| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 缩略表(Abbreviation) | 第15-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-39页 |
| 1.1 结核病的概述 | 第16-17页 |
| 1.1.1 结核病的流行及危害 | 第16-17页 |
| 1.1.2 结核病的类型 | 第17页 |
| 1.2 结核病的病原学 | 第17-22页 |
| 1.2.1 结核分枝杆菌 | 第17-19页 |
| 1.2.2 牛分枝杆菌 | 第19-21页 |
| 1.2.3 其他 | 第21-22页 |
| 1.3 结核病的诊断 | 第22-30页 |
| 1.3.1 影像学诊断 | 第22-23页 |
| 1.3.2 细菌学检测 | 第23-24页 |
| 1.3.3 分子生物学检测 | 第24-25页 |
| 1.3.4 免疫学检测 | 第25-30页 |
| 1.4 机体抗结核免疫 | 第30-33页 |
| 1.4.1 T细胞介导的免疫应答 | 第31-33页 |
| 1.4.2 B细胞介导的免疫反应 | 第33页 |
| 1.5 结核疫苗的研究进展 | 第33-35页 |
| 1.5.1 卡介苗免疫 | 第33-34页 |
| 1.5.2 结核疫苗在临床中的应用 | 第34-35页 |
| 1.6 生物膜研究进展 | 第35-38页 |
| 1.6.1 生物膜的形成 | 第35-36页 |
| 1.6.2 分枝杆菌生物膜 | 第36-37页 |
| 1.6.3 生物膜相关的疫苗 | 第37-38页 |
| 1.7 目的与意义 | 第38-39页 |
| 2 结核分枝杆菌RD区诊断标识的筛选及其应用 | 第39-83页 |
| 2.1 前言 | 第39页 |
| 2.2 实验材料 | 第39-45页 |
| 2.2.1 菌种与载体 | 第39-40页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第40-41页 |
| 2.2.3 培养基与抗生素配制 | 第41页 |
| 2.2.4 主要缓冲液与相关试剂配制 | 第41-44页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第44-45页 |
| 2.2.6 引物设计与合成 | 第45页 |
| 2.3 实验方法 | 第45-57页 |
| 2.3.1 重组质粒的构建 | 第45-49页 |
| 2.3.2 目的基因的原核表达与纯化 | 第49-52页 |
| 2.3.3 临床样本的收集 | 第52-54页 |
| 2.3.4 RD区蛋白的初步筛选 | 第54-55页 |
| 2.3.5 候选蛋白的复筛 | 第55页 |
| 2.3.6 潜在抗原反应原性的验证 | 第55-56页 |
| 2.3.7 统计学分析方法 | 第56-57页 |
| 2.4 结果与分析 | 第57-78页 |
| 2.4.1 RD区基因的克隆 | 第57页 |
| 2.4.2 重组质粒的构建 | 第57-60页 |
| 2.4.3 RD区基因的原核表达与纯化 | 第60-64页 |
| 2.4.4 临床样本的收集 | 第64-67页 |
| 2.4.5 蛋白的初步筛选 | 第67-70页 |
| 2.4.6 潜在蛋白在临床血清中的验证 | 第70-73页 |
| 2.4.7 Rv0222与Rv3403c蛋白的westernblotting分析 | 第73页 |
| 2.4.8 Rv0222与Rv3403c蛋白的敏感性与特异性分析 | 第73-77页 |
| 2.4.9 不同蛋白的联合诊断分析 | 第77-78页 |
| 2.5 讨论 | 第78-83页 |
| 2.5.1 RD区蛋白的表达与纯化 | 第78-79页 |
| 2.5.2 初筛所用标准血清的确定 | 第79-80页 |
| 2.5.3 潜在抗原的筛选 | 第80-81页 |
| 2.5.4 Rv0222与Rv3403c抗原的诊断特性 | 第81-82页 |
| 2.5.5 抗原联合的诊断特性 | 第82-83页 |
| 3.Rv0222与Rv3403c蛋白免疫原性的研究 | 第83-97页 |
| 3.1 前言 | 第83页 |
| 3.2 实验材料 | 第83-84页 |
| 3.2.1 菌株 | 第83页 |
| 3.2.2 主要材料、试剂及试剂盒 | 第83-84页 |
| 3.2.3 培养基的配制 | 第84页 |
| 3.2.4 主要缓冲液 | 第84页 |
| 3.2.5 实验动物 | 第84页 |
| 3.2.6 主要仪器 | 第84页 |
| 3.3 实验方法 | 第84-89页 |
| 3.3.1 对Rv0222与Rv3403c抗原T细胞表位进行预测 | 第84-85页 |
| 3.3.2 Rv0222与Rv3403c蛋白的表达、纯化 | 第85页 |
| 3.3.3 Rv0222与Rv3403c蛋白内毒素的去除 | 第85-86页 |
| 3.3.4 Rv0222与Rv3403c蛋白诱导小鼠的免疫反应 | 第86-89页 |
| 3.4 结果与分析 | 第89-94页 |
| 3.4.1 对Rv0222与Rv3403c抗原的T细胞表位进行预测 | 第89-90页 |
| 3.4.2 蛋白的表达纯化及内毒素的测定 | 第90页 |
| 3.4.3 蛋白引起的体液免疫反应 | 第90-92页 |
| 3.4.4 蛋白引起的细胞免疫的反应 | 第92-94页 |
| 3.5 讨论 | 第94-97页 |
| 3.5.1 T细胞表位的预测 | 第94-95页 |
| 3.5.2 蛋白内毒素的去除 | 第95页 |
| 3.5.3 蛋白诱导的免疫反应 | 第95-97页 |
| 4 卡介苗突变体库的构建及其在生物膜相关基因筛选中的初步应用 | 第97-109页 |
| 4.1 前言 | 第97页 |
| 4.2 实验材料 | 第97-100页 |
| 4.2.1 菌株与细胞 | 第97-98页 |
| 4.2.2 主要材料与试剂 | 第98页 |
| 4.2.3 培养基及抗生素的配制 | 第98页 |
| 4.2.4 其他缓冲液的配置 | 第98-99页 |
| 4.2.5 主要仪器 | 第99页 |
| 4.2.6 引物的设计与合成 | 第99-100页 |
| 4.3 实验方法 | 第100-104页 |
| 4.3.1 卡介苗的随机插入突变体库的构建 | 第100-104页 |
| 4.3.2 成膜突变株的筛选 | 第104页 |
| 4.4 结果与分析 | 第104-107页 |
| 4.4.1 BCG随机突变体库的构建 | 第104-107页 |
| 4.4.2 BCG突变体成膜能力的初步筛选 | 第107页 |
| 4.5 讨论 | 第107-109页 |
| 结论 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-128页 |
| 附录 | 第128-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 发表文章 | 第138-139页 |
