摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
中英文缩略词表 | 第10-11页 |
第1章 绪论 | 第11-18页 |
1.1 内皮素(ETs) | 第11-12页 |
1.2 钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN) | 第12-14页 |
1.3 活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFATs) | 第14-15页 |
1.4 ET1-CaN-NFATs | 第15-18页 |
第2章不同肿瘤细胞系中ET1 和NFATs的表达差异 | 第18-28页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 实验材料与方法 | 第18-26页 |
2.2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.2.2 不同肿瘤细胞细胞的复苏 | 第19-20页 |
2.2.3 细胞培养及传代 | 第20页 |
2.2.4 细胞冻存 | 第20页 |
2.2.5 细胞RNA的提取 | 第20页 |
2.2.6 RNA浓度测定及鉴定 | 第20-21页 |
2.2.7 PT-PCR实验 | 第21-23页 |
2.2.8 细胞中总蛋白的提取 | 第23页 |
2.2.9 核浆分离技术提取浆蛋白和核蛋白 | 第23页 |
2.2.10 蛋白浓度的测定 | 第23-24页 |
2.2.11 蛋白印迹法即Western Blot检测目的蛋白的表达 | 第24-26页 |
2.3 实验结果 | 第26-28页 |
2.3.1 不同肿瘤细胞中NFATs和ET1 在mRNA水平的表达 | 第26页 |
2.3.2 786O和HEK293 中NFATs在蛋白水平的表达和核浆分布 | 第26-28页 |
第3章 786O与HEK293 在细胞增殖和迁移方面的差异 | 第28-31页 |
3.1 引言 | 第28页 |
3.2 实验材料与方法 | 第28-29页 |
3.2.1 实验材料 | 第28页 |
3.2.2 细胞增殖实验 | 第28页 |
3.2.3 CCK8 实验 | 第28-29页 |
3.2.4 划痕实验 | 第29页 |
3.3 实验结果 | 第29-31页 |
3.3.1 细胞增殖差异 | 第29-30页 |
3.3.2786O细胞迁移能力大于HEK293 细胞 | 第30-31页 |
第4章 CsA阻断CaN通路对 786O细胞的影响 | 第31-37页 |
4.1 引言 | 第31页 |
4.2 材料与方法 | 第31-33页 |
4.2.1 实验材料 | 第31页 |
4.2.2 RT-PCR实验 | 第31页 |
4.2.3 Western-Blot技术检测CsA作用后NFATc3 在 786O胞核胞浆中的分布情况 | 第31-32页 |
4.2.4 CCK8 技术检测 | 第32页 |
4.2.5 软琼脂实验 | 第32页 |
4.2.6 细胞凋亡实验 | 第32-33页 |
4.3 实验结果 | 第33-37页 |
4.3.1 CsA对ET1 和NFATc3 在mRNA水平表达的影响 | 第33页 |
4.3.2 CsA对NFATc3 核浆分布的影响 | 第33-34页 |
4.3.3 CsA对 786O和HEK293 细胞增殖能力的影响 | 第34页 |
4.3.4 CsA对 786O细胞迁移能力的影响 | 第34-35页 |
4.3.5 CsA对 786O细胞侵袭能力的影响 | 第35-36页 |
4.3.6 CsA对 786O细胞凋亡情况的影响 | 第36-37页 |
第5章 讨论 | 第37-40页 |
第6章 全文总结 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
附录 | 第45-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
综述 | 第48-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |