| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 前言 | 第10-26页 |
| 1. Flightless-I蛋白 | 第10-16页 |
| 1.1 Flightless-I的发现 | 第10页 |
| 1.2 Flightless-I的结构 | 第10页 |
| 1.3 FliI的细胞定位与组织表达 | 第10-11页 |
| 1.4 FliI的生物学功能 | 第11-16页 |
| 1.4.1 FliI与胚胎发育 | 第11-12页 |
| 1.4.2 FliI与创口修复 | 第12页 |
| 1.4.3 FliI与核受体转录复合体 | 第12-14页 |
| 1.4.4 FliI与免疫应激 | 第14-15页 |
| 1.4.5 FliI与信号通路转导 | 第15页 |
| 1.4.6 FliI与核质转运 | 第15页 |
| 1.4.7 FliI与细胞自噬 | 第15页 |
| 1.4.8 FliI与癌症 | 第15-16页 |
| 2. 自噬 | 第16-25页 |
| 2.1 概述 | 第16页 |
| 2.2 自噬的类型 | 第16-18页 |
| 2.3 选择性自噬 | 第18-23页 |
| 2.3.1 选择性自噬途径 | 第19页 |
| 2.3.2 选择性自噬的类型 | 第19-20页 |
| 2.3.3 选择性自噬受体p62 | 第20-23页 |
| 2.3.4 LC3 | 第23页 |
| 2.4 自噬与癌症 | 第23-25页 |
| 2.4.1 自噬抑制肿瘤发生 | 第24页 |
| 2.4.2 自噬促进肿瘤发展 | 第24-25页 |
| 3. 本课题研究的目的、思路与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-43页 |
| 1. 实验材料 | 第26-28页 |
| 1.1 抗体与试剂 | 第26-27页 |
| 1.1.1 抗体 | 第26页 |
| 1.1.2 试剂 | 第26-27页 |
| 1.2 主要仪器 | 第27-28页 |
| 1.3 细胞株 | 第28页 |
| 1.4 质粒载体与菌株 | 第28页 |
| 1.5 临床样本 | 第28页 |
| 2. 实验方法 | 第28-43页 |
| 2.1 分子克隆实验 | 第29-32页 |
| 2.1.1 大肠杆菌感受态制备 | 第29页 |
| 2.1.2 质粒转化 | 第29-30页 |
| 2.1.3 质粒提取 | 第30-31页 |
| 2.1.4 质粒构建-LIC法 | 第31-32页 |
| 2.2 体外结合实验 | 第32-34页 |
| 2.2.1 体外小量提取蛋白 | 第32-33页 |
| 2.2.2 GST pull-down实验 | 第33-34页 |
| 2.2.3 考马斯亮蓝染色法 | 第34页 |
| 2.3 细胞实验 | 第34-40页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.3.2 细胞转染 | 第35-36页 |
| 2.3.3 蛋白提取与Western Blot | 第36-38页 |
| 2.3.4 Co-IP实验 | 第38页 |
| 2.3.5 硝酸银染色法 | 第38-39页 |
| 2.3.6 质谱分析 | 第39页 |
| 2.3.7 蛋白质氧化检测实验 | 第39-40页 |
| 2.4 临床样本免疫组化染色 | 第40-41页 |
| 2.5 统计学分析 | 第41-43页 |
| 第三章 结果与分析 | 第43-56页 |
| 3.1 选择性自噬受体p62蛋白的互作蛋白分析 | 第43-45页 |
| 3.1.1 p62的互作蛋白银染分析 | 第43-44页 |
| 3.1.2 体内p62与FliI的相互作用 | 第44页 |
| 3.1.3 体外p62与FliI的相互作用 | 第44-45页 |
| 3.2 FliI抑制选择性自噬 | 第45-49页 |
| 3.2.1 外源FliI对p62与LC3之间相互作用的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.2 内源FliI对p62与LC3之间相互作用的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.3 FliI对泛素化蛋白聚集体降解的影响 | 第47-49页 |
| 3.3 FliI新的生物学功能 | 第49-53页 |
| 3.3.1 FliI对胞内被氧化蛋白和DNA损伤水平的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.2 FliI影响被氧化蛋白以及DNA损伤的水平依赖于p62 | 第50-51页 |
| 3.3.3 FliI在乳腺癌临床样本中高表达 | 第51-53页 |
| 3.4 FliI在临床应用中的意义 | 第53-56页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
