摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 前言 | 第7-14页 |
1 口虾蛄 | 第7-9页 |
1.1 口虾蛄形态特征 | 第7页 |
1.2 口虾蛄繁殖特点 | 第7页 |
1.3 口虾蛄卵母细胞和卵巢发育分期研究 | 第7-9页 |
2 卵黄蛋白原的研究进展 | 第9-12页 |
2.1 卵黄蛋白与卵黄蛋白原 | 第9页 |
2.2 卵黄蛋白原的合成 | 第9-10页 |
2.3 卵黄蛋白原基因的结构 | 第10页 |
2.4 卵黄蛋白原的生物学功能 | 第10-12页 |
2.4.1 载体运输 | 第11页 |
2.4.2 免疫防御 | 第11-12页 |
2.4.3 雌激素标记物 | 第12页 |
3 荧光定量PCR方法 | 第12-14页 |
3.1 内标基因的选择 | 第13页 |
3.2 引物或探针的设计要求 | 第13页 |
3.3 数据统计分析方法 | 第13-14页 |
第二章 口虾蛄卵黄蛋白原基因cDNA全长序列的克隆及表达分析 | 第14-39页 |
1 材料与方法 | 第14-15页 |
1.1 试验材料 | 第14-15页 |
1.1.1 试验虾 | 第14页 |
1.1.2 试剂和仪器 | 第14-15页 |
2 试验方法 | 第15-26页 |
2.1 总RNA的提取与纯化 | 第15-16页 |
2.1.1 实验用品的预处理 | 第15页 |
2.1.2 口虾蛄卵巢组织总RNA的提取 | 第15-16页 |
2.1.3 RNA纯度及浓度的检测 | 第16页 |
2.2 口虾蛄卵黄蛋白原基因的克隆 | 第16-25页 |
2.2.1 引物的设计与合成 | 第16-17页 |
2.2.2 口虾蛄卵黄蛋白原基因的 3’RACE扩增 | 第17-19页 |
2.2.3 口虾蛄卵黄蛋白原基因的 5’RACE扩增 | 第19-22页 |
2.2.4 口虾蛄卵黄蛋白原cDNA序列中间片段的扩增 | 第22-24页 |
2.2.5 克隆片段的序列验证 | 第24-25页 |
2.3 口虾蛄卵黄蛋白原基因在卵巢不同发育阶段的表达分析 | 第25-26页 |
3 试验结果 | 第26-36页 |
3.1 口虾蛄总RNA提取 | 第26-27页 |
3.2 3'RACE、5'RACE和中间片段克隆 | 第27-30页 |
3.3 Vg基因cDNA全长序列的生物学分析结果 | 第30-33页 |
3.3.1 等电点(pI)/分子量(Mw)的预测 | 第30页 |
3.3.2 信号肽预测结果 | 第30页 |
3.3.3 氨基酸疏水性分析结果 | 第30-31页 |
3.3.4 蛋白质跨膜区域预测结果 | 第31-32页 |
3.3.5 蛋白结构域预测结果 | 第32-33页 |
3.3.6 蛋白质二级结构的预测 | 第33页 |
3.4 多重序列比对及系统进化树构建 | 第33-36页 |
3.5 口虾蛄Vg基因表达分析 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
4.1 口虾蛄卵黄蛋白原基因cDNA序列特征 | 第36-37页 |
4.2 口虾蛄Vg系统进化 | 第37页 |
4.3 口虾蛄Vg基因的表达差异 | 第37-39页 |
第三章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第45-48页 |
致谢 | 第48页 |