| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第1章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 α-地中海贫血 | 第12-16页 |
| 1.2 α-珠蛋白基因簇调控元件 | 第16-17页 |
| 1.3 HbH病与Hb Bart's胎儿水肿综合征发病机制 | 第17-19页 |
| 第2章 实验材料 | 第19-27页 |
| 2.1 主要实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 分析软件和数据库 | 第20页 |
| 2.3 试剂耗材 | 第20-25页 |
| 2.3.1 外周血基因组DNA提取试剂 | 第20-22页 |
| 2.3.2 地贫检测试剂盒 | 第22-23页 |
| 2.3.3 MLPA试剂 | 第23页 |
| 2.3.4 PCR试剂 | 第23-24页 |
| 2.3.5 电泳试剂 | 第24页 |
| 2.3.6 TA克隆试剂 | 第24-25页 |
| 2.3.7 耗材 | 第25页 |
| 2.4 家系来源 | 第25-27页 |
| 第3章 实验方法 | 第27-52页 |
| 3.1 基本技术路线图 | 第27-28页 |
| 3.2 样本采集及运输 | 第28-29页 |
| 3.3 血液学表型分析 | 第29-30页 |
| 3.3.1 血液学常规分析 | 第29页 |
| 3.3.2 血红蛋白成分分析 | 第29-30页 |
| 3.4 外周血基因组DNA提取 | 第30-31页 |
| 3.4.1 酚/氯仿方法抽提外周血基因组DNA | 第30-31页 |
| 3.5 HBA和HBB突变分析 | 第31-42页 |
| 3.5.1 α-地贫缺失型突变分析(-α~(3.7)/,-α~(4.2)/和--~(SEA)/缺失型) | 第31-33页 |
| 3.5.2 RDB分析α和β地贫点突变 | 第33-35页 |
| 3.5.3 α珠蛋白基因测序分析 | 第35-36页 |
| 3.5.4 β珠蛋白基因测序分析 | 第36-37页 |
| 3.5.5 MLPA检测α-珠蛋白基因簇内基因大片段缺失与重复 | 第37-41页 |
| 3.5.6 NGS检测α-珠蛋白基因簇上的拷贝数变异 | 第41-42页 |
| 3.6 Gap-PCR及Sanger测序鉴定大片段缺失的断裂点 | 第42-52页 |
| 3.6.1 家系A断裂点引物、PCR反应、电泳鉴定及测序 | 第43-44页 |
| 3.6.2 家系B断裂点引物、PCR反应、电泳鉴定及测序 | 第44-48页 |
| 3.6.3 TA克隆鉴定大片段缺失断裂点位置 | 第48-52页 |
| 第4章 实验结果 | 第52-62页 |
| 4.1 血液学表型分析结果 | 第52-55页 |
| 4.1.1 家系A表型分析 | 第52-54页 |
| 4.1.2 家系B表型分析 | 第54-55页 |
| 4.2 DNA分析结果 | 第55-58页 |
| 4.2.1 三种α-地中海贫血缺失突变的Gap-PCR结果 | 第55-56页 |
| 4.2.2 α-和β-珠蛋白基因测序分析结果 | 第56页 |
| 4.2.3 MLPA检测α-珠蛋白基因簇CNVs结果 | 第56-57页 |
| 4.2.4 NGS检测α珠蛋白基因簇CNVs结果 | 第57-58页 |
| 4.3 普通PCR鉴定两个家系的大片段缺失的断裂点 | 第58-62页 |
| 4.3.1 Gap-PCR鉴定家系A的大片段缺失断裂点 | 第58-59页 |
| 4.3.2 Gap-PCR鉴定家系B的大片段缺失断裂点 | 第59-62页 |
| 第5章 分析与讨论 | 第62-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录 英文缩略词表总结 | 第72-74页 |
| 硕博攻读期间发表论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
