| 摘要 | 第2-3页 |
| abstract | 第3页 |
| 中英文缩写及英汉对照 | 第4-6页 |
| 1 前言 | 第6-11页 |
| 1.1 短体线虫的危害 | 第6页 |
| 1.2 咖啡短体线虫和卢斯短体线虫的经济重要性 | 第6-7页 |
| 1.3 分子检测技术在植物病原线虫中的应用 | 第7-10页 |
| 1.3.1 分子检测技术概述 | 第7页 |
| 1.3.2 常规PCR的靶序列 | 第7-9页 |
| 1.3.3 实时荧光定量PCR鉴定方法 | 第9页 |
| 1.3.4 双重PCR的分子鉴定方法 | 第9-10页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第10-11页 |
| 2 材料与方法 | 第11-17页 |
| 2.1 材料 | 第11-13页 |
| 2.1.1 供试种群和种群来源 | 第11页 |
| 2.1.2 种群的纯化和保存 | 第11页 |
| 2.1.3 主要设备和试剂 | 第11-13页 |
| 2.2 方法 | 第13-17页 |
| 2.2.1 线虫DNA模板的提取和验证 | 第13页 |
| 2.2.2 PCR 扩增产物的纯化、克隆与测序 | 第13-14页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR鉴定 | 第14-15页 |
| 2.2.4 利用双重PCR的检测 | 第15-17页 |
| 3 结果与分析 | 第17-26页 |
| 3.1 线虫DNA模板的提取和验证 | 第17页 |
| 3.2 实时荧光定量PCR鉴定 | 第17-22页 |
| 3.2.1 实时荧光定量PCR引物的优化 | 第17-20页 |
| 3.2.2 qPCR退火温度的优化 | 第20-21页 |
| 3.2.3 qPCR扩增结果 | 第21-22页 |
| 3.3 利用双重PCR的检测 | 第22-26页 |
| 3.3.1 双重PCR引物的优化 | 第22-24页 |
| 3.3.2 双重PCR的检测 | 第24-26页 |
| 4 结论与讨论 | 第26-29页 |
| 4.1 结论 | 第26页 |
| 4.2 讨论 | 第26-27页 |
| 4.2.1 咖啡短体线虫和卢斯短体线虫的qPCR检测结果 | 第26-27页 |
| 4.2.2 咖啡短体线虫和卢斯短体线虫的双重PCR检测 | 第27页 |
| 4.3 有待进一步研究的问题 | 第27-28页 |
| 4.4 本论文创新点 | 第28-29页 |
| 致谢 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |