缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第14-15页 |
文献回顾 | 第15-31页 |
第一部分Mi R-200a在肝癌组织中的表达及其与临床病理的关系 | 第31-42页 |
1 材料 | 第31-33页 |
1.1 实验标本 | 第31页 |
1.2 实验细胞 | 第31页 |
1.3 实验试剂: | 第31-32页 |
1.4 主要仪器 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-35页 |
2.1 细胞培养及传代 | 第33页 |
2.2 Real-time PCR定量 | 第33-34页 |
2.3 免疫组化染色 | 第34页 |
2.4 统计学方法 | 第34-35页 |
3 结果 | 第35-39页 |
3.1 Mi R-200a在肝癌组织及细胞系中的表达 | 第35页 |
3.2 Mi R-200a与肝癌患者临床病理的关系 | 第35-37页 |
3.3 Mi R-200a与侵袭转移和预后的关系 | 第37-38页 |
3.4 肝癌组织中mi R-200a与ZEB/EMT的关系 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
第二部分Mi R-200a对肝癌SP细胞恶性表型的影响 | 第42-58页 |
1 材料 | 第42-44页 |
1.1 实验裸鼠 | 第42页 |
1.2 实验细胞 | 第42页 |
1.3 实验试剂: | 第42-43页 |
1.4 主要仪器 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-47页 |
2.1 SP细胞培养 | 第44页 |
2.2 SP细胞分选 | 第44-45页 |
2.3 克隆球形成实验 | 第45-46页 |
2.4 Transwell实验实验 | 第46-47页 |
2.5 细胞骨架染色 | 第47页 |
2.6 统计学方法 | 第47页 |
3 结果 | 第47-56页 |
3.1 肝癌细胞系中SP细胞的分选 | 第47-48页 |
3.2 SP细胞中干性标志物的检测 | 第48-49页 |
3.3 亚群细胞的形态学观察 | 第49-50页 |
3.4 SP细胞和非SP细胞间克隆球形成能力的比较 | 第50页 |
3.5 SP细胞的迁移、侵袭能力的检测 | 第50-51页 |
3.6 Mi R-200a的表达对SP细胞间粘附分子的影响 | 第51-52页 |
3.7 干扰mi R-200a的表达对SP细胞侵袭转移能力的影响 | 第52-53页 |
3.8 体内实验验证mi R-200a调控SP细胞的侵袭转移 | 第53-55页 |
3.9 体内实验验证mi R-200a与ZEB2/EMT的关系 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
第三部分ZEB2拮抗mi R-200a对肝癌SP细胞恶性表型的影响 | 第58-67页 |
1 材料 | 第58-59页 |
1.1 实验细胞 | 第58页 |
1.2 实验材料 | 第58-59页 |
1.3 主要仪器 | 第59页 |
2 方法 | 第59-61页 |
2.1 Western-blot实验 | 第59-60页 |
2.2 Transwell实验实验 | 第60-61页 |
2.3 统计学方法 | 第61页 |
3 结果 | 第61-65页 |
3.1 荧光素基因报告实验验证mi R-200a与ZEB2结合靶点 | 第61-62页 |
3.2 SP细胞中mi R-200a/ZEB通路基因水平验证 | 第62-63页 |
3.3 Mi R-200a/ZEB2/EMT通路验证 | 第63-65页 |
3.4 Mi R-200a通过ZEB2干扰SP细胞的迁移和侵袭 | 第65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
小结 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
个人简历和研究成果 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-80页 |