| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 前言 | 第16-17页 |
| 上篇 | 第17-58页 |
| 第一章 文献研究 | 第17-40页 |
| 1 传统医学对肝脏胰岛素抵抗的认识 | 第17-23页 |
| 1.1 定义 | 第17页 |
| 1.2 历史沿革 | 第17-18页 |
| 1.3 中医对肝脏胰岛素抵抗病因病机的认识 | 第18-20页 |
| 1.4 中医对肝脏胰岛素抵抗的治疗 | 第20-23页 |
| 2 现代医学对肝脏胰岛素抵抗的研究 | 第23-40页 |
| 2.1 定义 | 第23-24页 |
| 2.2 病因病机 | 第24-32页 |
| 2.3 诊断 | 第32-35页 |
| 2.4 治疗 | 第35-40页 |
| 第二章 课题组前期对肝脏胰岛素抵抗的研究成果 | 第40-46页 |
| 1 葛根芩连汤的立方依据及背景 | 第40-41页 |
| 2 葛根芩连汤治疗胰岛素抵抗的前期研究基础 | 第41-46页 |
| 2.1 临床实验 | 第41-44页 |
| 2.2 本课题的创新构思 | 第44-46页 |
| 第三章 microRNA-146b与SIRT1研究进展 | 第46-50页 |
| 1 miR-146b的研究进展 | 第46-47页 |
| 2 SIRT1与胰岛素抵抗的研究进展 | 第47-50页 |
| 2.1 SIRT1与骨骼肌胰岛素抵抗 | 第47页 |
| 2.2 SIRT1与脂肪组织胰岛素抵抗 | 第47-48页 |
| 2.3 SIRT1与肝脏胰岛素抵抗 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 中篇 | 第58-122页 |
| 第一章 葛根芩连汤的药理学分析 | 第58-69页 |
| 1 实验材料 | 第58-59页 |
| 1.1 药物 | 第58-59页 |
| 1.2 动物 | 第59页 |
| 1.3 仪器设备 | 第59页 |
| 2 含药血清色谱质谱联合分析 | 第59-62页 |
| 2.1 动物喂养 | 第59-60页 |
| 2.2 动物分组及给药方法 | 第60页 |
| 2.3 含药血清的制备 | 第60页 |
| 2.4 含药血清的质谱测定 | 第60-62页 |
| 3 葛根芩连汤的网络药理学分析 | 第62-67页 |
| 3.1 网络构建与分析 | 第62-63页 |
| 3.2 结果与分析 | 第63-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第二章 葛根芩连汤对高脂诱导肝脏胰岛素抵抗小鼠SIRT1/FoxO1信号通路的影响 | 第69-91页 |
| 前言 | 第69页 |
| 1 实验材料及方法 | 第69-72页 |
| 1.1 实验仪器 | 第69-70页 |
| 1.2 实验动物 | 第70页 |
| 1.3 高脂饲料 | 第70页 |
| 1.4 实验试剂 | 第70-71页 |
| 1.5 蛋白印迹实验所用抗体 | 第71-72页 |
| 1.6 Real-time PCR所用引物序列 | 第72页 |
| 2 实验方法 | 第72-77页 |
| 2.1 肝脏胰岛素抵抗小鼠模型的制备 | 第72页 |
| 2.2 动物分组及给药 | 第72页 |
| 2.3 小鼠腹腔葡萄糖耐量实验(IPGTT) | 第72-73页 |
| 2.4 小鼠腹腔胰岛素耐量实验(IPITT) | 第73页 |
| 2.5 标本的留取和血清指标的测定 | 第73页 |
| 2.6 各血清指标ELISA检测 | 第73页 |
| 2.7 肝脏组织病理 | 第73-74页 |
| 2.8 肝脏组织RNA提取 | 第74页 |
| 2.9 逆转录反应制备cDNA | 第74页 |
| 2.10 Real-time PCR检测 | 第74-75页 |
| 2.11 肝脏组织总蛋白提取 | 第75页 |
| 2.12 BCA测定蛋白浓度 | 第75-76页 |
| 2.13 免疫沉淀 | 第76页 |
| 2.14 SDS-PAGE电泳 | 第76-77页 |
| 2.15 统计学分析 | 第77页 |
| 3 实验结果 | 第77-87页 |
| 3.1 高脂喂养对小鼠的影响 | 第77-78页 |
| 3.2 各组给药前后体重和血糖的变化 | 第78-79页 |
| 3.3 各组给药前后肝酶的变化 | 第79-80页 |
| 3.4 各组给药前后血脂的变化 | 第80-81页 |
| 3.5 各组给药前后胰岛素、HOMA-IR的变化 | 第81-82页 |
| 3.6 各组IPGTT的变化 | 第82-83页 |
| 3.7 各组IPITT的变化 | 第83-84页 |
| 3.8 各组小鼠肝脏病理结果比较 | 第84-86页 |
| 3.9 各组小鼠SIRT1、FoxO1 mRNA含量 | 第86页 |
| 3.10 各组小鼠SIRT1/FoxO1信号通路相关蛋白表达水平比较 | 第86-87页 |
| 4 分析及讨论 | 第87-89页 |
| 5 实验结论 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-91页 |
| 第三章 葛根芩连汤含药血清对胰岛素抵抗HepG2细胞SIRT1/FoxO1信号通路的影响 | 第91-107页 |
| 前言 | 第91页 |
| 1 实验材料 | 第91-94页 |
| 1.1 细胞 | 第91页 |
| 1.2 试验药物及试剂 | 第91-94页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第94页 |
| 2 实验方法 | 第94-99页 |
| 2.1 细胞培养 | 第94页 |
| 2.2 HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立 | 第94-95页 |
| 2.3 HepG2细胞实验分组 | 第95页 |
| 2.4 HepG2细胞siRNA的转染 | 第95页 |
| 2.5 糖原试剂盒检测糖原合成能力 | 第95-96页 |
| 2.6 MTT法检测药物对HepG2细胞存活率的影响 | 第96页 |
| 2.7 细胞蛋白的提取 | 第96页 |
| 2.8 BCA测定蛋白浓度 | 第96页 |
| 2.9 免疫沉淀 | 第96-97页 |
| 2.10 SDS-PAGE电泳 | 第97-98页 |
| 2.11 细胞mRNA的提取 | 第98页 |
| 2.12 逆转录反应制备cDNA | 第98页 |
| 2.13 Real-time PCR检测 | 第98-99页 |
| 2.14 数据统计 | 第99页 |
| 3 实验结果 | 第99-103页 |
| 3.1 棕榈酸最大无毒浓度的测定 | 第99-100页 |
| 3.2 吡格列酮最大无毒浓度的测定 | 第100页 |
| 3.3 葛根芩连汤含药血清最大无毒浓度的测定 | 第100-101页 |
| 3.4 葛根芩连汤对HepG2细胞糖原合成能力的影响 | 第101页 |
| 3.5 葛根芩连汤对SIRT1/FoxO1信号通路相关蛋白表达的影响 | 第101-102页 |
| 3.6 葛根芩连汤对PPARγ、FABP4相关蛋白表达的影响 | 第102页 |
| 3.7 SIRT1介导葛根芩连汤对HepG2细胞FoxO1、PPARy的调控作用 | 第102-103页 |
| 4 分析及讨论 | 第103-105页 |
| 5 实验结论 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-107页 |
| 第四章 葛根芩连汤对肝脏胰岛素抵抗下miR-146b/SIRT1的影响 | 第107-122页 |
| 前言 | 第107页 |
| 1 实验材料 | 第107-109页 |
| 1.1 实验仪器 | 第107-108页 |
| 1.2 实验细胞株 | 第108页 |
| 1.3 实验动物 | 第108页 |
| 1.4 实验试剂 | 第108-109页 |
| 2 实验方法 | 第109-114页 |
| 2.1小鼠肝脏组织RNA的提取 | 第109-110页 |
| 2.2. HepG2细胞转染 | 第110-111页 |
| 2.3细胞RNA的提取 | 第111页 |
| 2.4逆转录反应制备cDNA | 第111-112页 |
| 2.5 Real-time PCR检测 | 第112页 |
| 2.6细胞蛋白的提取 | 第112-113页 |
| 2.7 BCA测定蛋白浓度 | 第113页 |
| 2.8免疫沉淀 | 第113页 |
| 2.9 SDS-PAGE电泳 | 第113-114页 |
| 2.10数据统计 | 第114页 |
| 3实验结果 | 第114-119页 |
| 3.1 miR-146b在各组小鼠肝脏中的表达 | 第114-115页 |
| 3.2 miR-146b在HepG2细胞中的表达 | 第115页 |
| 3.3 miR-146b mimics转染后SIRTl/FoxOl信号通路相关分子蛋白及mRNA的变化 | 第115-117页 |
| 3.4 miR-146b inhibitor转染后SIRTl/FoxOl信号通路相关分子蛋白及mRNA的变化 | 第117-119页 |
| 4讨论及分析 | 第119-120页 |
| 5实验结论 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-122页 |
| 下篇 | 第122-125页 |
| 全文小结 | 第122-125页 |
| 1研究结论 | 第122-123页 |
| 2创新点 | 第123页 |
| 3研究不足 | 第123页 |
| 4展望 | 第123-125页 |
| 附录 | 第125-137页 |
| 附件一缩略词英汉对照表 | 第125-127页 |
| 附件二中医证候评分表 | 第127-128页 |
| 附件三葛根芩连汤中药材主要有效化学成分 | 第128-132页 |
| 附件四葛根芩连汤潜在参与信号通路 | 第132-136页 |
| 附录五miR-146b和SIRT1预测位点 | 第136-137页 |
| 读博士学位期间取得的研究成果 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 个人简介 | 第139页 |
