| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第12-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-28页 |
| 1.1 手性化合物及手性醇 | 第17-18页 |
| 1.1.1 手性化合物的应用 | 第17页 |
| 1.1.2 手性醇的制备 | 第17-18页 |
| 1.2 微生物细胞在生物催化手性醇合成中的应用 | 第18-21页 |
| 1.2.1 催化手性醇合成的微生物细胞的来源 | 第19-20页 |
| 1.2.2 微生物细胞的固定化 | 第20-21页 |
| 1.3 非传统介质体系中微生物细胞催化羰基化合物的不对称还原反应 | 第21-24页 |
| 1.3.1 有机溶剂单相体系 | 第21页 |
| 1.3.2 水/有机溶剂双相体系 | 第21-22页 |
| 1.3.3 含亲水性离子液体单相体系 | 第22-23页 |
| 1.3.4 水/离子液体双相体系 | 第23页 |
| 1.3.5 超临界流体反应体系 | 第23-24页 |
| 1.4 羰基还原酶简介 | 第24-26页 |
| 1.4.1 辅酶依赖性 | 第24-25页 |
| 1.4.2 立体选择性催化 | 第25页 |
| 1.4.3 羰基还原酶的底物特异性 | 第25-26页 |
| 1.5 本研究的主要内容及意义 | 第26-28页 |
| 1.5.1 研究的主要内容 | 第26-27页 |
| 1.5.2 研究的主要意义 | 第27-28页 |
| 第二章 培养基组成及培养条件对Acetobacter sp. CCTCC M209061 的生长及还原活性的影响 | 第28-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.1 菌种与培养基 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 2.2 主要实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.3.1 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的培养 | 第30页 |
| 2.3.2 单因素实验 | 第30-31页 |
| 2.3.3 响应面分析实验 | 第31页 |
| 2.3.4 培养基比较 | 第31页 |
| 2.3.5 生物量测定 | 第31-32页 |
| 2.3.6 残糖含量测定 | 第32页 |
| 2.3.7 还原活性检测 | 第32页 |
| 2.3.8 气相色谱分析 | 第32-33页 |
| 2.3.9 原子吸收光谱分析 | 第33页 |
| 2.3.10 产物立体选择性分析 | 第33页 |
| 2.3.11 反应初速度、产率和产物对映体纯度的确定 | 第33-34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-50页 |
| 2.4.1 单因素实验 | 第34-43页 |
| 2.4.2 响应面法优化 | 第43-48页 |
| 2.4.3 培养基比较 | 第48-49页 |
| 2.4.4 优化培养所得 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞立体选择性还原TMSBO | 第49-50页 |
| 2.5 本章小结 | 第50-52页 |
| 第三章 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的固定化 | 第52-74页 |
| 3.1 实验材料 | 第52页 |
| 3.1.1 菌种与培养基 | 第52页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第52页 |
| 3.2 主要实验仪器 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-56页 |
| 3.3.1 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的培养 | 第52-53页 |
| 3.3.2 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的固定化 | 第53-54页 |
| 3.3.3 固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的机械强度 | 第54页 |
| 3.3.4 固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的粒径 | 第54页 |
| 3.3.5 固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的还原活性 | 第54页 |
| 3.3.6 固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的稳定性 | 第54-55页 |
| 3.3.7 扫描电子显微镜观察 | 第55页 |
| 3.3.8 传质实验 | 第55页 |
| 3.3.9 气相色谱分析 | 第55页 |
| 3.3.10 数据处理方法 | 第55-56页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第56-73页 |
| 3.4.1 游离 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞批次催化 4'-氯苯乙酮不对称还原反应的研究 | 第56-57页 |
| 3.4.2 固定化材料的选择 | 第57-59页 |
| 3.4.3 复合固定化方法优化 | 第59-63页 |
| 3.4.4 固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的稳定性 | 第63-66页 |
| 3.4.5 固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞的批次重复实验 | 第66-67页 |
| 3.4.6 传质实验结果 | 第67-71页 |
| 3.4.7 扫描电子显微镜观察 | 第71-73页 |
| 3.5 本章小结 | 第73-74页 |
| 第四章 固定化 Acetobacter sp CCTCC M209061 细胞的应用 | 第74-102页 |
| 4.1 实验材料 | 第75-76页 |
| 4.1.1 菌种与培养基 | 第75页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第75-76页 |
| 4.2 主要实验仪器 | 第76页 |
| 4.3 实验方法 | 第76-81页 |
| 4.3.1 Acetobacter sp CCTCC M209061 细胞的培养 | 第76页 |
| 4.3.2 Acetobacter sp CCTCC M209061 细胞的固定化 | 第76页 |
| 4.3.3 缓冲液体系中固定化 Acetobacter sp CCTCC M209061 细胞催化 2-辛酮不对称还原反应的研究 | 第76-78页 |
| 4.3.4 含离子液体缓冲液体系中固定化 Acetobacter sp CCTCC M209061 细胞催化 2-辛酮不对称还原反应的研究 | 第78-79页 |
| 4.3.5 含[C4MIM]·Ac 缓冲液/有机溶剂双相体系中固定化 Acetobacter sp CCTCC M209061 细胞催化 2-辛酮不对称还原反应的研究 | 第79-80页 |
| 4.3.6 气相色谱分析 | 第80-81页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第81-100页 |
| 4.4.1 缓冲液体系中固定化 Acetobacter sp CCTCC M209061 细胞催化 2-辛酮不对称还原反应的研究 | 第81-90页 |
| 4.4.2 含离子液体缓冲液体系中固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞催化 2-辛酮不对称还原反应的研究 | 第90-95页 |
| 4.4.3 含[C4MIM]·Ac 缓冲液/有机溶剂双相体系中固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞催化 2-辛酮不对称还原反应的研究 | 第95-99页 |
| 4.4.4 固定化 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞在不同反应体系中催化 2-辛酮不对称还原反应的比较 | 第99-100页 |
| 4.5 本章小结 | 第100-102页 |
| 第五章 Acetobacter sp. CCTCC M209061 细胞中反-Prelog 羰基还原酶的分离纯化和酶学性质研究 | 第102-132页 |
| 5.1 实验材料 | 第102-103页 |
| 5.1.1 菌种与培养基 | 第102页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第102-103页 |
| 5.2 主要实验仪器 | 第103页 |
| 5.3 实验方法 | 第103-109页 |
| 5.3.1 羰基还原酶 AcCR 的分离纯化 | 第103-104页 |
| 5.3.2 羰基还原酶 AcCR 的分子量测定 | 第104-105页 |
| 5.3.3 酶活及蛋白含量的测定 | 第105-106页 |
| 5.3.4 AcCR 的最适反应温度及热稳定性 | 第106页 |
| 5.3.5 AcCR 的最适反应 pH 值及 pH 稳定性 | 第106页 |
| 5.3.6 不同试剂对 AcCR 催化活性的影响 | 第106页 |
| 5.3.7 AcCR 的底物特异性 | 第106-107页 |
| 5.3.8 AcCR 催化 4'-氯苯乙酮还原反应和异丙醇氧化反应的动力学参数测定 .. | 第107页 |
| 5.3.9 辅酶供给方式对 AcCR 还原活性的影响 | 第107-109页 |
| 5.3.10 气相色谱分析 | 第109页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第109-130页 |
| 5.4.1 超声破碎时间对酶活的影响 | 第109-110页 |
| 5.4.2 羰基还原酶在细胞内的定位及其辅酶依赖性 | 第110-111页 |
| 5.4.3 细胞培养时间对羰基还原酶活性及贮藏稳定性的影响 | 第111页 |
| 5.4.4 硫酸铵沉淀 | 第111-112页 |
| 5.4.5 DEAE-Sepharose 阴离子交换层析 | 第112-113页 |
| 5.4.6 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第113-114页 |
| 5.4.7 羰基还原酶的纯化结果 | 第114页 |
| 5.4.8 酶蛋白分子量的确定 | 第114-115页 |
| 5.4.9 AcCR 催化反应的可逆性及辅酶依赖性 | 第115-116页 |
| 5.4.10 AcCR 的最适催化温度及热稳定性 | 第116-118页 |
| 5.4.11 AcCR 催化反应的最适 pH 及 pH 稳定性 | 第118-120页 |
| 5.4.12 AcCR 的贮藏稳定性 | 第120-121页 |
| 5.4.13 化学试剂对 AcCR 催化活性的影响 | 第121-123页 |
| 5.4.14 AcCR 的底物选择性 | 第123页 |
| 5.4.15 AcCR 的动力学性质 | 第123-128页 |
| 5.4.16 辅酶供给方式对 AcCR 还原活性的影响 | 第128-130页 |
| 5.5 本章小结 | 第130-132页 |
| 结论和展望 | 第132-136页 |
| 参考文献 | 第136-151页 |
| 附录一 GC 色谱图 | 第151-158页 |
| 附录二 缩写 | 第158-160页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第160-162页 |
| 致谢 | 第162-163页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第163页 |
