| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 前言 | 第12-17页 |
| 1.1 肿瘤微环境 | 第12-13页 |
| 1.1.1 概述 | 第12页 |
| 1.1.2 细胞外基质蛋白 | 第12-13页 |
| 1.2 Mindin-F-spondin家族蛋白的研究 | 第13-14页 |
| 1.2.1 Mindin家族及其结构 | 第13页 |
| 1.2.2 Mindin在免疫系统的作用 | 第13页 |
| 1.2.3 Mindin在肿瘤中的作用 | 第13-14页 |
| 1.3 Egr-1的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3.1 Egr-1的结构特点及生物学功能 | 第14-15页 |
| 1.3.2 Egr-1对肿瘤的作用 | 第15页 |
| 1.4 肠癌的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4.1 结直肠癌的发病情况 | 第15-16页 |
| 1.4.2 肿瘤与血管生成 | 第16页 |
| 1.5 本课题研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.2 肠癌患者组织、血液标本 | 第17页 |
| 2.1.3 实验小鼠 | 第17页 |
| 2.1.4 质粒载体 | 第17页 |
| 2.1.5 试剂与药品 | 第17-19页 |
| 2.1.6 主要设备与仪器 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-36页 |
| 2.2.1 总RNA提取(Trizol法) | 第21-22页 |
| 2.2.2 逆转录RT-PCR | 第22页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 2.2.4 细胞培养 | 第23-25页 |
| 2.2.5 细胞转染法 | 第25页 |
| 2.2.6 构建Mindin过表达稳定细胞株 | 第25页 |
| 2.2.7 蛋白提取与Western blot | 第25-28页 |
| 2.2.8 血清蛋白含量检测 | 第28页 |
| 2.2.9 细胞的迁移能力检测 | 第28-29页 |
| 2.2.10 CCK-8细胞增殖能力检测 | 第29页 |
| 2.2.11 细胞集落能力检测 | 第29页 |
| 2.2.12 细胞的成管能力检测 | 第29-30页 |
| 2.2.13 双荧光素酶报告基因检测 | 第30页 |
| 2.2.14 染色体-蛋白免疫共沉淀-PCR(ChIp-RCP) | 第30-32页 |
| 2.2.15 凝胶迁移率实验(EMSA) | 第32-33页 |
| 2.2.16 HE染色 | 第33-34页 |
| 2.2.17 免疫组化 | 第34-35页 |
| 2.2.18 小鼠皮下成瘤 | 第35页 |
| 2.2.19 统计学分析 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-54页 |
| 3.1 结直肠癌患者血清Mindin的表达特征 | 第36-38页 |
| 3.1.1 结直肠癌患者血清Mindin表达量降低 | 第36-37页 |
| 3.1.2 血清Mindin表达量的下调在结直肠癌早期更为显著 | 第37-38页 |
| 3.1.3 结直肠癌患者Mindin表达水平与化疗的疗效相关 | 第38页 |
| 3.2 早期转录因子Egr-1调控Mindin的表达 | 第38-45页 |
| 3.2.1 Egr-1在转录水平直接调控Mindin的表达 | 第38-41页 |
| 3.2.2 Egr-1调控Mindin表达 | 第41-43页 |
| 3.2.3 在肠癌组织中Egr-1的低表达与Mindin的表达下调呈正相关 | 第43-45页 |
| 3.3 Mindin通过抑制血管生成从而抑制结直肠癌 | 第45-54页 |
| 3.3.1 Mindin并非通过直接抑制肠癌细胞的增殖而抑制肠癌 | 第45-46页 |
| 3.3.2 Mindin对Egr-1介导的抑制内皮细胞血管生成发挥重要作用 | 第46-49页 |
| 3.3.3 过表达Mindin可通过阻断血管生成从而抑制肿瘤的生长 | 第49-51页 |
| 3.3.4 Mindin在肠癌细胞中抑制HIF-1a和VEGFA的表达及内皮细胞中VEGFR-2的磷酸化 | 第51-54页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第54-58页 |
| 4.1 Egr-1的结构特点 | 第54页 |
| 4.2 Mindin在结直肠癌中的临床特点 | 第54-55页 |
| 4.3 Mindin在结直肠癌中调控机制的研究 | 第55-56页 |
| 4.4 Mindin作为细胞外基质蛋白对结直肠癌的生物学功能及作用机制 | 第56-57页 |
| 4.5 Mindin在结直肠癌的临床诊治的展望 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
