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Apelin通过调节自噬促进脂肪间充质干细胞生存和功能的机制研究

缩略语表第8-10页
中文摘要第10-13页
Abstract第13-15页
前言第16-17页
文献回顾第17-35页
    1 干细胞对缺血性疾病治疗的研究第17-20页
        1.1 干细胞治疗概述第17页
        1.2 干细胞在治疗缺血性疾病方面的相关研究第17-20页
            1.2.1 骨骼肌成肌细胞第17-18页
            1.2.2 全能干细胞第18页
            1.2.3 外周血祖细胞第18页
            1.2.4 骨髓干细胞第18页
            1.2.5 内皮祖细胞第18-19页
            1.2.6 心脏原位干细胞第19页
            1.2.7 诱导性多能干细胞第19页
            1.2.8 间充质干细胞第19-20页
        1.3 干细胞治疗中存在的问题第20页
    2 自噬在组织缺血及干细胞存活增殖中的调控作用第20-26页
        2.1 自噬的概念及分类第21-22页
        2.2 自噬发生的过程第22页
        2.3 自噬的调控第22-23页
        2.4 自噬在缺血/再灌注损伤中的作用第23-25页
        2.5 自噬在干细胞治疗中的作用第25页
        2.6 小结第25-26页
    3 APELIN 促进干细胞存活以及缺血组织的损伤修复第26-28页
        3.1 概述第26页
        3.2 Apelin 对心血管系统的作用第26-27页
            3.2.1 Apelin 的正性肌力作用第26页
            3.2.2 Apelin 减少心衰引起的心肌重构作用第26-27页
            3.2.3 Apelin 降低血压作用第27页
            3.2.4 Apelin 的抗缺血再灌注损伤作用第27页
        3.3 Apelin 的细胞保护作用第27页
        3.4 Apelin 对自噬的影响第27-28页
    4 干细胞分子影像研究第28-35页
        4.1 概述第28-29页
        4.2 分子影像在干细胞研究中的应用第29-35页
            4.2.1 干细胞的 MRI 成像(磁性纳米颗粒标记与示踪)第29-31页
            4.2.2 PET 和 SPECT 成像(放射性核素标记与示踪)第31页
            4.2.3 干细胞的荧光成像第31页
            4.2.4 荧光分子断层成像(FMT)第31-32页
            4.2.5 自发荧光断层分子影像(BLT)第32页
            4.2.6 生物发光成像(bioluminescence imaging,BLI)第32页
            4.2.7 干细胞的多模态成像第32-33页
            4.2.8 各种成像示踪技术的优缺点比较第33页
            4.2.9 对干细胞体内致瘤性及安全性的分子影像评价第33-34页
            4.2.10 分子影像学在研究干细胞移植免疫排斥反应方面的应用前景第34-35页
第一部分 Apelin 对脂肪间充质干细胞在后肢缺血小鼠体内生存和功能的作用第35-52页
    1 材料第35-36页
        1.1 实验动物第35页
        1.2 主要实验仪器第35页
        1.3 主要实验试剂第35-36页
    2 方法第36-39页
        2.1 脂肪间充质干细胞分离培养与鉴定第36页
        2.2 建立后肢缺血动物模型第36页
        2.3 实验分组第36页
        2.4 ADMSCs 细胞移植第36-37页
        2.5 激光多普勒扫描检测后肢缺血模型血流第37页
        2.6 生物发光成像检测细胞存活第37页
        2.7 荧光素酶活性检测细胞活性第37页
        2.8 组织学观察细胞在组织内存活第37页
        2.9 免疫组织化学染色检测新生血管生成第37-38页
        2.10 自截肢率评价缺血程度第38页
        2.11 缺血损伤评分评价缺血损伤改善第38页
        2.12 活动损伤评分评价患肢功能改善第38页
        2.13 统计学分析第38-39页
    3 结果第39-48页
        3.1 激光多普勒成像检测后肢血流恢复第39-40页
        3.2 免疫组织化学染色检测组织内新生血管生成第40-41页
        3.3 自截肢率统计检测患肢功能恢复第41-42页
        3.4 活动损伤评分评估患肢功能恢复第42-43页
        3.5 缺血损伤评分评估患肢功能恢复第43-44页
        3.6 生物发光成像检测 ADMSCs 在体内生存第44-45页
        3.7 荧光素酶活性检测 ADMSCs 在体内生存第45-46页
        3.8 组织学检测 ADMSCs 在缺血部位存活第46-48页
    4 讨论第48-52页
第二部分 Apelin 通过调节自噬促进缺氧复氧损伤下脂肪间充质干细胞的生存和功能第52-75页
    1 材料第52-53页
        1.1 实验动物第52页
        1.2 主要实验仪器第52页
        1.3 主要实验试剂第52-53页
    2 方法第53-58页
        2.1 脂肪间充质干细胞分离培养与鉴定第53页
        2.2 建立缺氧复氧模型第53页
        2.3 实验分组第53-54页
        2.4. MTT 法检测细胞增殖能力第54页
        2.5 生物发光成像检测细胞增殖能力第54页
        2.6 TUNEL 法检测细胞凋亡第54页
        2.7 免疫荧光染色检测自噬小体生成第54-55页
        2.8 透射电子显微镜检测自噬小体生成第55页
        2.9 建立后肢缺血动物模型第55页
        2.10 激光多普勒扫描检测后肢缺血模型血流第55页
        2.11 生物发光成像检测 ADMSCs 生存第55-56页
        2.12 荧光素酶活性检测 ADMSCs 生存第56页
        2.13 免疫组织化学染色检测新生血管生成第56页
        2.14 自截肢率评价缺血程度第56页
        2.15 缺血损伤评分评价缺血损伤改善第56-57页
        2.16 活动损伤评分评价患肢功能改善第57页
        2.17 统计学分析第57-58页
    3 结果第58-70页
        3.1 MTT 法评估 Apelin 促进缺氧复氧干预下 ADMSCs 的增殖第58页
        3.2 生物发光成像评估 Apelin 促进缺氧复氧干预下 ADMSCs 的增殖第58-59页
        3.3 TUNEL 法检测 Apelin 对缺氧复氧干预下 ADMSCs 凋亡的影响第59-61页
        3.4 免疫荧光染色检测自噬小体中 LC3Ⅱ表达第61-62页
        3.5 透射电子显微镜检测自噬小体生成第62-64页
        3.6 生物发光成像检测 ADMSCs 在体内生存第64-65页
        3.7 荧光素酶检测 ADMSCs 在体内生存第65页
        3.8 激光多普勒成像检测后肢血流改善第65-66页
        3.9 免疫组织化学染色检测组织内新生血管生成第66-68页
        3.10 自截肢率统计检测患肢功能恢复第68页
        3.11 活动损伤评分检测患肢功能恢复第68-69页
        3.12 缺血损伤评分检测患肢功能恢复第69-70页
    4 讨论第70-75页
第三部分 Apelin 通过调节自噬 AMPK-mTOR-ULK1 与 Akt-Bcl2-beclin1 通路促进脂肪间充质干细胞生存的分子机制第75-89页
    1 材料第75-76页
        1.1 实验细胞第75页
        1.2 主要实验仪器第75页
        1.3 主要实验试剂第75-76页
    2 方法第76-78页
        2.1 建立缺氧复氧细胞模型第76页
        2.2 实验分组第76页
        2.3 Westernblot 检测第76-77页
        2.4 统计学分析第77-78页
    3 结果第78-85页
        3.1 Western blot 法检测缺氧与缺氧复氧损伤阶段自噬信号通路蛋白的表达第78-80页
        3.2 Western blot 法检测 Apelin 对缺氧与缺氧复氧损伤阶段自噬信号通路蛋白的表达的影响第80-83页
        3.3 Western blot 法检测分别阻断 AMPK 和 Akt 后 Apelin 缺氧与缺氧复氧损伤阶段自噬信号通路蛋白的表达第83-85页
    4 讨论第85-89页
小结第89-90页
参考文献第90-101页
个人简历和研究成果第101-103页
致谢第103页

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