| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 结肠癌的简介 | 第14页 |
| 1.2 肿瘤干细胞 | 第14-18页 |
| 1.2.1 肿瘤干细胞及生物学特性 | 第14页 |
| 1.2.2 肿瘤干细胞的分离 | 第14-15页 |
| 1.2.3 肿瘤干细胞的鉴定 | 第15页 |
| 1.2.4 肿瘤干细胞的治疗 | 第15-18页 |
| 1.3 阿托伐醌 | 第18-21页 |
| 1.3.1 阿托伐醌的结构与性质 | 第19页 |
| 1.3.2 阿托伐醌的药理机制 | 第19页 |
| 1.3.3 阿托伐醌的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.4 阿托伐醌临床前景 | 第21页 |
| 1.4 实验立题依据 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与试剂 | 第22-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第22页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 Real-timePCR所用引物 | 第24-25页 |
| 2.2 主要试剂配制 | 第25-28页 |
| 2.2.1 磷酸盐缓冲液(PBS)的配制(10×) | 第25页 |
| 2.2.2 0.25 %胰酶-EDTA混合液配制(10×) | 第25页 |
| 2.2.3 bFGF或EGF因子的配制 | 第25-26页 |
| 2.2.4 DMEM/F12培养液配制 | 第26页 |
| 2.2.5 磁珠分选所用Buffer的配制 | 第26-27页 |
| 2.2.6 磁珠分选用DNaseI的配制 | 第27页 |
| 2.2.7 ATO储备液的配制 | 第27-28页 |
| 第3章 实验方法 | 第28-38页 |
| 3.1 结肠癌干细胞的分离、培养及鉴定 | 第28-32页 |
| 3.1.1 免疫磁珠法筛选EpCAM~+CD44~+HCT-116干细胞 | 第28-29页 |
| 3.1.2 EpCAM~+CD44~+HCT-116细胞的培养 | 第29-30页 |
| 3.1.3 EpCAM~+CD44~+HCT-116细胞的鉴定 | 第30-32页 |
| 3.2 ATO对结肠癌细胞和结肠癌干细胞增殖的影响 | 第32-34页 |
| 3.2.1 ATO对结肠癌细胞HCT-116增殖的影响 | 第32-33页 |
| 3.2.2 ATO对结肠癌干细胞EpCAM~+CD44~+HCT-116增殖的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 ATO对结肠癌干细胞凋亡的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.1 AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡 | 第34页 |
| 3.3.2 线粒体膜电位检测(JC-1) | 第34-35页 |
| 3.3.3 Real-timePCR检测凋亡相关基因的表达 | 第35页 |
| 3.4 ATO对结肠癌干细胞侵袭能力的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.1 Tanswell小室检测细胞侵袭能力 | 第35-36页 |
| 3.4.2 Real-timePCR检测侵袭相关基因的表达 | 第36页 |
| 3.5 ATO对结肠癌干细胞周期的影响 | 第36-37页 |
| 3.6 统计学分析 | 第37-38页 |
| 第4章 实验结果 | 第38-50页 |
| 4.1 结肠癌干细胞的分离、培养及鉴定 | 第38-40页 |
| 4.1.1 EpCAM~+CD44~+HCT-116细胞的筛选 | 第38页 |
| 4.1.2 EpCAM~+CD44~+HCT-116细胞的培养 | 第38-39页 |
| 4.1.3 EpCAM~+CD44~+HCT-116细胞的鉴定 | 第39-40页 |
| 4.2 ATO对结肠癌细胞和结肠癌干细胞增殖的影响 | 第40-42页 |
| 4.2.1 ATO对结肠癌细胞HCT-116增殖的影响 | 第40-41页 |
| 4.2.2 ATO对结肠癌干细胞EpCAM~+CD44~+HCT-116增殖的影响 | 第41-42页 |
| 4.3 ATO对结肠癌干细胞凋亡的影响 | 第42-46页 |
| 4.3.1 AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第42-44页 |
| 4.3.2 线粒体膜电位法(JC-1)检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| 4.3.3 Real-timePCR检测凋亡相关基因的表达 | 第45-46页 |
| 4.4 ATO对结肠癌干细胞侵袭能力的影响 | 第46-48页 |
| 4.4.1 Tanswell小室检测细胞侵袭能力 | 第46-47页 |
| 4.4.2 Real-timePCR检测侵袭相关基因的表达 | 第47-48页 |
| 4.5 ATO对结肠癌干细胞周期的影响 | 第48-50页 |
| 第5章 讨论 | 第50-51页 |
| 第6章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 作者简介及攻读学位期间发表研究成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
