   ·实验材料第30页
   ·主要试剂和仪器第30页
   ·稻水象甲G蛋白α亚基基因的克隆第30-37页
   ·稻水象甲Gα基因序列特征分析第37页
 3 结果与分析第37-45页
   ·稻水象甲头部总RNA的提取第37页
   ·稻水象甲Gα基因片段的扩增及序列测定第37-38页
   ·稻水象甲Gα基因3'RACE扩增及序列测定第38-39页
   ·稻水象甲Gα基因ORF的扩增及序列测定第39页
   ·稻水象甲Gα基因的序列分析第39-45页
 4 讨论第45-47页
第三章 稻水象甲Gαo基因的原核表达、多克隆抗体制备及其组织分布的Westernblot检测第47-60页
 1 引言第47页
 2 材料与方法第47-54页
   ·实验材料第47页
   ·主要试剂和仪器第47-49页
   ·表达载体的构建和鉴定第49-51页
   ·pET/Goα融合蛋白的诱导表达第51-52页
   ·多克隆抗体的制备及效价测定第52-53页
   ·Western blot定性检测LoGαo在稻水象甲组织的分布第53-54页
 3 结果与分析第54-58页
   ·pET/Lo Gαo原核表达载体的构建和鉴定第54-56页
   ·pET/Lo Gαo融合表达蛋白的诱导第56-57页
   ·Lo Goα融合蛋白抗血清的效价测定第57页
   ·Western blot定性检测Lo Gαo在稻水象甲组织的分布第57-58页
 4 讨论第58-60页
第四章 Real-time PCR鉴定稻水象甲Gαo基因的转录表达第60-67页
 1 引言第60-62页
 2 材料与方法第62-64页
   ·实验材料第62页
   ·主要试剂和仪器第62页
   ·总RNA的提取第62页
   ·引物设计第62-63页
   ·反转录合成cDNA第一链第63页
   ·RealTime-PCR反应体系的建立第63-64页
   ·数据分析第64页
 3 结果与分析第64-65页
   ·稻水象甲各组织总RNA的提取第64页
   ·Lo Gαo转录水平上的表达谱第64-65页
 4 讨论第65-67页
第五章 稻水象甲触角感器的扫描电镜观察第67-76页
 1 引言第67页
 2 材料与方法第67-68页
   ·实验材料第67-68页
   ·主要试剂和仪器第68页
   ·样品处理方法第68页
   ·数据分析方法第68页
 3 结果与分析第68-72页
   ·稻水象甲触角的基本结构第68-69页
   ·稻水象甲触角感器的类型和分布第69-72页
   ·孤雌生殖和两性生殖稻水象甲触角感器形态上的差别第72页
 4 讨论第72-76页
第六章 稻水象甲Gao亚基在触角感器中的免疫定位第76-83页
 1 引言第76-77页
 2 材料与方法第77-79页
   ·实验材料与试剂第77-78页
   ·方法与步骤第78-79页
 3 实验结果与分析第79-81页
 4 讨论第81-83页
第七章 酵母双杂交筛选与稻水象甲Gαo相互作用的蛋白第83-105页
 1 引言第83-84页
 2 材料与方法第84-98页
   ·实验材料与试剂第84-88页
   ·方法与步骤第88-98页
 3 结果与分析第98-104页
   ·诱饵蛋白pGBKT7/Gao的构建第98-100页
   ·稻水象甲头部cDNA文库的构建第100-101页
   ·用G蛋白αo亚基做诱饵筛选稻水象甲头部cDNA文库的结果第101-104页
 4 讨论第104-105页
第八章 结论和总讨论第105-109页
参考文献第109-117页
附录A 实验主要仪器和设备第117-118页
致谢第118页

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