缩略语表 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
前言 | 第16-17页 |
文献回顾 | 第17-35页 |
1 干细胞对缺血性疾病治疗的研究 | 第17-20页 |
1.1 干细胞治疗概述 | 第17页 |
1.2 干细胞在治疗缺血性疾病方面的相关研究 | 第17-20页 |
1.2.1 骨骼肌成肌细胞 | 第17-18页 |
1.2.2 全能干细胞 | 第18页 |
1.2.3 外周血祖细胞 | 第18页 |
1.2.4 骨髓干细胞 | 第18页 |
1.2.5 内皮祖细胞 | 第18-19页 |
1.2.6 心脏原位干细胞 | 第19页 |
1.2.7 诱导性多能干细胞 | 第19页 |
1.2.8 间充质干细胞 | 第19-20页 |
1.3 干细胞治疗中存在的问题 | 第20页 |
2 自噬在组织缺血及干细胞存活增殖中的调控作用 | 第20-26页 |
2.1 自噬的概念及分类 | 第21-22页 |
2.2 自噬发生的过程 | 第22页 |
2.3 自噬的调控 | 第22-23页 |
2.4 自噬在缺血/再灌注损伤中的作用 | 第23-25页 |
2.5 自噬在干细胞治疗中的作用 | 第25页 |
2.6 小结 | 第25-26页 |
3 APELIN 促进干细胞存活以及缺血组织的损伤修复 | 第26-28页 |
3.1 概述 | 第26页 |
3.2 Apelin 对心血管系统的作用 | 第26-27页 |
3.2.1 Apelin 的正性肌力作用 | 第26页 |
3.2.2 Apelin 减少心衰引起的心肌重构作用 | 第26-27页 |
3.2.3 Apelin 降低血压作用 | 第27页 |
3.2.4 Apelin 的抗缺血再灌注损伤作用 | 第27页 |
3.3 Apelin 的细胞保护作用 | 第27页 |
3.4 Apelin 对自噬的影响 | 第27-28页 |
4 干细胞分子影像研究 | 第28-35页 |
4.1 概述 | 第28-29页 |
4.2 分子影像在干细胞研究中的应用 | 第29-35页 |
4.2.1 干细胞的 MRI 成像(磁性纳米颗粒标记与示踪) | 第29-31页 |
4.2.2 PET 和 SPECT 成像(放射性核素标记与示踪) | 第31页 |
4.2.3 干细胞的荧光成像 | 第31页 |
4.2.4 荧光分子断层成像(FMT) | 第31-32页 |
4.2.5 自发荧光断层分子影像(BLT) | 第32页 |
4.2.6 生物发光成像(bioluminescence imaging,BLI) | 第32页 |
4.2.7 干细胞的多模态成像 | 第32-33页 |
4.2.8 各种成像示踪技术的优缺点比较 | 第33页 |
4.2.9 对干细胞体内致瘤性及安全性的分子影像评价 | 第33-34页 |
4.2.10 分子影像学在研究干细胞移植免疫排斥反应方面的应用前景 | 第34-35页 |
第一部分 Apelin 对脂肪间充质干细胞在后肢缺血小鼠体内生存和功能的作用 | 第35-52页 |
1 材料 | 第35-36页 |
1.1 实验动物 | 第35页 |
1.2 主要实验仪器 | 第35页 |
1.3 主要实验试剂 | 第35-36页 |
2 方法 | 第36-39页 |
2.1 脂肪间充质干细胞分离培养与鉴定 | 第36页 |
2.2 建立后肢缺血动物模型 | 第36页 |
2.3 实验分组 | 第36页 |
2.4 ADMSCs 细胞移植 | 第36-37页 |
2.5 激光多普勒扫描检测后肢缺血模型血流 | 第37页 |
2.6 生物发光成像检测细胞存活 | 第37页 |
2.7 荧光素酶活性检测细胞活性 | 第37页 |
2.8 组织学观察细胞在组织内存活 | 第37页 |
2.9 免疫组织化学染色检测新生血管生成 | 第37-38页 |
2.10 自截肢率评价缺血程度 | 第38页 |
2.11 缺血损伤评分评价缺血损伤改善 | 第38页 |
2.12 活动损伤评分评价患肢功能改善 | 第38页 |
2.13 统计学分析 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-48页 |
3.1 激光多普勒成像检测后肢血流恢复 | 第39-40页 |
3.2 免疫组织化学染色检测组织内新生血管生成 | 第40-41页 |
3.3 自截肢率统计检测患肢功能恢复 | 第41-42页 |
3.4 活动损伤评分评估患肢功能恢复 | 第42-43页 |
3.5 缺血损伤评分评估患肢功能恢复 | 第43-44页 |
3.6 生物发光成像检测 ADMSCs 在体内生存 | 第44-45页 |
3.7 荧光素酶活性检测 ADMSCs 在体内生存 | 第45-46页 |
3.8 组织学检测 ADMSCs 在缺血部位存活 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
第二部分 Apelin 通过调节自噬促进缺氧复氧损伤下脂肪间充质干细胞的生存和功能 | 第52-75页 |
1 材料 | 第52-53页 |
1.1 实验动物 | 第52页 |
1.2 主要实验仪器 | 第52页 |
1.3 主要实验试剂 | 第52-53页 |
2 方法 | 第53-58页 |
2.1 脂肪间充质干细胞分离培养与鉴定 | 第53页 |
2.2 建立缺氧复氧模型 | 第53页 |
2.3 实验分组 | 第53-54页 |
2.4. MTT 法检测细胞增殖能力 | 第54页 |
2.5 生物发光成像检测细胞增殖能力 | 第54页 |
2.6 TUNEL 法检测细胞凋亡 | 第54页 |
2.7 免疫荧光染色检测自噬小体生成 | 第54-55页 |
2.8 透射电子显微镜检测自噬小体生成 | 第55页 |
2.9 建立后肢缺血动物模型 | 第55页 |
2.10 激光多普勒扫描检测后肢缺血模型血流 | 第55页 |
2.11 生物发光成像检测 ADMSCs 生存 | 第55-56页 |
2.12 荧光素酶活性检测 ADMSCs 生存 | 第56页 |
2.13 免疫组织化学染色检测新生血管生成 | 第56页 |
2.14 自截肢率评价缺血程度 | 第56页 |
2.15 缺血损伤评分评价缺血损伤改善 | 第56-57页 |
2.16 活动损伤评分评价患肢功能改善 | 第57页 |
2.17 统计学分析 | 第57-58页 |
3 结果 | 第58-70页 |
3.1 MTT 法评估 Apelin 促进缺氧复氧干预下 ADMSCs 的增殖 | 第58页 |
3.2 生物发光成像评估 Apelin 促进缺氧复氧干预下 ADMSCs 的增殖 | 第58-59页 |
3.3 TUNEL 法检测 Apelin 对缺氧复氧干预下 ADMSCs 凋亡的影响 | 第59-61页 |
3.4 免疫荧光染色检测自噬小体中 LC3Ⅱ表达 | 第61-62页 |
3.5 透射电子显微镜检测自噬小体生成 | 第62-64页 |
3.6 生物发光成像检测 ADMSCs 在体内生存 | 第64-65页 |
3.7 荧光素酶检测 ADMSCs 在体内生存 | 第65页 |
3.8 激光多普勒成像检测后肢血流改善 | 第65-66页 |
3.9 免疫组织化学染色检测组织内新生血管生成 | 第66-68页 |
3.10 自截肢率统计检测患肢功能恢复 | 第68页 |
3.11 活动损伤评分检测患肢功能恢复 | 第68-69页 |
3.12 缺血损伤评分检测患肢功能恢复 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-75页 |
第三部分 Apelin 通过调节自噬 AMPK-mTOR-ULK1 与 Akt-Bcl2-beclin1 通路促进脂肪间充质干细胞生存的分子机制 | 第75-89页 |
1 材料 | 第75-76页 |
1.1 实验细胞 | 第75页 |
1.2 主要实验仪器 | 第75页 |
1.3 主要实验试剂 | 第75-76页 |
2 方法 | 第76-78页 |
2.1 建立缺氧复氧细胞模型 | 第76页 |
2.2 实验分组 | 第76页 |
2.3 Westernblot 检测 | 第76-77页 |
2.4 统计学分析 | 第77-78页 |
3 结果 | 第78-85页 |
3.1 Western blot 法检测缺氧与缺氧复氧损伤阶段自噬信号通路蛋白的表达 | 第78-80页 |
3.2 Western blot 法检测 Apelin 对缺氧与缺氧复氧损伤阶段自噬信号通路蛋白的表达的影响 | 第80-83页 |
3.3 Western blot 法检测分别阻断 AMPK 和 Akt 后 Apelin 缺氧与缺氧复氧损伤阶段自噬信号通路蛋白的表达 | 第83-85页 |
4 讨论 | 第85-89页 |
小结 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-101页 |
个人简历和研究成果 | 第101-103页 |
致谢 | 第103页 |