缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRAC T | 第11-14页 |
前言 | 第15-17页 |
文献回顾 | 第17-32页 |
实验一 MTA1与ERa在大鼠、小鼠附睾中的表达及共定位研究 | 第32-48页 |
1 材料 | 第32-35页 |
1.1 实验动物 | 第32-33页 |
1.2 实验试剂 | 第33-34页 |
1.3 主要试剂配方 | 第34-35页 |
1.4 实验仪器 | 第35页 |
2 方法 | 第35-44页 |
2.1 RT-PCR | 第35-38页 |
2.2 实时定量PCR | 第38-39页 |
2.3 Western Blot | 第39-42页 |
2.4 免疫组织化学(IHC) | 第42-43页 |
2.5 免疫荧光(IF)双标染色 | 第43-44页 |
2.6 统计学分析 | 第44页 |
3 结果 | 第44-46页 |
3.1 MTA1在大鼠附睾组织的表达 | 第44-45页 |
3.2 MTA1与ERα 在大鼠附睾的共定位 | 第45页 |
3.3 NHE3在大鼠附睾的表达 | 第45页 |
3.4 MTA1与ERα 在小鼠附睾组织的共定位 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
实验二 附睾中MTA1对ERa介导的基因转录的影响 | 第48-64页 |
1 材料 | 第48-51页 |
1.1 实验细胞和动物 | 第48页 |
1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
1.3 主要试剂配方 | 第49-50页 |
1.4 实验仪器 | 第50-51页 |
2 方法 | 第51-57页 |
2.1 PC1细胞中ERα 对其靶基因的影响 | 第51-52页 |
2.2 构建MTA1表达载体 | 第52-55页 |
2.3 细胞转染 | 第55页 |
2.4 细胞转染后ERα 及其靶基因的检测 | 第55页 |
2.5 CA12在小鼠附睾的表达检测 | 第55-56页 |
2.6 Mta1KO小鼠的基因型鉴定 | 第56-57页 |
2.7 Mta1KO小鼠附睾管腔pH值的检测 | 第57页 |
2.8 Mta1KO小鼠附睾中ERα 及其靶基因的检测 | 第57页 |
2.9 统计学分析 | 第57页 |
3 结果 | 第57-62页 |
3.1 ERα 及其靶基因在PC1细胞的表达 | 第57-58页 |
3.2 MPP对ERα 及其靶基因的影响 | 第58-59页 |
3.3 表达载体构建结果 | 第59页 |
3.4 PC1细胞中过表达MTA1对ERα 及其靶基因的影响 | 第59-60页 |
3.5 CA12在小鼠附睾组织的表达 | 第60页 |
3.6 Mta1KO小鼠中MTA1对ERα 介导的基因转录的影响 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
实验三 MTA1/ERa通路在输精管切除小鼠中的表达变化研究 | 第64-73页 |
1 材料 | 第64-65页 |
1.1 实验动物 | 第64页 |
1.2 实验试剂 | 第64页 |
1.3 实验仪器 | 第64-65页 |
2 方法 | 第65-67页 |
2.1 小鼠输精管切除手术 | 第65页 |
2.2 附睾管腔pH值检测 | 第65页 |
2.3 HE染色 | 第65-66页 |
2.4 实时荧光定量PCR | 第66-67页 |
2.5 Western blot检测 | 第67页 |
2.6 免疫荧光染色 | 第67页 |
2.7 统计学分析 | 第67页 |
3 结果 | 第67-72页 |
3.1 小鼠输精管切除模型的建立 | 第67-68页 |
3.2 输精管切除小鼠附睾形态的变化 | 第68-69页 |
3.3 输精管切除小鼠附睾管腔pH值的变化 | 第69-70页 |
3.4 输精管切除小鼠附睾尾部NHE3、CA12的表达变化 | 第70-72页 |
4 讨论 | 第72-73页 |
小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
个人简历和研究成果 | 第85-87页 |
致谢 | 第87页 |