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RNA结合蛋白QKI调控单核巨噬细胞极化及抗感染机制研究

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
前言第13-14页
文献回顾第14-28页
    巨噬细胞第14页
    巨噬细胞极化及功能第14-21页
    RNA结合蛋白QKI功能及作用第21-26页
    课题组前期相关工作第26-28页
第一部分:QKI表达参与巨噬细胞极化第28-38页
    1 材料第28-31页
        1.1 主要仪器与设备第28页
        1.2 主要试剂第28-29页
        1.3 部分试剂配制第29-30页
        1.4 使用引物序列第30页
        1.5 细胞和动物第30-31页
    2 方法第31-35页
        2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的提取第31页
        2.2 巨噬细胞极化模型的构建第31页
        2.3 QKI5干涉/过表达细胞模型的构建第31-32页
        2.4 免疫印迹法第32-33页
        2.5 RNA收集与cDNA反转录第33-34页
        2.6 Real-TimePCR第34页
        2.7 酶联免疫吸附试验(ELISA)第34-35页
        2.8 统计方法第35页
    3 结果第35-37页
        3.1 QKI表达水平与巨噬细胞极化相关第35-36页
        3.2 QKI表达水平影响巨噬细胞极化方向第36-37页
    4 讨论第37-38页
第二部分:QKI抑制M1巨噬细胞NF-κB相关通路第38-49页
    1 材料第38-41页
        1.1 主要仪器与设备第38页
        1.2 主要试剂第38-39页
        1.3 部分试剂配制第39-40页
        1.4 使用引物序列第40页
        1.5 细胞和动物第40-41页
    2 方法第41-43页
        2.1 免疫印迹法第41页
        2.2 酶联免疫吸附试验(ELISA)第41页
        2.3 免疫荧光法第41-42页
        2.4 RNA免疫共沉淀第42页
        2.5 染色质免疫沉淀第42页
        2.6 统计方法第42-43页
    3 结果第43-47页
        3.1 QKI5通过抑制NF-κB通路降低促炎细胞因子水平第43-44页
        3.2 QKI通过AHR抑制NF-κB转录活性及炎症小体的激活第44-47页
    4 讨论第47-49页
第三部分:单核巨噬细胞条件敲除QKI小鼠模型建立第49-53页
    1 材料第49-50页
        1.1 主要仪器与设备第49页
        1.2 主要试剂第49页
        1.3 部分试剂配制第49页
        1.4 使用引物序列第49-50页
        1.5 动物第50页
    2 方法第50-51页
        2.1 转基因小鼠的构建与繁殖第50页
        2.2 骨髓来源巨噬细胞的获取第50-51页
        2.3 统计方法第51页
    3 结果第51-52页
        3.1 髓系QKI条件敲除小鼠模型的建立第52页
    4 讨论第52-53页
第四部分:QKI在脓毒症模型中的作用第53-60页
    1 材料第53-54页
        1.1 主要仪器与设备第53页
        1.2 主要试剂第53-54页
        1.3 部分试剂配制第54页
        1.4 细胞和动物第54页
    2 方法第54-56页
        2.1 谷丙转氨酶(ALT)检测第54-55页
        2.2 流式细胞术(FCM)分析第55页
        2.3 小鼠内毒素模型的建立第55页
        2.4 小鼠内毒素模型中恢复QKI5模型的建立第55页
        2.5 统计方法第55-56页
    3 结果第56-59页
        3.1 转基因小鼠对脓毒症的易感性第56-57页
        3.2 恢复小鼠腹腔QKI水平在抗感染中的作用第57-59页
    4 讨论第59-60页
讨论第60-63页
小结第63-66页
参考文献第66-72页
个人简历和研究成果第72-74页
致谢第74页

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