摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第10-21页 |
1.1 人巨细胞病毒概述 | 第10-12页 |
1.2 趋化因子简介 | 第12-15页 |
1.3 人巨细胞病毒的免疫逃避 | 第15-16页 |
1.4 人巨细胞病毒UL146基因的研究进展 | 第16-19页 |
1.5 本研究目的及意义 | 第19-20页 |
1.6 研究技术路线 | 第20-21页 |
第二章 实验材料与方法 | 第21-53页 |
2.1 实验材料 | 第21-30页 |
2.1.1 质粒、菌株、细胞、病毒及实验动物 | 第21页 |
2.1.2 实验仪器及设备 | 第21-22页 |
2.1.3 实验试剂及配制 | 第22-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-53页 |
2.2.1 重组质粒pET32a(+)-UL146的克隆构建 | 第30-37页 |
2.2.2 vCXCL-1重组蛋白的原核诱导表达 | 第37-42页 |
2.2.3 vCXCL-1重组蛋白的纯化 | 第42-44页 |
2.2.4 Anti-vCXCL-1多克隆抗体的制备及抗血清效价的测定 | 第44-47页 |
2.2.5 Anti-vCXCL-1多克隆抗体的鉴定 | 第47页 |
2.2.6 Anti-vCXCL-1多克隆抗体的应用 | 第47-53页 |
第三章 实验结果 | 第53-66页 |
3.1 重组质粒pET32a(+)-UL146克隆构建 | 第53-54页 |
3.2 vCXCL-1重组蛋白的原核诱导表达 | 第54-59页 |
3.2.1 大肠杆菌BL21(DE3)生长曲线的绘制 | 第54-55页 |
3.2.2 重组蛋白在不同温度下的诱导表达 | 第55-56页 |
3.2.3 重组蛋白在不同诱导剂浓度下的诱导表达 | 第56-57页 |
3.2.4 重组蛋白在不同诱导时间条件下的诱导表达 | 第57页 |
3.2.5 确定重组蛋白原核诱导表达形式 | 第57-59页 |
3.3 重组蛋白的镍柱亲和纯化 | 第59-60页 |
3.4 多克隆抗体的制备与鉴定 | 第60-61页 |
3.4.1 ELISA法测定多克隆抗体效价 | 第60页 |
3.4.2 Anti-vCXCL-1多克隆抗体的定性检测 | 第60-61页 |
3.5 Anti-vCXCL-1多克隆抗体的检测应用 | 第61-66页 |
3.5.1 RT-PCR检测UL146基因的表达 | 第61-63页 |
3.5.2 Anti-vCXCL-1多克隆抗体检测病毒蛋白vCXCL-1的表达 | 第63页 |
3.5.3 Anti-vCXCL-1多克隆抗体检测病毒蛋白vCXCL-1在HFF细胞中的亚定位 | 第63-66页 |
第四章 讨论 | 第66-69页 |
第五章 总结与展望 | 第69-70页 |
总结 | 第69页 |
展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
附录 | 第79-82页 |
附录1中英文缩略词表 | 第79-81页 |
附录2UL146基因序列 | 第81-82页 |
在校期间学术交流与发表的论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |