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甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因克隆及功能分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 前言第9-19页
    1.1 甘蔗简介第9-10页
    1.2 植物中的单糖转运蛋白家族的研究第10页
    1.3 植物单糖转运蛋白的结构第10-11页
    1.4 单糖转运蛋白的性质第11页
    1.5 植物单糖转运蛋白的表达分析第11-12页
    1.6 植物单糖转运蛋白的生物学功能第12-17页
        1.6.1 参与植物的生长发育第12-14页
        1.6.2 参与花粉管的伸长及花粉的发育第14页
        1.6.3 参与韧皮部的卸载第14-15页
        1.6.4 参与非生物胁迫第15-16页
        1.6.5 参与植物-病原菌互作第16-17页
    1.7 本研究的目的意义、研究内容及技术路线第17-19页
        1.7.1 研究的目的意义第17页
        1.7.2 研究内容第17-18页
        1.7.3 技术路线第18-19页
2 实验材料和方法第19-35页
    2.1 材料第19-20页
        2.1.1 植物材料第19页
        2.1.2 菌株和载体第19页
        2.1.3 药品试剂第19页
        2.1.4 仪器设备第19页
        2.1.5 培养基的配制第19-20页
    2.2 实验方法第20-35页
        2.2.1 甘蔗SAHXT1和ShHXT2基因的克隆第20-23页
        2.2.2 ShHXT1和ShHXT2基因生物信息学序列分析第23页
        2.2.3 ShHXT1和ShHXT2亚细胞定位第23-25页
        2.2.4 ShHXT1和ShHXT2单糖吸收功能鉴定第25-28页
        2.2.5 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因实时荧光定量PCR扩增分析第28-29页
        2.2.6 构建ShHXT2的植物表达载体第29-30页
        2.2.7 ShHXT2基因遗传转化烟草第30-32页
        2.2.8 ShHXT2基因遗传转化甘蔗第32-35页
3 结果与分析第35-54页
    3.1 甘蔗不同组织总RNA的提取第35页
    3.2 甘蔗SAHXT1和ShHXT2的克隆第35-41页
        3.2.1 ShHXT1的克隆第35页
        3.2.2 甘蔗ShHXT1基因生物信息学分析第35-37页
        3.2.3 ShHXT1同源性分析及系统进化树构建第37-38页
        3.2.4 ShHXT2的克隆第38页
        3.2.5 甘蔗ShHXT2基因生物信息学分析第38-40页
        3.2.6 ShHXT2同源性分析及系统进化树构建第40-41页
    3.3 ShHXT1和ShHXT2亚细胞定位第41-44页
        3.3.1 GFP融合载体的构建第41-43页
        3.3.2 ShHXT1和ShHXT2在洋葱表皮中的亚细胞定位第43-44页
    3.4 ShHXT1和ShHXT2单糖吸收功能分析第44-46页
        3.4.1 酵母表达载体的构建第44-45页
        3.4.2 转化酵母酶切验证第45-46页
        3.4.3 酵母单糖吸收功能分析第46页
    3.5 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因的表达量分析第46-48页
        3.5.1 甘蔗ShHXT1和ShSHXT2基因在不同组织中的表达第46-47页
        3.5.2 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因在冷胁迫处理下的表达量分析第47-48页
        3.5.3 甘蔗ShHXT1和ShHXT2基因在不同病害下的表达量分析第48页
    3.6 构建植物表达载体第48-49页
    3.7 ShHXT2遗传转化烟草第49-51页
        3.7.1 获得转基因烟草植株第49-50页
        3.7.2 PCR检测转基因烟草苗第50-51页
        3.7.3 转基因烟草的冷胁迫处理第51页
    3.8 ShHXT2遗传转化甘蔗第51-54页
        3.8.1 获得转基因甘蔗植株第51-52页
        3.8.2 PPT抗性植株Bar基因PCR检测第52页
        3.8.3 PPT抗性植株Bar基因的试纸条检测第52-53页
        3.8.4 PPT抗性植株目的基因PCR检测第53-54页
4 讨论第54-56页
5 结论第56-57页
6 后续工作第57-58页
参考文献第58-65页
致谢第65页

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