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口虾蛄卵黄蛋白原基因cDNA全长序列的克隆及表达分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 前言第7-14页
    1 口虾蛄第7-9页
        1.1 口虾蛄形态特征第7页
        1.2 口虾蛄繁殖特点第7页
        1.3 口虾蛄卵母细胞和卵巢发育分期研究第7-9页
    2 卵黄蛋白原的研究进展第9-12页
        2.1 卵黄蛋白与卵黄蛋白原第9页
        2.2 卵黄蛋白原的合成第9-10页
        2.3 卵黄蛋白原基因的结构第10页
        2.4 卵黄蛋白原的生物学功能第10-12页
            2.4.1 载体运输第11页
            2.4.2 免疫防御第11-12页
            2.4.3 雌激素标记物第12页
    3 荧光定量PCR方法第12-14页
        3.1 内标基因的选择第13页
        3.2 引物或探针的设计要求第13页
        3.3 数据统计分析方法第13-14页
第二章 口虾蛄卵黄蛋白原基因cDNA全长序列的克隆及表达分析第14-39页
    1 材料与方法第14-15页
        1.1 试验材料第14-15页
            1.1.1 试验虾第14页
            1.1.2 试剂和仪器第14-15页
    2 试验方法第15-26页
        2.1 总RNA的提取与纯化第15-16页
            2.1.1 实验用品的预处理第15页
            2.1.2 口虾蛄卵巢组织总RNA的提取第15-16页
            2.1.3 RNA纯度及浓度的检测第16页
        2.2 口虾蛄卵黄蛋白原基因的克隆第16-25页
            2.2.1 引物的设计与合成第16-17页
            2.2.2 口虾蛄卵黄蛋白原基因的 3’RACE扩增第17-19页
            2.2.3 口虾蛄卵黄蛋白原基因的 5’RACE扩增第19-22页
            2.2.4 口虾蛄卵黄蛋白原cDNA序列中间片段的扩增第22-24页
            2.2.5 克隆片段的序列验证第24-25页
        2.3 口虾蛄卵黄蛋白原基因在卵巢不同发育阶段的表达分析第25-26页
    3 试验结果第26-36页
        3.1 口虾蛄总RNA提取第26-27页
        3.2 3'RACE、5'RACE和中间片段克隆第27-30页
        3.3 Vg基因cDNA全长序列的生物学分析结果第30-33页
            3.3.1 等电点(pI)/分子量(Mw)的预测第30页
            3.3.2 信号肽预测结果第30页
            3.3.3 氨基酸疏水性分析结果第30-31页
            3.3.4 蛋白质跨膜区域预测结果第31-32页
            3.3.5 蛋白结构域预测结果第32-33页
            3.3.6 蛋白质二级结构的预测第33页
        3.4 多重序列比对及系统进化树构建第33-36页
        3.5 口虾蛄Vg基因表达分析第36页
    4 讨论第36-39页
        4.1 口虾蛄卵黄蛋白原基因cDNA序列特征第36-37页
        4.2 口虾蛄Vg系统进化第37页
        4.3 口虾蛄Vg基因的表达差异第37-39页
第三章 结论第39-40页
参考文献第40-45页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第45-48页
致谢第48页

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