摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第9-19页 |
1.1 甘蔗简介 | 第9-10页 |
1.2 植物中的单糖转运蛋白家族的研究 | 第10页 |
1.3 植物单糖转运蛋白的结构 | 第10-11页 |
1.4 单糖转运蛋白的性质 | 第11页 |
1.5 植物单糖转运蛋白的表达分析 | 第11-12页 |
1.6 植物单糖转运蛋白的生物学功能 | 第12-17页 |
1.6.1 参与植物的生长发育 | 第12-14页 |
1.6.2 参与花粉管的伸长及花粉的发育 | 第14页 |
1.6.3 参与韧皮部的卸载 | 第14-15页 |
1.6.4 参与非生物胁迫 | 第15-16页 |
1.6.5 参与植物-病原菌互作 | 第16-17页 |
1.7 本研究的目的意义、研究内容及技术路线 | 第17-19页 |
1.7.1 研究的目的意义 | 第17页 |
1.7.2 研究内容 | 第17-18页 |
1.7.3 技术路线 | 第18-19页 |
2 实验材料和方法 | 第19-35页 |
2.1 材料 | 第19-20页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第19页 |
2.1.3 药品试剂 | 第19页 |
2.1.4 仪器设备 | 第19页 |
2.1.5 培养基的配制 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-35页 |
2.2.1 甘蔗SAHXT1和ShHXT2基因的克隆 | 第20-23页 |
2.2.2 ShHXT1和ShHXT2基因生物信息学序列分析 | 第23页 |
2.2.3 ShHXT1和ShHXT2亚细胞定位 | 第23-25页 |
2.2.4 ShHXT1和ShHXT2单糖吸收功能鉴定 | 第25-28页 |
2.2.5 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因实时荧光定量PCR扩增分析 | 第28-29页 |
2.2.6 构建ShHXT2的植物表达载体 | 第29-30页 |
2.2.7 ShHXT2基因遗传转化烟草 | 第30-32页 |
2.2.8 ShHXT2基因遗传转化甘蔗 | 第32-35页 |
3 结果与分析 | 第35-54页 |
3.1 甘蔗不同组织总RNA的提取 | 第35页 |
3.2 甘蔗SAHXT1和ShHXT2的克隆 | 第35-41页 |
3.2.1 ShHXT1的克隆 | 第35页 |
3.2.2 甘蔗ShHXT1基因生物信息学分析 | 第35-37页 |
3.2.3 ShHXT1同源性分析及系统进化树构建 | 第37-38页 |
3.2.4 ShHXT2的克隆 | 第38页 |
3.2.5 甘蔗ShHXT2基因生物信息学分析 | 第38-40页 |
3.2.6 ShHXT2同源性分析及系统进化树构建 | 第40-41页 |
3.3 ShHXT1和ShHXT2亚细胞定位 | 第41-44页 |
3.3.1 GFP融合载体的构建 | 第41-43页 |
3.3.2 ShHXT1和ShHXT2在洋葱表皮中的亚细胞定位 | 第43-44页 |
3.4 ShHXT1和ShHXT2单糖吸收功能分析 | 第44-46页 |
3.4.1 酵母表达载体的构建 | 第44-45页 |
3.4.2 转化酵母酶切验证 | 第45-46页 |
3.4.3 酵母单糖吸收功能分析 | 第46页 |
3.5 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因的表达量分析 | 第46-48页 |
3.5.1 甘蔗ShHXT1和ShSHXT2基因在不同组织中的表达 | 第46-47页 |
3.5.2 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因在冷胁迫处理下的表达量分析 | 第47-48页 |
3.5.3 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因在不同病害下的表达量分析 | 第48页 |
3.6 构建植物表达载体 | 第48-49页 |
3.7 ShHXT2遗传转化烟草 | 第49-51页 |
3.7.1 获得转基因烟草植株 | 第49-50页 |
3.7.2 PCR检测转基因烟草苗 | 第50-51页 |
3.7.3 转基因烟草的冷胁迫处理 | 第51页 |
3.8 ShHXT2遗传转化甘蔗 | 第51-54页 |
3.8.1 获得转基因甘蔗植株 | 第51-52页 |
3.8.2 PPT抗性植株Bar基因PCR检测 | 第52页 |
3.8.3 PPT抗性植株Bar基因的试纸条检测 | 第52-53页 |
3.8.4 PPT抗性植株目的基因PCR检测 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
6 后续工作 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65页 |