| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 IHN的概况 | 第12-19页 |
| 1.1.1 IHN的流行与危害 | 第12-13页 |
| 1.1.2 IHNV的生物学特性 | 第13-16页 |
| 1.1.3 IHNV特异性免疫及相关机制的研究 | 第16-18页 |
| 1.1.4 IHNV G蛋白不同位点突变与其毒力的相关性研究 | 第18-19页 |
| 1.2 囊膜蛋白糖基化对病毒毒力及免疫原性的影响 | 第19-21页 |
| 1.2.1 糖基化对病毒毒力的影响 | 第19-20页 |
| 1.2.2 糖基化对病毒免疫原性的影响 | 第20-21页 |
| 1.2.3 糖基化与疾病治疗 | 第21页 |
| 1.3 本试验研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 病毒和细胞 | 第23页 |
| 2.1.2 抗体制剂 | 第23页 |
| 2.1.3 质粒与菌株 | 第23页 |
| 2.1.4 引物 | 第23-24页 |
| 2.1.5 酶类和主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.6 实验动物 | 第24-25页 |
| 2.1.7 主要仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-40页 |
| 2.2.1 G蛋白潜在糖基化位点的预测 | 第25页 |
| 2.2.2 重组病毒cDNA的构建 | 第25-33页 |
| 2.2.3 糖基化位点缺失的重组病毒的拯救 | 第33-34页 |
| 2.2.4 重组病毒的鉴定 | 第34-36页 |
| 2.2.5 重组病毒G蛋白糖基化分析 | 第36-37页 |
| 2.2.6 重组病毒的生物学特性研究 | 第37页 |
| 2.2.7 不同程度去糖基化的重组病毒致病性试验 | 第37-39页 |
| 2.2.8 重组病毒感染虹鳟血清中特异性抗体IgM测定 | 第39页 |
| 2.2.9 重组病毒对虹鳟的免疫保护性试验 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-62页 |
| 3.1 G蛋白潜在糖基化位点的预测结果 | 第40-41页 |
| 3.2 重组病毒cDNA的构建 | 第41-46页 |
| 3.2.1 单一位点突变的重组F2、F3片段的扩增PCR鉴定结果 | 第41-42页 |
| 3.2.2 多位点突变的重组F2、F3片段的扩增PCR鉴定结果 | 第42-43页 |
| 3.2.3 突变的重组F2、F3片段连接克隆载体的鉴定结果 | 第43-44页 |
| 3.2.4 重组中间载体的鉴定结果 | 第44-45页 |
| 3.2.5 重组真核表达质粒的鉴定结果 | 第45-46页 |
| 3.3 重组病毒的鉴定结果 | 第46-52页 |
| 3.3.1 重组病毒感染CHSE-214细胞CPE观察结果 | 第46-47页 |
| 3.3.2 重组病毒的RT-PCR鉴定结果 | 第47页 |
| 3.3.3 重组病毒的分子标识的鉴定结果 | 第47-50页 |
| 3.3.4 重组病毒粒子的电镜观察 | 第50-51页 |
| 3.3.5 重组病毒的间接免疫荧光检测结果 | 第51-52页 |
| 3.4 重组病毒G蛋白糖基化Western-blot分析结果 | 第52-53页 |
| 3.5 重组病毒的生物学特性研究 | 第53-55页 |
| 3.5.1 重组病毒的生长曲线 | 第53-54页 |
| 3.5.2 重组病毒的细胞嗜性 | 第54-55页 |
| 3.6 重组病毒的致病性试验 | 第55-59页 |
| 3.6.1 累积死亡率实验结果 | 第55-56页 |
| 3.6.2 重组病毒感染虹鳟组织病理变化观察 | 第56-58页 |
| 3.6.3 重组病毒在虹鳟组织中复制能力的比较分析结果 | 第58-59页 |
| 3.7 重组病毒感染虹鳟血清中特异性抗体IgM测定 | 第59-60页 |
| 3.8 重组病毒对虹鳟的免疫保护性试验 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-67页 |
| 4.1 不同位点突变的重组病毒构建与病毒的拯救 | 第62-63页 |
| 4.2 不同突变位点对病毒复制力的影响 | 第63-64页 |
| 4.3 不同突变位点对病毒免疫原性的影响 | 第64-65页 |
| 4.4 不同突变位点对病毒毒力的影响 | 第65-66页 |
| 4.5 总结 | 第66-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录A | 第78-96页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第96页 |
