| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-21页 |
| 1.1 黑色素瘤的概述 | 第13-14页 |
| 1.2 肿瘤与免疫系统 | 第14-15页 |
| 1.2.1 NK细胞 | 第14-15页 |
| 1.2.2 CD8+T细胞 | 第15页 |
| 1.3 化疗药物——环磷酰胺 | 第15-16页 |
| 1.4 真菌多糖的免疫活性研究现状 | 第16-18页 |
| 1.4.1 免疫调节功能 | 第16页 |
| 1.4.2 抗氧化能力 | 第16-17页 |
| 1.4.3 降血糖血脂 | 第17-18页 |
| 1.4.4 抗肿瘤作用 | 第18页 |
| 1.5 黑木耳多糖免疫活性研究现状 | 第18-19页 |
| 1.6 本课题的研究意义 | 第19页 |
| 1.7 本文研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 黑木耳多糖的急性毒理学研究 | 第21-26页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.2.2 黑木耳多糖 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.3.1 黑木耳多糖的急性毒理试验 | 第21-22页 |
| 2.4 实验结果 | 第22-24页 |
| 2.4.1 LD50的测定结果 | 第22页 |
| 2.4.2 对小鼠体重、精神状态、运动、食欲情况的影响 | 第22-23页 |
| 2.4.3 对小鼠血细胞数量的影响 | 第23-24页 |
| 2.5 讨论 | 第24页 |
| 2.6 本章小结 | 第24-26页 |
| 第三章 黑木耳多糖对黑色素瘤小鼠抗肿瘤作用 | 第26-41页 |
| 3.1 前言 | 第26页 |
| 3.2 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第26页 |
| 3.2.2 小鼠移植瘤细胞株 | 第26页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第27页 |
| 3.2.5 主要试剂的配制 | 第27页 |
| 3.3 实验方法 | 第27-32页 |
| 3.3.1 小鼠B16黑色素瘤细胞的培养 | 第28页 |
| 3.3.1.1 B16细胞的复苏 | 第28页 |
| 3.3.1.2 B16细胞的传代 | 第28页 |
| 3.3.1.3 细胞的冻存 | 第28页 |
| 3.3.2 黑色素瘤小鼠模型的构建 | 第28-29页 |
| 3.3.3 动物的分组及给药 | 第29页 |
| 3.3.4 动物的宰杀及处理 | 第29页 |
| 3.3.5 RT-PCR检测肿瘤组织中相关基因的测定 | 第29-31页 |
| 3.3.6 肿瘤组织免疫荧光 | 第31-32页 |
| 3.3.7 数据统计 | 第32页 |
| 3.4 实验结果 | 第32-38页 |
| 3.4.1 小鼠体重变化 | 第32-33页 |
| 3.4.2 黑木耳多糖对肿瘤的影响 | 第33-34页 |
| 3.4.3 黑木耳多糖对黑色素瘤小鼠生存时间的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.4 黑木耳多糖对肿瘤相关凋亡基因表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.5 黑木耳多糖对肿瘤组织中细胞因子表达的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.6 免疫荧光法检测肿瘤组织中CD8~+T细胞的Perforin和GranzymeB的表达 | 第37-38页 |
| 3.5 讨论 | 第38-40页 |
| 3.6 本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 黑木耳多糖对黑色素瘤小鼠的免疫调节作用 | 第41-49页 |
| 4.1 前言 | 第41页 |
| 4.2 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第41页 |
| 4.2.2 小鼠移植瘤细胞株 | 第41页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 4.2.4 主要试剂 | 第42页 |
| 4.2.5 主要试剂的配制 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-44页 |
| 4.3.1 B16细胞的复苏、传代、冻存 | 第42页 |
| 4.3.2 动物模型建立及分组给药 | 第42页 |
| 4.3.3 动物处理及标本采集 | 第42-44页 |
| 4.3.3.1 对外周白细胞的影响 | 第42页 |
| 4.3.3.2 脾脏的处理 | 第42-43页 |
| 4.3.3.3 NK细胞活性的检测 | 第43页 |
| 4.3.3.4 CTL细胞毒活性的检测 | 第43-44页 |
| 4.3.3.5 流式细胞术检测Perforin、GranzymeB、IFN-g | 第44页 |
| 4.3.4 数据统计分析 | 第44页 |
| 4.4 实验结果 | 第44-47页 |
| 4.4.1 小鼠外周白细胞的检测 | 第44-45页 |
| 4.4.2 对黑色素瘤小鼠脾脏指数的影响 | 第45页 |
| 4.4.3 对黑色素瘤小鼠NK细胞和CTL细胞毒活性的检测 | 第45-46页 |
| 4.4.4 流式检测脾脏中CTL细胞和NK细胞的相关细胞因子 | 第46-47页 |
| 4.5 讨论 | 第47-48页 |
| 4.6 本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 黑木耳多糖对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖与凋亡的影响 | 第49-58页 |
| 5.1 前言 | 第49页 |
| 5.2 实验材料 | 第49-50页 |
| 5.2.1 细胞株 | 第49页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第49页 |
| 5.2.3 主要仪器 | 第49-50页 |
| 5.2.4 主要溶液配制 | 第50页 |
| 5.3 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.3.1 细胞的复苏、传代、冻存 | 第50页 |
| 5.3.2 B16细胞形态观测 | 第50页 |
| 5.3.3 细胞划痕实验 | 第50-51页 |
| 5.3.4 MTT法检测黑木耳多糖对B16细胞增殖影响 | 第51页 |
| 5.3.5 AnnexinV-FITC/PI标记法检测黑木耳多糖对B16细胞凋亡率的影响 | 第51页 |
| 5.3.6 数据分析 | 第51页 |
| 5.4 实验结果 | 第51-56页 |
| 5.4.1 黑木耳多糖对B16细胞形态的影响 | 第51-52页 |
| 5.4.2 多糖对细胞划痕的影响 | 第52-54页 |
| 5.4.3 MTT 法检测多糖对 B16 细胞增殖的抑制作用 | 第54-55页 |
| 5.4.4 流式细胞仪检测多糖对 B16 细胞的凋亡情况 | 第55-56页 |
| 5.5 讨论 | 第56-57页 |
| 5.6 本章小结 | 第57-58页 |
| 第六章 结论与展望 | 第58-59页 |
| 6.1 全文总结 | 第58页 |
| 6.2 研究展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录一 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
